張玉瓊

【摘要】 目的 研究凝聚胺技術(shù)在輸血檢驗(yàn)中的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 136例血液樣本作為研究對(duì)象， 隨機(jī)分為參照組和研究組， 每組68份。參照組血液樣本采用鹽水法進(jìn)行檢驗(yàn)分析， 研究組血液樣本采用凝聚胺技術(shù)進(jìn)行檢驗(yàn)分析。觀察比較兩組血液檢測(cè)結(jié)果， 并分析研究組非特異性凝集、特異性凝集消失時(shí)間。結(jié)果 研究組對(duì)免疫球蛋白G（IgG）抗體的檢測(cè)靈敏度為98.5%（67/68）高于參照組的88.2%（60/68）， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。研究組非特異性凝集消失時(shí)間5～10 s有35份、11～20 s有33份， 21 s～3 min以及>3 min均為0;特異性凝集消失時(shí)間5～10 s有68份， 其他時(shí)間均為0;研究組非特異性凝集、特異性凝集消失時(shí)間分布情況比較， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 凝聚胺技術(shù)相較于鹽水法具有更為顯著的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)， 具有靈敏性突出、操作簡(jiǎn)單、反應(yīng)敏捷的特點(diǎn)， 能夠有效預(yù)防溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生， 值得用于臨床推廣使用。

【關(guān)鍵詞】 輸血檢驗(yàn);凝聚胺技術(shù);臨床應(yīng)用;價(jià)值研究

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.23.091

當(dāng)下臨床醫(yī)學(xué)中廣泛投入了輸血治療的應(yīng)用， 尤其是在出血性疾病的治療中更是得到了普及， 該治療方式能夠促進(jìn)機(jī)體血液循環(huán)， 保持一定的穩(wěn)定性， 從而落實(shí)治療療效， 保障患者生命安全。而輸血檢驗(yàn)是輸血前必須實(shí)施的操作， 有助于減少輸血不良反應(yīng)的發(fā)生， 保障輸血治療的有效性、安全性。當(dāng)前， 在各種不完全抗體的檢測(cè)中廣泛投入了凝聚胺技術(shù)的應(yīng)用， 同傳統(tǒng)的鹽水法比較， 該方法具有靈敏度高、操作簡(jiǎn)易等優(yōu)勢(shì)， 相較于常規(guī)技術(shù)具有更為突出的輸血檢驗(yàn)效果。與此同時(shí)， 凝聚胺技術(shù)在抗體篩選、不完全抗體檢測(cè)等方面也得到了普及應(yīng)用。本文選擇本院2018年12月～2019年12月收集的136份血液樣本作為研究對(duì)象， 分析凝聚胺技術(shù)在輸血檢驗(yàn)中的臨床應(yīng)用價(jià)值， 具體內(nèi)容如下。

1 材料與方法

1. 1 材料來(lái)源 選擇本院在2018年12月～2019年12月收集的136份血液樣本作為研究對(duì)象， 將其隨機(jī)分為參照組和研究組， 每組68份。參照組血液樣本來(lái)源的68例患者中， 男36例， 女32例;年齡20～68歲， 平均年齡（43.5±8.2）歲。研究組血液樣本來(lái)源的68例患者中， 男38例， 女30例;年齡20～69歲， 平均年齡（43.8±8.4）歲。兩組血液樣本來(lái)源患者的一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：所有樣本參與研究均通過(guò)知情人同意;所有血液樣本均為健康樣本。排除標(biāo)準(zhǔn)：有影響本研究結(jié)果病癥患者的血液樣本;有血液疾病患者的血液樣本;有精神障礙患者的血液樣本;哺乳期、妊娠期患者的血液樣本。

1. 3 檢驗(yàn)方法 參照組血液樣本采用鹽水法進(jìn)行檢驗(yàn)分析， 分別選取2 ml獻(xiàn)血者/受試者的血樣， 注入無(wú)菌處理后清潔干燥的試管中， 使用基礎(chǔ)方法將血清分離， 并在含有少量生理鹽水的試管中滴入若干血樣， 由此完成5%紅細(xì)胞生理鹽水懸液的備置。然后分別將1滴獻(xiàn)血者備用懸液、1滴受試者血清加入主側(cè)管中， 再將1滴獻(xiàn)血者備用懸液、1滴受試者血清加入次側(cè)管中， 輕輕搖晃促使兩者混合， 待其發(fā)生沉淀反應(yīng)，?3 min后觀察凝集結(jié)果。

研究組血液樣本采用凝聚胺技術(shù)進(jìn)行檢驗(yàn)分析， 使用凝聚胺介質(zhì)試劑（珠海貝索生物技術(shù)公司）完成[1]。在主側(cè)管中添加2滴受試者血液樣本中分離的血清， 然后加入1滴獻(xiàn)血者的紅細(xì)胞懸液（3%～5%）;同時(shí)， 在次側(cè)管中添加獻(xiàn)血者血清2滴， 再添加1滴受試者紅細(xì)胞懸液（3%～5%）;然后將0.55 ml低離子溶液分別置入2個(gè)試管中， 輕輕搖晃促使兩者混合， 然后置入凝聚胺溶液2滴， 輕輕搖晃兩者均勻后使用3500 r/min的離心機(jī)離心10 s， 完成后將離心后試管上部的清液倒出， 以試管底步0.1 ml的殘留液體為最佳。最后， 輕輕晃動(dòng)試管查看是否出出現(xiàn)紅細(xì)胞凝聚的現(xiàn)象， 如果未出現(xiàn)則需再次檢測(cè)。該操作完成后取懸浮液2滴分別注入2個(gè)試管中， 輕輕搖晃均勻同時(shí)觀察試管的變化， 如果凝聚現(xiàn)象在1 min之內(nèi)消失， 說(shuō)明紅細(xì)胞出現(xiàn)非特異性凝集， 則表明為陰性檢驗(yàn)結(jié)果， 同配血相吻合;相對(duì)的， 如果1 min之內(nèi)沒(méi)有消失， 說(shuō)明表現(xiàn)為特異性凝集， 則表明為陽(yáng)性檢驗(yàn)結(jié)果， 同配血不吻合， 提示配血失敗。

1. 4 觀察指標(biāo) 觀察比較兩組血液檢測(cè)結(jié)果， 并分析研究組非特異性凝集、特異性凝集消失時(shí)間。

1. 5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 兩組血液檢測(cè)結(jié)果比較 研究組對(duì)IgG抗體的檢測(cè)靈敏度為98.5%（67/68）高于參照組的88.2%（60/68）， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2. 2 研究組非特異性凝集、特異性凝集消失時(shí)間分析 研究組非特異性凝集消失時(shí)間5～10 s有35份、11～20 s有33份， 21 s～3 min以及>3 min均為0;特異性凝集消失時(shí)間5～10 s有68份， 其他時(shí)間均為0;研究組非特異性凝集、特異性凝集消失時(shí)間分布情況比較， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

3 討論

輸血治療已然在臨床疾病診治中得到了廣泛應(yīng)用， 同時(shí)， 臨床醫(yī)學(xué)也更為重視輸血治療之后患者的治療有效率及其安全性。因?yàn)閷?shí)行輸血治療后， 會(huì)一定程度損傷機(jī)體抗原細(xì)胞， 由此容易誘發(fā)溶血性不良反應(yīng)， 嚴(yán)重的甚至?xí)＜盎颊呱?。輸血不良反?yīng)依據(jù)臨床發(fā)病機(jī)制可以區(qū)分為非免疫性輸血反應(yīng)、免疫性輸血反應(yīng)， 免疫性輸血反應(yīng)主要是由于獻(xiàn)血者同受血者血型抗原-抗體不匹配導(dǎo)致， 不規(guī)則抗體的存在容易誘發(fā)遲發(fā)性反應(yīng)和急性反應(yīng)， 會(huì)對(duì)患者生命造成嚴(yán)重的不良影響[2， 3]。因此， 為有效減少輸血不良反應(yīng)的發(fā)生， 在輸血之前進(jìn)行輸血檢驗(yàn)尤為重要， 這也是開(kāi)展輸血治療的前提。

臨床醫(yī)學(xué)擁有多種多樣的輸血檢驗(yàn)技術(shù)， 包含鹽水法、酶法、抗球蛋白試驗(yàn)法、凝聚胺技術(shù)等， 都可以檢測(cè)不完全坑體， 相較于其他方法來(lái)說(shuō)， 凝聚胺技術(shù)具有突出的優(yōu)勢(shì)， 具體內(nèi)容如下：①凝聚胺技術(shù)具有極高的靈敏度， 同時(shí)具有操作簡(jiǎn)單、觀察方便的特點(diǎn)， 不僅能夠用于鑒別血型、交叉配血， 還可以在篩選抗體中使用， 對(duì)于檢驗(yàn)溶血性貧血具有突出的作用;②與鹽水介質(zhì)試驗(yàn)具有一致性的配血檢出速度、IgG抗體檢出速度， 同時(shí)能夠有效預(yù)防溶血性輸血反應(yīng)。在檢測(cè)不完全抗體的過(guò)程中， 凝聚胺技術(shù)的機(jī)理為：凝聚胺是細(xì)胞凝聚期間不可缺少的凝聚胺能夠讓紅細(xì)胞發(fā)生凝聚反應(yīng)然后再一次的散開(kāi)， 但是受到抗原抗體特異性因素的影響， 凝聚反應(yīng)則會(huì)出現(xiàn)不再散開(kāi)的情況[4-6]， 對(duì)此需引起高度重視。凝聚胺技術(shù)的使用可以充分檢出紅細(xì)胞細(xì)胞表面是否存在該特異性抗體， 對(duì)此， 酶法、抗球蛋白試驗(yàn)法存有操作過(guò)程繁雜， 步驟偏多的不足之處。相較于鹽水法， 凝聚胺技術(shù)具有更為突出的優(yōu)勢(shì)， 即操作更為方便、步驟也變得更加簡(jiǎn)易化， 但是鹽水法無(wú)法徹底發(fā)現(xiàn)所有的不完全抗體， 存在檢驗(yàn)效果的不足之處， 如果單一的使用該方法可能會(huì)引發(fā)輸血意外， 從而誘發(fā)嚴(yán)重的臨床風(fēng)險(xiǎn)， 危險(xiǎn)系數(shù)高， 對(duì)此， 聯(lián)合抗球蛋白試驗(yàn)法和鹽水法， 或者將酶法與鹽水法聯(lián)合則能夠有效規(guī)避上述情況[7]。

目前， 凝聚胺技術(shù)是一種全新的輸血檢驗(yàn)方式， 該方法能夠與紅細(xì)胞表面唾液酸發(fā)生中和作用， 從而形成具備可逆性特點(diǎn)的非特異性凝集， 能夠有效檢驗(yàn)出紅細(xì)胞中存在的不完全抗體， 其作用機(jī)制為：凝聚胺涵蓋正電荷， 由此能夠中和負(fù)電荷， 發(fā)生溶解后則能夠同細(xì)胞表明唾液酸結(jié)合， 由此減弱表面電位。凝聚胺在此期間能夠同紅細(xì)胞產(chǎn)生非特異性凝集， 然后與紅細(xì)胞懸液中和， 并朝向紅細(xì)胞表面失去的電荷進(jìn)行擴(kuò)散， 基于此查看是否存在對(duì)應(yīng)抗原[8-10]。就本文研究結(jié)果表明， 相比于鹽水法， 采用凝聚胺技術(shù)檢驗(yàn)具有更為顯著抗體陽(yáng)性對(duì)照凝聚輕度， 由此凝聚胺技術(shù)具備更為突出的靈敏度。與此同時(shí)， 該技術(shù)的凝聚細(xì)胞檢出更高， 由此體現(xiàn)了其極高了敏感度。而且， 相較于特異性凝集維持時(shí)間， 非特異性凝集現(xiàn)象維持時(shí)間顯著更長(zhǎng)， 懸液加入后也沒(méi)有改變凝聚狀態(tài)， 由此表明其具備良好的特異性。

通過(guò)本文研究表明：研究組對(duì)IgG抗體的檢測(cè)靈敏度高于參照組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。研究組非特異性凝集消失時(shí)間5～10 s有35份、11～20 s有33份， 21 s～3 min以及>3 min均為0;特異性凝集消失時(shí)間5～10 s有68份， 其他時(shí)間均為0;研究組非特異性凝集、特異性凝集消失時(shí)間分布情況比較， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。由此可見(jiàn)， 凝聚胺技術(shù)不僅具備良好的靈敏度， 比較兩者的非特異性凝集、特異性凝集的消失時(shí)間可知， 非特異性凝聚消失時(shí)間更多的是在5～10 s、11～20 s內(nèi)完成， 由此可見(jiàn)， 該技術(shù)能夠促使紅細(xì)胞于極短時(shí)間內(nèi)發(fā)生凝集反應(yīng)， 顯著提升了不規(guī)則抗體的檢出率。血樣中存在的不規(guī)則抗體大多數(shù)是IgG類， 多數(shù)由于妊娠、輸血、免疫刺激等導(dǎo)致， 采用鹽水法無(wú)法有效聚集， 而凝聚胺技術(shù)則能夠縮短凝集時(shí)間， 加快檢出速度。

總之， 凝聚胺技術(shù)具有更為突出的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)， 靈敏度更高， 值得在臨床推廣應(yīng)用。

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[收稿日期：2020-04-02]