鄺永輝 王志劍 歐丹萍 李雪華

【摘要】 目的 分析不同程度乙型病毒性肝炎（乙肝）患者透明質(zhì)酸（HA）、血清Ⅲ型前膠原（PCⅢ）、Ⅳ型膠原（CⅣ）、層粘連蛋白（LN）和乙肝病毒-脫氧核糖核酸（HBV-DNA）水平檢測差異， 探討其相關(guān)性。方法 99例乙肝患者， 根據(jù)疾病診斷及病情程度不同將所有患者分為輕度組、中度組、重度組， 每組33例。檢測并比較三組患者乙肝血清標志物情況以及HBV-DNA、HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平， 并分析乙肝患者HBV-DNA與HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平的相關(guān)性。結(jié)果 輕度組檢測乙肝血清標志物情況為乙肝表面抗原（HBsAg）（+）、乙肝表面抗體（HBsAb）（-）、乙肝e抗原（HBeAg）（+）、乙肝e抗體（HBeAb）（+）、乙肝核心抗體（HBcAb）（+）， HBV-DNA水平為（1.14±0.27）×103 copies/ml;中度組檢測乙肝血清標志物情況為HBsAg（+）、HBsAb（-）、HBeAg（-）、HBeAb（-）、HBcAb（+）， HBV-DNA水平為（1.71±0.30）×103 copies/ml;重度組檢測乙肝血清標志物情況為HBsAg（+）、HBsAb（+）、HBeAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）， HBV-DNA水平為（2.80±0.38）×103 copies/ml。重度組患者HBV-DNA水平高于中度組及輕度組， 且中度組患者HBV-DNA水平高于輕度組， 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。重度組患者HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平分別為（413.26±48.88）ng/ml、（198.17±16.18）μg/L、（189.15±20.67）μg/L、（225.04±23.79）μg/L，?均高于中度組的（318.93±60.05）ng/ml、（159.24±15.87）μg/L、（135.60±13.72）μg/L、（200.11±20.85）μg/L，?及輕度組的（205.16±56.92）ng/ml、（123.98±16.14）μg/L、（80.04±20.76）μg/L、（150.98±35.03）μg/L， 且中度組均高于輕度組， 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。相關(guān)性分析顯示， 乙肝患者HBV-DNA表達與HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平均呈明顯正相關(guān)性（r=0.517、0.433、0.451、0.478， P<0.05）。結(jié)論 乙肝患者HBV-DNA水平與HA、PCⅢ、CⅣ、LN均呈明顯正相關(guān)性， 其對于臨床評估乙肝纖維化進展情況具有重要意義。

【關(guān)鍵詞】 乙型病毒性肝炎;乙肝病毒-脫氧核糖核酸;透明質(zhì)酸;血清Ⅲ型前膠原;Ⅳ型膠原;層粘連蛋白

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.23.016

乙肝在我國屬于最為常見的慢性傳染性疾病之一， 患者因各種原因而導(dǎo)致肝臟被乙型肝炎病毒感染而引起急性或慢性炎癥;但由于早期缺乏特異性表現(xiàn)， 或癥狀被其他疾病所遮掩， 造成部分乙肝患者治療延誤并引起嚴重的肝臟損傷， 甚至出現(xiàn)肝硬化和肝癌， 威脅患者的生命安全[1， 2]。目前臨床對于乙肝患者的確診以及病情嚴重程度分級多是以組織病理活檢作為金標準， 但該檢查由于創(chuàng)傷較大， 導(dǎo)致患者排斥性較高， 因此實際應(yīng)用效果并不理想[3]。隨著醫(yī)療檢測設(shè)備和技術(shù)的不斷進步和發(fā)展， 肝臟疾病的血清學(xué)指標不斷被發(fā)現(xiàn)并獲得廣泛的驗證， 其中標志肝纖維化的血清學(xué)指標如HA、PCⅢ、CⅣ和LN最為常用[4]。本院為進一步了解肝纖維化指標和HBV-DNA水平在不同程度乙肝患者中的表達以及相關(guān)性， 特開展了此項專題研究， 現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2018年2月～2019年2月收治的99例乙肝患者作為研究對象， 納入標準：①入組患者均經(jīng)皮肝組織活檢組織病理學(xué)診斷明確;②年齡>25歲， 病程>6個月， 患者均知情本研究并簽署知情同意書。排除標準：合并嚴重器質(zhì)性或系統(tǒng)性疾病、惡性腫瘤、合并其他肝臟或可能影響本研究結(jié)果疾病者。根據(jù)疾病診斷及病情程度不同將所有患者分為輕度組、中度組、重度組， 每組33例。其中輕度組男20例、女13例， 平均年齡（36.12±3.65）歲;中度組男23例、女10例， 平均年齡（36.32±3.73）歲;重度組男19例、女14例， 平均年齡（35.89±3.87）歲。三組一般資料比較， 差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 分別于清晨空腹狀態(tài)下采集所有患者靜脈血3～4 ml， 采用酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA）及熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測法檢測所有患者的乙肝血清標志物及HBV-DNA水平。其中熒光定量PCR檢測設(shè)備為上海宏石醫(yī)療科技有限公司生產(chǎn)的SLAN全自動醫(yī)用PCR分析系統(tǒng)， 試劑盒由上海復(fù)星長征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司提供， 其定量測定范圍為103～107 copies/ml;ELISA法試劑由上海科華生物工程股份有限公司提供， 分別檢測HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb， 其結(jié)果按照Thermo Multiskan MK3酶標儀比色進行判斷。其中HBV-DNA檢測結(jié)果正常下限參考值為5.0×102 copies/ml。另采用放射免疫法對患者的HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平進行檢測。本研究所有檢測均由2名臨床工作具有5年以上經(jīng)驗的病理科醫(yī)生進行檢測和結(jié)果判讀。

1. 3 觀察指標 比較三組患者乙肝血清標志物情況以及HBV-DNA、HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平， 并分析乙肝患者HBV-DNA與HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平的相關(guān)性。

1. 4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以均數(shù)±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗;計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗;相關(guān)性檢驗采用Pearson相關(guān)分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 三組患者乙肝血清標志物及HBV-DNA水平比較 輕度組檢測乙肝血清標志物情況為HBsAg（+）、HBsAb（-）、HBeAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）， HBV-DNA水平為（1.14±0.27）×103 copies/ml;中度組檢測乙肝血清標志物情況為HBsAg（+）、HBsAb（-）、HBeAg（-）、HBeAb（-）、HBcAb（+）， HBV-DNA水平為（1.71±0.30）×103 copies/ml;重度組檢測乙肝血清標志物情況為HBsAg（+）、HBsAb（+）、HBeAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）， HBV-DNA水平為（2.80±0.38）×103 copies/ml。重度組患者HBV-DNA水平高于中度組及輕度組， 且中度組患者HBV-DNA水平高于輕度組， 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2. 2 三組患者HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平比較 重度組患者HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平均高于中度組及輕度組， 且中度組患者的水平均高于輕度組， 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2. 3 乙肝患者HBV-DNA表達與HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析顯示， 乙肝患者HBV-DNA表達與HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平均呈明顯正相關(guān)性（r=0.517、0.433、0.451、0.478， P<0.05）。

3 討論

乙肝在臨床上由于其病情較為穩(wěn)定且病情較為漫長， 因此極易造成患者對疾病的忽視， 從而導(dǎo)致未接受相應(yīng)的對癥治療， 導(dǎo)致慢性乙肝患者的病情出現(xiàn)持續(xù)發(fā)展;若乙肝病毒長期處于復(fù)制活躍階段， 則會導(dǎo)致肝臟纖維化程度不斷加重[5]。國外學(xué)者Gordon等[6]在研究中指出乙肝患者最為突出的病理特點便在于肝臟內(nèi)的肝細胞因大量的以膠原蛋白為主的細胞外基質(zhì)沉積而引起纖維組織增生;有相關(guān)研究[7]提出針對乙肝患者應(yīng)當(dāng)進行早期診斷， 并根據(jù)病情的嚴重程度不同制定相應(yīng)的干預(yù)和治療方案， 從而有效的對肝纖維化進行阻斷， 提高患者的治療效果和預(yù)后恢復(fù)。因此， 如何選擇更加安全有效的非創(chuàng)傷性的檢查項目成為乙肝患者關(guān)注的重點。

本研究中選擇了對輕、中、重三種不同程度的乙肝患者進行分組并檢測了各組的HBV-DNA表達和HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平， 結(jié)果顯示隨著乙肝病情嚴重程度的不斷增加， 其HBV-DNA水平也同過往研究結(jié)果相一致， 呈現(xiàn)明顯的上升趨勢， 說明隨著乙肝病毒活躍程度的增加， 對患者肝臟的損傷程度也會愈發(fā)嚴重。進一步的研究發(fā)現(xiàn)， 除了HBV-DNA水平外， 輕、中、重三種不同程度的乙肝患者， 其HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平也隨著病情的嚴重程度而出現(xiàn)不同程度的增加趨勢;這在周萍等[8]的研究中也獲得了進一步的證實。而本研究最終結(jié)果也顯示， 乙肝患者HBV-DNA水平與HA、PCⅢ、CⅣ、LN均呈明顯正相關(guān)性（P<0.05）， 其r值分別為0.517、0.433、0.451、0.478。其中， HA水平在正常人體中含量極低， 這是因為正常人體中存在HA清除劑的緣故;但一旦肝臟被乙肝病毒侵襲后， 導(dǎo)致HA的清除率下降而引起指標的升高， Hsu等[9]在研究中提出HA水平越高則意味著患者的肝炎程度越重。PCⅢ水平的升高在臨床上往往標志著肝臟合成Ⅲ型肽原的活躍程度提高， 而后者水平的升高則說明肝臟發(fā)生炎癥、壞死以及肝纖維化的風(fēng)險更高[10]。CⅣ是構(gòu)成基底膜的重要成分， 因此當(dāng)肝臟出現(xiàn)纖維化后， 其基底膜的膠原會因此出現(xiàn)變化， 并導(dǎo)致其血清學(xué)指標呈現(xiàn)上升趨勢[11]。Heidrich等[12]在研究中指出LN也是基底膜的重要組成成分之一， 并將其視為臨床標志肝纖維化的重要血清學(xué)指標， 其水平的升高與CⅣ保持相同的趨勢。因此， 上述血清學(xué)指標和HBV-DNA水平的測定不僅有助于乙肝患者病情程度的判斷， 而且也對患者纖維化水平的變化趨勢提供重要的參考依據(jù)。

綜上所述， 乙肝患者HBV-DNA水平與HA、PCⅢ、CⅣ、LN均呈明顯正相關(guān)性， 其對于臨床評估乙肝纖維化進展情況具有重要意義。

參考文獻

[1] 繆寧， 王富珍， 張麗杰， 等. 中國2013-2015年乙型肝炎監(jiān)測試點實施效果評價. 中華流行病學(xué)雜志， 2017， 38（12）：1645-1648.

[2] 周正偉， 彭昭宣， 朱曉寧， 等. 川南地區(qū)慢性乙肝患者纖維化臨床特征分析. 西南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報， 2017， 40（6）：587-590.

[3] 林召， 黨小軍， 侯智輝， 等. 血清FFA、GP73水平變化與慢性乙型肝炎患者病情程度的關(guān)聯(lián)性及臨床意義探討. 泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報， 2018， 39（8）：921-923.

[4] 李勁， 駱仲榆， 陳劉鎮(zhèn)， 等. 慢性乙型肝炎病毒感染患者血清IL-33、sST2、MCP-1水平變化及其臨床意義. 中國醫(yī)藥導(dǎo)報， 2019， 16（17）：125-128.

[5] 劉濤， 崔曉玲. FS聯(lián)合APRI、HA診斷乙型肝炎肝纖維化的臨床價值分析. 實驗與檢驗醫(yī)學(xué)， 2019， 37（3）：407-409， 418.

[6] Gordon SC， Lamerato LE， Rupp LB， et al. Antiviral Therapy for Chronic Hepatitis B Virus Infection and Development of Hepatocellular Carcinoma in a US Population. Clinical Gastroenterology and Hepatology， 2014， 12（5）：885-893.

[7] 董福昌， 龍健靈， 林麗卿， 等. 血清肝纖維化指標聯(lián)合肝生化檢測對乙肝患者肝纖維化的評估. 沈陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報， 2018， 20（3）：224-226.

[8] 周萍， 王聰， 王曉琴， 等. 乙肝患者血清標志物與肝纖維化血清學(xué)指標的相關(guān)性分析. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展， 2017， 17（7）：1350-1352， 1293.

[9] Hsu C， Tsou HH， Lin SJ， et al. Chemotherapy-induced hepatitis Breactivation in lymphoma patients with resolved HBV infection： A prospective study. Hepatology， 2014， 59（6）：2092-2100.

[10] Gane EJ， Deray G， Liaw YF， et al. Telbivudine improves renal function in patients with chronic hepatitis B. Gastroenterology， 2014， 146（1）：138-146.

[11] Watashi K， Sluder A， Daito T， et al. Cyclosporin A and its analogs in hibit hepatitis B virus entry into cultured hepatocytes throμgh targeting a membrane transporter， sodium taurocholate cotransporting polypeptide （NTCP）. Hepatology， 2014， 59（5）：1726-1737.

[12] Heidrich B， Yurdayd?n C， Kaba?am G， et al. Late HDV RNA relapse after peginterferon alpha-based therapy of chronic hepatitis delta. Hepatology， 2014， 60（1）：87-97.

[收稿日期：2020-03-30]