胡佩 崔萍 杜云*

（1.南京大學，化學化工學院；2.南京工業(yè)大學江蘇省藥物研究所有限公司）

由于藥物包裝材料在生產(chǎn)、貯存和使用的過程中會因受到多方面因素影響而發(fā)生老化，導致其強度、伸長率等物理性能的大幅下降，因此在生產(chǎn)過程中通常會加入抗氧劑抑制或延緩其老化。故抗氧劑又被稱為“防老劑”，僅少量存在時就可延緩或抑制聚合物老化并延長其使用壽命，廣泛應用于橡膠、塑料、化纖等高分子材料中［1-5］。隨著近年來對抗氧劑的重視度的提升，對抗氧劑的報道有很多［6-9］，但是針對藥用包裝材料中抗氧劑含量同時檢測的報道很少［10-13］，而且由于包裝材料中抗氧劑的添加量本身就微量，用普通的液相色譜法紫外檢測器法有的抗氧劑靈敏度跟不上，本文從提高檢測靈敏度和檢測效率的角度，采用了高效液相色譜-串聯(lián)質譜法對藥品包裝材料中的九種抗氧劑（雙酚A、抗氧劑264（2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚）、抗氧劑2264（2,2"-亞甲基雙-(4-甲基-6-叔丁基苯酚)）、抗氧劑1035（2,2’-硫代雙[3-(3,5-二叔丁基-4-羥基苯基)丙酸酯]）、抗氧劑129（2，2- 亞乙基- 二（4，6 二叔丁基苯酚））、抗氧劑1010（四［β -（3，5-二叔丁 基-4-羥基苯基）丙酸］季戊四醇酯）、抗氧劑330（1,3,5-三甲基-2,4,6-三(3,5-二叔丁基-4-羥基芐基)苯）、抗氧劑1076（β -（3,5-二叔丁基-4-羥基苯基）丙酸正十八碳醇酯）和抗氧劑168（三[2.4-二叔丁基苯基]亞磷酸酯））進行初步研究，取得了很好的實驗結果，為藥品包裝材料中抗氧劑的研究提供了一定的參考。

1. 實驗部分

1.1 儀器與試劑

LCMS-8040 三重四極桿液相色譜質譜聯(lián)用儀，含SPD-M20A 二極管陣列紫外檢測器和LCsolution 工作站（Shimadzu 公司）；超聲波清洗器（昆山舒美KQ5200，200W，40KHz）；離心機（英泰TD6C）；超純水儀（法國Millipore 公司）。

甲醇（色譜純，Merck 公司）、無水乙醇為分析純；對照品相關信息。樣品：本研究收集了6個企業(yè)生產(chǎn)的不同包裝材料，樣品A（冷凍干燥注射用溴化丁基橡膠塞，湖北產(chǎn)）、樣品B（冷凍干燥注射用溴化丁基橡膠塞，江陰產(chǎn)）、樣品C（冷凍干燥注射用溴化丁基橡膠塞，山東產(chǎn)）、樣品D（聚丙烯PP 輸液瓶）、樣品E（PVC 輸液器軟管部分）和樣品F（三層共擠輸液袋）。

1.2 實驗方法

1.2.1 溶液配制

對照品儲備溶液分別精密稱取對照品雙酚A 2.2 mg、抗氧劑264 1.71 mg、抗氧劑2246 1.6 mg、抗氧劑1035 36.6 mg、抗氧劑129 3.17 mg、抗氧劑1010 2.32 mg、抗氧劑330 4.0 mg、抗氧劑1076 5.71 mg 和抗氧劑168 2.76 mg，置于10 mL 量瓶中，甲醇溶解，稀釋，定容。作為對照品儲備液。

混合對照品溶液分別精密量取各抗氧劑對照品儲備液適量，置于同一容量瓶中，混合均勻，即得混和對照品溶液，其中每毫升含雙酚A 1.268 μ g、264 49.28 μ g、1035 1060.52 μ g、2246 0.615 μ g、129 32.37 μ g、1010 1.11 μ g、330 1.92 μ g、1076 274.26 μ g 和168 2.65 μ g。

藥用溴化丁基膠塞的浸提供試品溶液分別取廠家A、B、C 的膠塞各10 只剪碎（每只約2.3 g），加入無水乙醇30 mL，在40℃下超聲浸提4 h，冷卻后離心（2000 r·min-1）30 min，取上清液，即得供試品溶液A、B、C。

PVC 輸液器的浸提供試品溶液，取樣品D 軟管部分剪碎，取8 g，加入無水乙醇30 mL，在40℃下超聲浸提4 h ，冷卻后離心（2000 r·min-1）30 min，取上清液，即得供試品溶液D。

PP 輸液瓶的浸提供試品溶液，取樣品E 剪碎，取6g，加入無水乙醇30 mL，在40℃下超聲浸提4 h，冷卻后離心（2000 r·min-1）30 min， 取上清液，即得供試品溶液E。

三層共擠輸液瓶的浸提供試品溶液，取樣品F 剪碎，取4 g，加入無水乙醇30 mL，在40℃下超聲浸提4 h，冷卻后離心（2000 r·min-1）30 min，取上清液，即得供試品溶液F。

1.2.2 色譜條件

色譜柱：島津Shim-pack GIST C18（2.1 mm×100 mm，5 μ m）；流動相A：甲醇-水（90:10）；流動相B：甲醇，梯度程序：0~9 min，100%A；9~10 min，0%A；10~25 min，0%A；25.1 min，100%A；35 min，stop。流速：0.3 mL·min-1；檢測波長：200~400 nm（220 nm）；柱溫：40 ℃；進樣體積：1 μ L。

1.2.3 質譜條件

離子源：電噴霧離子源ESI；負離子MRM分段掃描模式（優(yōu)化參數(shù)見表 1）；DL 溫度：250 ℃；接口溫度：350 ℃；加熱塊溫度：400 ℃；霧化氣流量：3.00 L·min-1；干燥器流量：15 L·min-1；接口電壓：-3.5 kV；轉換打拿極：6.0 kV；CID 氣：230 kPa。

表1 九種抗氧劑的質譜優(yōu)化條件

圖1 混合對照品溶液色譜圖（A）、質譜圖（B）

2. 結果與討論

2.1 專屬性試驗

取混合對照品溶液，按“1.2.2”和“1.2.3”項下條件進樣分析。色譜圖見圖1。

2.2 靈敏度試驗

取“2.1”項下對照品溶液適量，以甲醇逐級稀釋進樣，按“2.2”項下條件分別進樣分析，記錄色譜圖，分別以S/N=3、S/N=10 測得各抗氧劑的最低檢測限和定量限。分別精密量取“2.1”項下九種抗氧劑對照品儲備液適量，用流動相B 稀釋制得系列混合溶液，按“2.2”項下條件分別進樣，記錄色譜圖，以濃度C 為橫坐標，峰面積A為縱坐標，進行線性回歸，結果見表2。

2.3 回收率及精密度試驗

取空白藥包材樣品適量，分別精密加入抗氧劑對照品低、中、高溶液適量，按“2.1”項下方法制備加樣回收率供試溶液，每個添加水平做5組平行試驗，計算RSD%。結果9 種抗氧劑的回收率為79.0%~101.6%，相對標準偏差（RSD）為1.07%~6.15%，見表3。

2.4 溶液穩(wěn)定性試驗

取“2.1”項下混合對照品溶液，按“2.2.1”項下 條件分別于0、2、4、6、8 和12 h 進樣測定，結果表明溶液在12 h 內穩(wěn)定。

2.5 樣品分析

取“2.1”項下六批供試品溶液，按“2.2.1”項下條件進樣，結果見表4。

表2 靈敏度及線性范圍試驗結果

表3 方法的回收率和精密度

表4 六批樣品測定結果（μg/mL）

3. 結論

本工作采取了高效液相色譜-串聯(lián)質譜法同時對藥用包裝材料中的9 種抗氧劑進行測定。該方法的專屬性、準確度、精密度完全能夠滿足檢測要求，靈敏度遠高于紫外檢測的方法。

本試驗目前僅在方法開發(fā)上作了相應的方法學研究，通過實驗也可以看出該方法下抗氧劑264 和1076 的檢出限比較高，檢測靈敏度還有待進一步優(yōu)化，日后在收集大量樣本的基礎上，需要繼續(xù)對藥品包裝材料中抗氧劑在不同藥物溶液中的遷移情況進行研究[14-15]。