李薇薇

[摘要]目的 探究血清甲胎蛋白（AFP）、甲胎蛋白異質(zhì)體（AFP-L3）、異常凝血酶原（DCP）、鱗狀細胞癌抗原（SCCA）聯(lián)合檢測在肝細胞癌（HCC）的診斷價值。方法 選取2017年5月～2019年5月我院就診的40例HCC患者、42例肝硬化（LC）患者、54例慢性乙型肝炎（CHB）患者、50例健康體檢者的血清學(xué)指標及臨床資料。檢測各組受試者血清AFP、AFP-L3、DCP、SCCA的水平，比較4項血清標志物單獨及聯(lián)合診斷的工作特征曲線下面積。結(jié)果 與健康組比較，HCC組、LC組、CHB組血清AFP、AFP-L3、DCP、SCCA水平升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）;與LC組、CHB組比較，HCC組血清AFP、AFP-L3、DCP、SCCA水平升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。4項指標聯(lián)合檢測的曲線下面積均大于四者的單獨檢測。結(jié)論 AFP、AFP-L3、DCP、SCCA聯(lián)合檢測具有較高診斷效能，可為早期診斷HCC提供參考。

[關(guān)鍵詞]肝細胞癌;甲胎蛋白類;異常凝血酶原;鱗狀細胞癌抗原;診斷

[中圖分類號] R735.7? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-4721（2020）8（a）-0094-04

Diagnostic value of combined detection of serum alpha-fetoprotein， alpha-fetoprotein heterogeneity-L3， des-gamma-carboxyprothrombin， squamous cell carcinoma antigen in hepatocellular carcinoma

LI Wei-wei

Department of Laboratory， Qingdao sanatorium of Shandong Province， Shandong Province， Qingdao? ?266071， China

[Abstract] Objective To explore the diagnostic value of combined detection of serum alpha-fetoprotein （AFP）， alpha-fetoprotein heterogeneity-L3 （AFP-L3）， des-gamma-carboxyprothrombin （DCP）， squamous cell carcinoma antigen （SCCA） in hepatocellular carcinoma （HCC）. Methods From May 2017 to May 2019， 40 patients with HCC， 42 patients with liver cirrhosis （LC）， 54 patients with chronic hepatitis B （CHB）， and 50 healthy people were selected from our hospital for serological indicators and clinical data. The levels of serum AFP， AFP-L3， DCP and SCCA were measured in each group， and the area under the curve of receiver operating characteristic （ROC） of 4 serum markers， alone or in combination， were compared. Results The levels of AFP， AFP-L3， DCP and SCCA in HCC group， LC group and CHB group were higher than those in the healthy group， the differences were statistically significant （P<0.01）. The levels of AFP， AFP-L3， DCP and SCCA in HCC group were higher than those in LC group and CHB group， the differences were statistically significant （P<0.01）. The area under ROC curve of the combined detection were all higher than those of four individual detections. Conclusion The combined detection of AFP， AFP-L3， DCP， and SCCA has a high detection efficiency， and provide a reliable reference for the early diagnosis of HCC.

[Key words] Hepatocellular carcinoma; Alpha-fetoproteins; Des-gamma-carboxyprothrombin; Squamous cell carcinoma antigen; Diagnosis

肝細胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是全球第六位常見惡性腫瘤，位列第三的腫瘤致死病因，按病理類型占肝癌的85%～90%[1-2]。由于肝癌進展快、預(yù)后差的特點，多數(shù)肝癌患者確診時已處于腫瘤中晚期，因此對肝癌患者的早期發(fā)現(xiàn)和早期診斷尤為重要。血清甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）是肝癌診斷中最常用的指標，但單獨使用血清AFP診斷肝癌的特異性和靈敏性尚有欠缺，仍有部分肝癌患者血清AFP檢測呈陰性，一定程度上增加了早期診斷HCC的難度。近年來，其他血清標志物也逐步應(yīng)用于HCC的早期診斷，本研究聯(lián)合檢測血清AFP、甲胎蛋白異質(zhì)體（alpha-fetoprotein heterogeneity-L3，AFP-L3）、異常凝血酶原（des-gamma-carboxyprothrombin，DCP）、鱗狀細胞癌抗原（squamous cell carcinoma antigen，SCCA）在HCC患者血清中的表達水平，以確定這4項血清標志物聯(lián)合檢測對HCC的診斷價值，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2017年5月～2019年5月我院就診采集的HCC患者血清標本40例（HCC組），肝硬化患者血清標本42例（LC組），慢性乙型肝炎患者血清標本54例（CHB組）和健康體檢者血清標本50例（健康組）。HCC組中，男24例，女16例;年齡34～85歲，平均（55.2±11.4）歲。LC組中，男25例，女17例;年齡41～76歲，平均（57.1±9.2）歲。CHB患者組中，男30例，女24例;年齡24～85歲，平均（52.6±13.9）歲。健康組中，男20例，女30例;年齡21～74歲，平均（47.0±13.1）歲。四組患者一般資料進行比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

HCC組依據(jù)《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范（2017年版）》[2]標準納入;LC組依據(jù)《肝硬化中西醫(yī)結(jié)合診療共識》[3]標準納入，CHB組依據(jù)《慢性乙型肝炎防治指南（2015年更新版）》[4]診斷。排除標準：①合并嚴重的免疫系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)或血液系統(tǒng)疾病者;②伴有其他器官或組織的腫瘤者;③近3個月口服過華法林、維生素K、抗菌藥物者;④曾行肝動脈化療栓塞、射頻消融、肝臟外科切除等相關(guān)治療者。本研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會赫爾辛基宣言》相關(guān)要求，經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會同意，所有患者對本研究知情同意。

1.2方法

用一次性采血管采集各組受試者空腹靜脈血5 ml，靜置10 min后3000 r/min離心15 min，分離血清，當日檢測。采用化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法檢測DCP;化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測血清總AFP和AFP-L3的含量，計算出AFP-L3%，即為AFP-L3占血清AFP總量的百分比，化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測SCCA含量;儀器為安圖Auto Lumo A 2000全自動化學(xué)發(fā)光分析儀，試劑及標準品均由安圖公司配套提供，各指標檢測均按試劑盒說明書和儀器標準操作步驟進行，并且室內(nèi)質(zhì)控在控，室間質(zhì)控合格。

陽性判斷標準：血清AFP診斷原發(fā)性肝癌的陽性界值定為400 μg/L，AFP-L3%>10%，DCP>40 m AU/ml，SCCA>1.5 ng/ml。樣本檢測值超過正常值上限為陽性，低于正常值上限為陰性。本研究采用平行試驗，即聯(lián)合檢測時其中1項陽性就認為是4項聯(lián)合檢測為陽性。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，進行數(shù)據(jù)的正態(tài)性檢驗、方差齊性檢驗。正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，多組比較采用方差分析，多組之間兩兩比較采用LSD-SNK檢驗;不符合正態(tài)分布的計量資料采用中位數(shù)和四分位數(shù)間距[M（Q25，Q75）]描述，多組間比較采用Kruskal-Wallis H檢驗。用Logistic回歸篩選變量并建立回歸方程，對新變量及各單項指標繪制受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線，并比較曲線下面積（area under curve，AUC）。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1四組血清標志物表達水平的比較

與健康組比較，HCC組、LC組、CHB組血清AFP、AFP-L3、DCP、SCCA水平升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）;與LC組、CHB組比較，HCC組血清AFP、AFP-L3、DCP、SCCA水平升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）（表1）。

2.2單項及聯(lián)合診斷HCC的ROC曲線分析

繪制血清AFP、AFP-L3、DCP及SCCA單項及聯(lián)合檢測的ROC曲線（圖1，封四），四項指標聯(lián)合檢測的曲線下面積（AUCROC）最大（0.943），診斷準確性較高（表2）。單項檢測時AFP-L3%的AUCROC（0.910）>DCP的AUCROC（0.878）>AFP的AUCROC（0.829）>SCCA的AUCROC（0.604）。

3討論

血清AFP是目前診斷肝細胞癌使用最廣泛血清標志物[5]，但敏感性和特異性仍不夠理想。據(jù)報道，血清AFP的敏感性和特異性分別在39%～64%和76%～91%之間[6]。在檢測小肝癌或早期肝癌時，部分患者血清AFP水平仍存在假陰性的情況，而在肝硬化或無HCC的慢性重型肝炎患者中，血清AFP常常顯著升高[7]。血清AFP單項檢測對HCC診斷的靈敏性和特異性已無法滿足臨床需求。近年來越來越多的血清標志物出現(xiàn)，在一定程度上彌補了血清AFP敏感性不足的問題，也顯著提高了診斷的特異性。

AFP-L3是HCC早期診斷高特異性標志物。研究表明，即使HCC尚處于早期階段，惡性肝細胞也會產(chǎn)生AFP-L3，如大約有35%的小肝癌（直徑<2 cm）患者可檢測出血清AFP-L3升高[8]。一項臨床試驗表明，確診HCC前1年，有34.3%的患者AFP-L3升高，且AFP-L3%≥7%患者的生存率明顯低于AFP-L3%<7%的患者[9]。因此，在血清AFP水平較低且超聲未見可疑結(jié)果的情況下，AFP-L3可作為HCC發(fā)展的早期預(yù)測因素。既往研究[10]提示，血清AFP-L3和AFP水平存在很強的相關(guān)性，但AFP-L3%的升高不依賴于血清AFP的升高，故為提升肝癌的診斷效能，血清AFP宜與AFP-L3%進行聯(lián)合檢測，而不是AFP-L3。

DCP是由于肝細胞在惡性轉(zhuǎn)化過程中，維生素K依賴的羧化酶系統(tǒng)受損，羧化作用缺陷，從而產(chǎn)生的異常凝血酶原分子。在這一過程中，DCP失去了其正常的凝血酶原功能，可能在HCC中起到促進惡性增殖的作用。一項前瞻性研究[11]表明，HCC患者與肝硬化和慢性肝炎患者相比，DCP的敏感性為72.7%，特異性為90.0%。由于血清AFP和DCP并沒有嚴格的相關(guān)性，且DCP的特異性優(yōu)于AFP，因此聯(lián)合檢測可以有效提高HCC的檢出率[12]。聯(lián)合檢測DCP、AFP及AFP-L3對HCC檢測顯示出較好的靈敏性和特異性[13]。

SCCA是一種腫瘤相關(guān)蛋白，是高分子量絲氨酸蛋白酶抑制劑家族的成員。Guido等[14]發(fā)現(xiàn)，SCCA在再生組織中表達較弱，而在HCC和發(fā)育異常結(jié)節(jié)中的表達卻顯著增加，表明其是早期發(fā)現(xiàn)HCC的潛在標志物。一項Meta分析[15]表明，SCCA在HCC篩查中均顯示出中等診斷度。SCCA的高敏感性和低特異性對AFP進行了補充，并為輔助診斷HCC提供了一定證據(jù)。研究[16]表明，與較大的肝癌相比，SCCA在較小的肝癌中有更明顯的表達，提示其在HCC早期診斷中可能起到重要作用。

鄒珍珍等[17]發(fā)現(xiàn)，血清AFP-L3、DCP聯(lián)合檢測對HCC患者具有較強的診斷效能，兩者聯(lián)合檢測可提高HCC的早期檢出率，減少漏檢率。張明躍等[18]證實，AFP、DCP及AFP-L3%聯(lián)合檢測能提高HCC的診斷效能。本研究結(jié)果顯示，HCC組血清AFP、AFP-L3、DCP、SCCA水平高于LC組、CHB組、健康組（P<0.05），提示檢測上述4項指標能為HCC的診斷提供依據(jù)。此外，本研究還探討了上述4項指標聯(lián)合檢測對HCC的診斷價值，結(jié)果顯示，4項指標聯(lián)合檢測的曲線下面積（AUCROC）最大（0.943），診斷準確性較高。

綜上所述，血清AFP、AFP-L3、DCP、SCCA聯(lián)合檢測具有較高診斷效能，可為早期診斷HCC提供參考，但其在臨床中大規(guī)模的推廣應(yīng)用有待進一步研究和驗證。

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（收稿日期：2020-03-11）