滿婷婷 王德剛 歐德明 趙婧 梁少霞

【摘要】 目的 分析產(chǎn)前血清學(xué)篩查高風(fēng)險病例行介入性產(chǎn)前診斷后的胎兒染色體結(jié)果， 探討羊水細胞核型分析在產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用價值。方法 收集2637例以唐氏篩查高風(fēng)險為指征行介入性產(chǎn)前診斷查胎兒染色體核型分析的病例， 對其進行羊水細胞培養(yǎng)及核型分析。統(tǒng)計羊水染色體核型分析結(jié)果， 比較唐氏篩查高風(fēng)險風(fēng)險值不同區(qū)間染色體異常的發(fā)生率。結(jié)果 2604例病例中， 染色體異常檢出率為4.26%（111/2604）。111例染色體核型異常中以非整倍體最多見， 共98例， 占異常病例的88.29%;結(jié)構(gòu)異常13例， 占異常病例的11.71%。結(jié)構(gòu)異常的病例中， 6例為平衡性的染色體異常。同時檢出染色體多態(tài)變異73例（2.80%）。21-三體風(fēng)險值區(qū)間1～50染色體異常發(fā)生率明顯高于其他區(qū)間， 差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。18-三體風(fēng)險值區(qū)間1～50染色體異常發(fā)生率與51～100區(qū)間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）， 但明顯高于其他區(qū)間， 差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。21-三體高風(fēng)險和18-三體高風(fēng)險染色體微陣列分析（CMA）異常發(fā)生率分別為8.39%（12/143）和14.29%（7/49）， 比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;但21-三體高風(fēng)險和18-三體高風(fēng)險中致病性拷貝數(shù)變異（CNVs）的檢出率分別為0.70%（1/143）和8.16%（4/49）， 比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 唐氏篩查高風(fēng)險病例染色體異常檢出率為4.26%， 以非整倍體最多見。21-三體篩查風(fēng)險值處于1～50區(qū)間病例發(fā)生染色體異常幾率高于其他區(qū)間， 應(yīng)強調(diào)該風(fēng)險值區(qū)間行介入性產(chǎn)前診斷的必要性。對于18-三體高風(fēng)險病例在行介入性產(chǎn)前診斷時建議同時行CMA檢測。

【關(guān)鍵詞】 血清學(xué)篩查;高風(fēng)險產(chǎn)前診斷;染色體異常

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.23.031

產(chǎn)前血清學(xué)篩查是出生缺陷防治過程中十分重要的環(huán)節(jié)， 我國自2002年開始了以唐氏綜合征等常見的染色體異常為主要目標疾病的產(chǎn)前篩查和產(chǎn)前診斷。唐氏綜合征篩查（簡稱唐篩）在全球范圍內(nèi)被證實是一種簡便、經(jīng)濟、有效的可用于染色體異常篩查的產(chǎn)前篩查方法[1]。篩查結(jié)果為高風(fēng)險的人群需通過介入性穿刺明確診斷， 染色體核型分析技術(shù)是確診的金標準[2]。本文收集2015年1月～2019年9月以唐篩高風(fēng)險為產(chǎn)前診斷指征進行羊膜腔穿刺羊水細胞染色體核型分析的2637例病例， 對本中心的羊水結(jié)果進行分析總結(jié)， 探討核型分析在產(chǎn)前診斷中的臨床應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 收集2015年1月～2019年9月在中山市博愛醫(yī)院以唐篩高風(fēng)險（21-三體截斷值≥1/270、18-三體截斷值≥1/380）為產(chǎn)前診斷指征進行羊膜腔穿刺羊水細胞染色體核型分析的2637例病例， 除外羊水培養(yǎng)失敗及染色體核型為嵌合體病例， 共有2604例納入分析。

1. 2 方法 所有病例進行羊水細胞培養(yǎng)及核型分析。將抽取的羊水離心后棄去上清， 沉淀制成細胞懸液接種在細胞培養(yǎng)基。37℃培養(yǎng)7 d顯微鏡下觀察羊水細胞貼壁情況， 生長良好有多個克隆時收獲并常規(guī)制片G顯帶， 依行業(yè)標準行染色體核型分析。

1. 3 觀察指標 統(tǒng)計羊水染色體核型分析結(jié)果， 比較唐氏篩查高風(fēng)險風(fēng)險值不同區(qū)間染色體異常的發(fā)生率。

1. 4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2 檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 羊水染色體核型分析結(jié)果 2604例病例中， 染色體異常檢出率為4.26%（111/2604）。111例染色體核型異常中以非整倍體最多見， 共98例， 占異常病例的88.29%;結(jié)構(gòu)異常13例， 占異常病例的11.71%。結(jié)構(gòu)異常的病例中， 6例為平衡性的染色體異常。同時檢出染色體多態(tài)變異73例（2.80%）。見表1。

2. 2 21-三體和18-三體篩查高風(fēng)險值不同區(qū)間染色體異常發(fā)生率比較 21-三體風(fēng)險值區(qū)間1～50染色體異常發(fā)生率明顯高于其他區(qū)間， 差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=10.081、11.033、6.295， P=0.001、0.001、0.012<0.05）。18-三體風(fēng)險值區(qū)間1～50染色體異常發(fā)生率與51～100區(qū)間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=3.773， P=0.056>0.05）， 但明顯高于其他區(qū)間， 差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=8.594、12.446， P=0.004、P=0.000<0.05）。見表2。

4. 2. 3 21-三體高風(fēng)險和18-三體高風(fēng)險CMA異常發(fā)生率和致病性CNVs檢出率比較 195例唐氏篩查高風(fēng)險病例行染色體核型分析的同時進行了CMA檢查， 剔除3例非整倍體， 21-三體高風(fēng)險和18-三體高風(fēng)險CMA異常發(fā)生率分別為8.39%（12/143）和14.29%（7/49）， 比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=1.422， P=0.233>0.05）;但21-三體高風(fēng)險和18-三體高風(fēng)險中致病性CNVs的檢出率分別為0.70%（1/143）和8.16%（4/49）， 比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=8.016， P=0.016<0.05）。

3 討論

唐氏篩查作為一種簡便、經(jīng)濟、有效的篩查方法， 被廣泛用于孕期胎兒染色體非整倍體的檢查。篩查結(jié)果為高風(fēng)險的人群， 需進一步通過介入性產(chǎn)前診斷， 如絨毛取樣或羊膜腔穿刺方可確診。本研究中， 2604例羊水染色體結(jié)果異常核型的檢出率為4.26%， 與國內(nèi)外報道的數(shù)據(jù)相近[3-5]， 但高于國內(nèi)潘敏等[6]報道的3.0%。這與不同研究中篩查采用的高風(fēng)險截斷值不一致以及各個產(chǎn)前診斷中心因篩查高風(fēng)險進行產(chǎn)前診斷的人群并非均來自本中心篩查人群導(dǎo)致存在一定的偏倚有關(guān)。本中心使用的檢測儀器、計算風(fēng)險的軟件以及風(fēng)險截斷值與歐珊等[3]研究中的一致， 報道的產(chǎn)前診斷的染色體異常檢出率與其相近。111例染色體核型異常的病例中， 染色體結(jié)構(gòu)異常占11.71%。目前無創(chuàng)DNA因其高檢出率和無創(chuàng)性而得到廣泛應(yīng)用， 不少唐氏篩查高風(fēng)險的孕婦選擇先行無創(chuàng)DNA檢查。雖然無創(chuàng)DNA對21-三體、18-三體和13-三體的檢出率分別可達到99.0%、91.9%和98.9%[7， 8]， 但對其他染色體非整倍體檢出率有限， 且無法檢測染色體的結(jié)構(gòu)異常， 因此篩查結(jié)果為高風(fēng)險人群在選擇行無創(chuàng)DNA時需告知漏診染色體結(jié)構(gòu)異常的風(fēng)險， 建議將介入性產(chǎn)前診斷作為首選， 染色體核型分析仍然是唐篩高風(fēng)險病例獲得診斷的金標準。

結(jié)果顯示， 21-三體風(fēng)險值區(qū)間1～50染色體異常發(fā)生率明顯高于其他區(qū)間， 差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。18-三體風(fēng)險值區(qū)間1～50染色體異常發(fā)生率與51～100區(qū)間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）， 但明顯高于其他區(qū)間， 差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。根據(jù)本結(jié)果， 可指導(dǎo)臨床醫(yī)生在進行遺傳咨詢時對于篩查結(jié)果為高風(fēng)險的孕婦根據(jù)其具體的篩查風(fēng)險值所處區(qū)間告知胎兒出現(xiàn)染色體異常的可能性， 理性面對篩查結(jié)果， 從而減少孕婦的焦慮。

CMA作為一項檢測染色體微小缺失和重復(fù)的檢測技術(shù)， 越來越多的應(yīng)用于產(chǎn)前超聲檢查異常的孕婦中， 可在染色體核型正常的基礎(chǔ)上明顯提高胎兒染色體異常的檢出率[9， 10]。唐海深等[11]曾就549例因非結(jié)構(gòu)異常胎兒染色體微陣列芯片結(jié)果進行了分析， 檢出的致病性CNVs中， 21-三體高風(fēng)險檢出率為1.93%， 18-三體高風(fēng)險檢出率為13.79%。本文中195例唐篩高風(fēng)險孕婦進行了CMA檢測， 剔除3例非整倍體， 143例21-三體高風(fēng)險檢出致病性CNVs 1例， 檢出率0.70%;49例18-三體高風(fēng)險檢出致病性CNVs 4例， 檢出率為8.16%， 與唐海深等[11]報道的18-三體高風(fēng)險病例的致病性CNVs檢出率高于21-三體的結(jié)論一致。

綜上所述， 在唐篩高風(fēng)險孕婦選擇介入性產(chǎn)前診斷查胎兒染色體核型時， 可建議篩查結(jié)果為18-三體高風(fēng)險的孕婦同時行CMA， 以免漏診染色體微小缺失或重復(fù)。因本研究中因唐篩高風(fēng)險行CMA檢測的例數(shù)有限， 需要積累更多的相關(guān)數(shù)據(jù)， 對這一結(jié)論進行驗證。

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[收稿日期：2020-05-22]