陳孟廣，陳莉娟，余麗慧，俞信光，王忠華，江建銘

(1.景寧畬族自治縣林業(yè)總場(chǎng)，浙江 景寧 323500；2.浙江萬里學(xué)院，浙江 寧波315100； 3.浙江省中藥研究所有限公司，浙江 杭州 310023)

1 引言

黃精，又稱千年運(yùn)、雞頭參、老虎姜、九蒸姜、野山姜等，為我國傳統(tǒng)滋補(bǔ)中藥材之一，具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰，健脾，潤(rùn)肺，益腎等功效。多花黃精(PolygonatumcyrtonemaHua)為《中國藥典》收載的黃精藥材3個(gè)基原植物之一[1]。黃精作為我國傳統(tǒng)藥食兩用滋補(bǔ)中藥材，具有悠久的藥用歷史和確切的臨床療效，其經(jīng)“九蒸九曬”的九制黃精被廣泛應(yīng)用于保健養(yǎng)生。

景寧縣的黃精生產(chǎn)具有獨(dú)特的區(qū)位優(yōu)勢(shì)，主要呈現(xiàn)在野生資源量大質(zhì)優(yōu)、生產(chǎn)應(yīng)用歷史悠久、民族文化底蘊(yùn)深厚、政府部門高度重視、產(chǎn)業(yè)發(fā)展初具規(guī)模等，一批產(chǎn)業(yè)基地和實(shí)體企業(yè)快速發(fā)展，但加工技術(shù)粗放、產(chǎn)品結(jié)構(gòu)單一也極大阻礙了產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展前景[2]。本研究以景寧野生多花黃精為材料，利用現(xiàn)代儀器分析對(duì)不同加工工藝(蒸制容器)對(duì)總灰分、浸出物、黃精多糖等藥典指標(biāo)成分的影響，探討黃精九蒸九制過程中的藥典(炮規(guī))指標(biāo)成分變化規(guī)律，為進(jìn)一步優(yōu)化和確定適宜的炮制加工工藝和控制參數(shù)，規(guī)范產(chǎn)品精深加工炮制流程提供科學(xué)依據(jù)，同時(shí)也為黃精系列產(chǎn)品研發(fā)、促進(jìn)產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展提供技術(shù)支撐。

2 材料與方法

2.1 試驗(yàn)材料

取采自景寧縣境內(nèi)生長(zhǎng)年限和大小基本一致的野生多花黃精新鮮根莖，洗凈泥沙、除去須根后備用。

2.2 試驗(yàn)方法

2.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

以農(nóng)家蒸籠和燃?xì)庹麸埞駷檎糁迫萜鳎謩e制備樣品，并對(duì)應(yīng)稱之為農(nóng)家九制樣品和現(xiàn)代九制樣品(表1)。

表1 景寧野生多花黃精九制加工設(shè)計(jì)與處理

2.2.2 樣品制作

2.2.2.1 農(nóng)家九制樣品制備

以農(nóng)家柴火灶及蒸籠為加工器具，按下述方法分步進(jìn)行，制成9份檢測(cè)樣品。

(1)將重量約40 kg的清潔鮮根莖均勻分成9份，分別裝入9個(gè)容器中，置蒸籠中蒸制60～100 min，至中央發(fā)虛為度，待水溫自然降到30 ℃左右，取出根莖，并收集汁液另存放。

(2)將根莖曬或烘(50～70 ℃)至外皮微干后，放入(1)收集的汁液中，悶潤(rùn)至汁液吸盡，再按商品制作要求曬或烘(50～70 ℃)至成品，此為第一蒸樣品。

(3)其余8份再行第二次蒸制，按上述(1)、(2)方法制備第二份樣本，蒸制時(shí)間為120 min，如此反復(fù)蒸制、干燥、悶潤(rùn)、干燥，分別制成第二蒸、第三蒸等其余8份樣品。

2.2.2.2 現(xiàn)代九制樣品制備

以燃?xì)庹麸埞?BST-01ZFG)為加工器具，按下述方法分步進(jìn)行，制成9份檢測(cè)樣品。

(1)將重量約40 kg的清潔鮮根莖均勻分成9份，分別裝入9個(gè)容器中，置蒸飯柜中蒸制60～100 min，至中央發(fā)虛為度，待水溫降到40 ℃，取出根莖，并收集汁液另存放。

(2)將根莖曬或烘(50～70 ℃)至外皮微干后，放入(1)收集的汁液中，悶潤(rùn)至汁液吸盡，再按商品制作要求曬或烘(50～70 ℃)至成品，此為第一蒸樣品。

(3)其余8份再行第二次蒸制，按上述(1)、(2)方法制備第二份樣本，蒸制時(shí)間為120 min，如此反復(fù)蒸制、干燥、悶潤(rùn)、干燥，分別制成第二蒸、第三蒸等其余8份樣品。

2.2.3 指標(biāo)檢測(cè)

2.2.3.1 總灰分含量

按灰分測(cè)定法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP-QC-ZJ-6016)，總灰分測(cè)定法測(cè)定。

2.2.3.2 酸不溶性灰分含量

取2.2.3.1項(xiàng)所得的灰分，在坩堝中小心加入稀鹽酸約10 mL，用表面皿覆蓋坩堝，置水浴上加熱10 min，表面皿用熱水5 mL沖洗，洗液并入坩堝中，用無灰濾紙濾過，坩堝內(nèi)的殘?jiān)盟从跒V紙上，并洗滌至洗液不顯氯化物反應(yīng)為止。濾渣連同濾紙移至同一坩堝中，干燥，熾灼至恒重。根據(jù)殘?jiān)亓?，?jì)算供試品中酸不溶性灰分的含量(%)。

2.2.3.3 醇物含量

按浸出物測(cè)定法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP-QC-ZJ-6015)項(xiàng)下的熱浸法測(cè)定。

2.2.3.4 多糖含量

(1)對(duì)照品溶液的制備。取經(jīng)105 ℃干燥至恒重的無水葡萄糖對(duì)照品33 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每1 mL中含無水葡萄糖0.33 mg)。

(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備。精密量取對(duì)照品溶液0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL、0.6 mL，分別置10 mL具塞刻度試管中，各加水至2.0 mL，搖勻，在冰水浴中緩緩滴加0.2%葸酮硫酸溶液至刻度，混勻，放冷后置水浴中保溫10 min，取出，立即置冰水浴中冷卻10 min，取出，以相應(yīng)試劑為空白。照紫外一可見分光光度法，在582 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

(3)樣品的測(cè)定。測(cè)定時(shí)，取60 ℃干燥至恒重的本品細(xì)粉約0.25 g，精密稱定，置圓底燒瓶中，加80%乙醇150 mL，置水浴中加熱回流1 h，趁熱濾過，殘?jiān)?0%熱乙醇洗滌3次，每次10 mL，將殘?jiān)盀V紙置燒瓶中，加水150 mL，置沸水浴中加熱回流1 h，趁熱濾過，殘?jiān)盁坑脽崴礈?次，每次10 mL，合并濾液與洗液，放冷，轉(zhuǎn)移至250 rnl量瓶中，加水至刻度，搖勻，精密量取1mL，置10 mL具塞干燥試管中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下的方法，自“加水至2 mL”起，依法測(cè)定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中含無水葡萄糖的重量(mg)，計(jì)算，即得。本品按干燥品計(jì)算，含黃精多糖以無水葡萄糖(C6H12O6)計(jì)。

2.2.3.5 水分含量

按照《中國藥典》2015年版一部(附錄IX H)水分測(cè)定法項(xiàng)下第一法(烘干法)測(cè)定, 取不同處理多花黃精約4.0 g，精密稱定，在100～105 ℃干燥5 h，直到連續(xù)2次稱重差異不超過5 mg為止。

3 結(jié)果與分析

3.1 對(duì)總灰分和酸不溶性灰分含量變化的影響

景寧野生多花黃精農(nóng)家九制和現(xiàn)代九制藥典(炮規(guī))指標(biāo)成分檢測(cè)結(jié)果詳見表2。從表2可知，野生多花黃精在九制過程中，其總灰分和酸不溶性灰分含量變化隨蒸制次數(shù)增加呈現(xiàn)先緩慢下降，后逐步趨穩(wěn)的變化過程，鮮根莖含量最高為3.62%，農(nóng)家九制過程其總灰分和酸不溶性灰分含量分別介于2.34%～3.45%和0.64%～1.32%，而現(xiàn)代九制則分別介于2.26%～3.33%和0.63%～1.15%。從圖1和圖2 可以發(fā)現(xiàn)，無論是農(nóng)家九制還是現(xiàn)代九制，總灰分和酸不溶性灰分含量一制后均呈下降趨勢(shì)，四制后基本趨于穩(wěn)定；農(nóng)家九制比現(xiàn)代九制相比較高，但差異不明顯。

圖1 2種不同蒸制方法對(duì)總灰分含量變化影響

圖2 2種不同蒸制方法對(duì)酸不溶性灰分含量變化影響

3.2 對(duì)醇浸出物含量變化的影響

圖3為2種不同蒸制方法對(duì)醇浸出物含量變化的影響示意圖，從圖3和表2可以看出，野生多花黃精在九制過程中其醇物含量變化隨蒸制次數(shù)增加呈現(xiàn)逐步上升的變化過程，鮮根莖含量最低為60.81%，農(nóng)家九制過程其醇浸出物含量介于61.12%～71.86 %，而現(xiàn)代九制介于61.26%～71.28%，農(nóng)家九制比現(xiàn)代九制相比略高，但差異不明顯。

圖3 2種不同蒸制方法對(duì)醇浸出物含量變化影響

3.3 對(duì)黃精多糖含量變化的影響

圖4為2種不同蒸制方法對(duì)黃精多糖含量變化的影響示意圖，從圖4和表2可以看出，黃精多糖以新鮮根莖含量最高，達(dá)18.01%，隨蒸制次數(shù)呈現(xiàn)先快速下降，后下降趨緩，再相對(duì)平衡的變化過程，尤其是一制后下降顯著，下降幅度達(dá)51.4%和56.4%，其中農(nóng)家九制下降趨勢(shì)較現(xiàn)代九制來得平緩，一般五蒸后多糖含量相對(duì)平穩(wěn)，而現(xiàn)代九制則在四蒸后就趨平穩(wěn)，含量均保持在5.5%左右。

3.4 對(duì)水分含量變化的影響

圖5為2種不同蒸制方法水分含量變化示意圖，從圖5和表2可以看出，水分含量變化在多花黃精九制過程中呈無規(guī)律特征，但變化過程2種蒸制方法對(duì)比具有一定的同步性，其原因就在于2種方法制備后的樣品在同一烘箱內(nèi)干燥所致，說明九制過程中水分含量的高低主要其決于樣品制備后的干燥程度，與蒸制次數(shù)無關(guān)。

表2 多花黃精農(nóng)家九制加工方法對(duì)藥典(炮規(guī))指標(biāo)成分變化的影響

圖4 2種不同蒸制方法對(duì)黃精多糖含量變化影響

4 小結(jié)與討論

黃精九蒸九制加工法是傳統(tǒng)技藝，唐《食療本草》[3]首次提出了“九蒸九曬”加工方法，以后各代文獻(xiàn)大多沿用此法，加工產(chǎn)品稱之為九制黃精或制黃精?！吨袊幍洹?2015版)收載了黃精藥材與酒黃精，其中酒黃精制法為：取凈黃精，按每100 kg黃精，用黃酒20 kg的比例，照酒燉法或酒蒸法燉透或蒸透，稍晾，切厚片，干燥。對(duì)燉制和蒸制次數(shù)未作規(guī)定，但制定了質(zhì)量檢測(cè)指標(biāo)，總灰分不得過4.0%、醇溶性浸出物不得少于45.0%、黃精多糖不得少于4.0%和水分不得過15.0%?！墩憬≈兴幣谥埔?guī)范》(2015版)收載了制黃精[4]和制浙黃精(長(zhǎng)梗黃精Polygonatum filipes Merr.)[5]的制法，其制法為：取原藥，除去雜質(zhì)，洗凈，置適宜容器內(nèi)，蒸約8 h，燜過夜。如此反復(fù)蒸至滋潤(rùn)黑褐色時(shí)，取出，晾至半干，切厚片，干燥；或行切厚片，再蒸至滋潤(rùn)黑褐色，取出，干燥。對(duì)蒸制次數(shù)也未作規(guī)定，但在制浙黃精下增加了酸不溶性灰分不得過2.0%的檢測(cè)指標(biāo)。

圖5 2種不同蒸制方法對(duì)水分含量變化影響

本試驗(yàn)結(jié)果表明，黃精根莖在加工過程中隨著蒸制次數(shù)增加，總灰分、酸不溶性灰分和黃精多糖含量呈先下降、后趨穩(wěn)的變化過程，而醇浸出物則呈現(xiàn)逐步上升的變化過程，其中黃精多糖含量變化與張洪坤、瞿昊宇、楊圣賢[6～8]等報(bào)道的一致。農(nóng)家九制和現(xiàn)代九制相比，各指標(biāo)成分變化雖然存在一定差異，但總趨勢(shì)基本一致，均符合《中國藥典》和《浙江省中藥炮制規(guī)范》的質(zhì)量限值要求。由此可見，多花黃精在蒸制加工過程中，無論采用何種加工器具，其藥典指標(biāo)成分雖然會(huì)呈現(xiàn)或增、或降的不同變化，但其中成分變化主要在前一到四次的蒸制過程，五次后主要成分基本處于穩(wěn)定。因此從本試驗(yàn)結(jié)果，并結(jié)合《中國藥典》和《浙江省中藥炮制規(guī)范》的相關(guān)規(guī)定，多花黃精在加工過程中減少蒸制次數(shù)，優(yōu)化蒸制過程是完全可行，不僅不會(huì)對(duì)藥典指標(biāo)成分造成影響，而且有利于提高加工效率，減少能源消耗，促進(jìn)生態(tài)保護(hù)，對(duì)工藝優(yōu)化研究意義重大。