林麗，鄧倩，羅琳，康渝接，嚴(yán)唯瑋，何利，敖曉琳，劉書亮

(四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品學(xué)院，四川 雅安，625014)

人體腸道菌群是一個復(fù)雜的微生態(tài)系統(tǒng)，對宿主生理的許多方面都有影響，如疾病發(fā)展、藥物代謝和免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)等[1]。其中，乳酸菌因能產(chǎn)生乳酸并抑制腸道中有害微生物的生長，對宿主健康產(chǎn)生有益作用，被認(rèn)為是一類益生菌[2]。人體腸道菌群的組成受多種因素的影響，其中飲食是一種重要的環(huán)境因素。CARMODY 等[3]研究認(rèn)為飲食在形成宿主相關(guān)微生物群落個體差異中起主導(dǎo)作用。隨含益生元的飲食攝入，通過增加特定細(xì)菌的數(shù)量來顯著調(diào)節(jié)腸道菌群結(jié)構(gòu)[4]，可促進(jìn)宿主腸道健康。國內(nèi)外已有大量研究表明，低聚糖作為一種益生元，不易被腸道消化，能顯著增殖部分乳酸菌和雙歧桿菌[5-8]。菊粉、低聚果糖和低聚木糖、低聚異麥芽糖是4種重要的功能性低聚糖, 也是目前應(yīng)用較為廣泛的益生元。

近年來，國內(nèi)外有一些關(guān)于乳酸菌代謝功能性低聚糖的研究，如王苗等[9]發(fā)現(xiàn)其實驗中有4 株乳酸菌均能夠優(yōu)先利用魔芋甘露低聚糖中的聚合度≤3的組分進(jìn)行生長和發(fā)酵產(chǎn)酸。BANUELOS等[10]實驗表明，產(chǎn)氣乳酸桿菌CECT5714和發(fā)酵乳桿菌CECT5716能在低聚果糖培養(yǎng)基中生長。但這些研究多以探究特定的低聚糖對特定菌株的生長影響為主，缺乏菌株對不同種類低聚糖廣譜性利用的報道。有文獻(xiàn)指出在完全不可控的環(huán)境條件下，通過食品的自然發(fā)酵可以獲得豐富的益生菌資源[11]。因此，本文擬探究食品源乳酸菌對多種低聚糖的廣譜性利用情況，篩選出能高效代謝多種低聚糖的菌株，對其鑒定和益生特性研究，為益生菌劑和合生元產(chǎn)品的開發(fā)提供菌種資源和數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.1.1 材料與試劑

實驗菌株：四川臘肉源乳酸菌55株、四川泡菜源乳酸菌20株以及生牛乳源乳酸菌35株，藥敏實驗質(zhì)控菌株為大腸桿菌(E.coliATCC 25922)，由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)食品微生物實驗室提供。

主要試劑：低聚果糖(純度95%)，河南素荷生物科技有限公司；低聚木糖(純度99%)，浙江一諾生物科技有限公司；菊粉(純度95%)，英博生物科技有限公司；低聚異麥芽糖(純度99%)，河南萬邦實業(yè)有限公司；L-半胱氨酸鹽酸鹽(純度99%)，源葉生物有限公司；胃蛋白酶(BR)、胰蛋白酶(BR)，上海瑞永生物科技有限公司；三號膽鹽(BR)，上海化學(xué)試劑站分裝廠；HBIG11乳酸菌生化鑒定條、MRS合成培養(yǎng)基，青島海博生物技術(shù)有限公司；藥敏紙片，杭州微生物試劑有限公司；細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒(離心柱型)，天根生化科技(北京)有限公司。

Basal MRS培養(yǎng)基(500 mL)：蛋白胨5 g；酵母抽提物2.5 g，檸檬酸銨1 g，醋酸鈉2.5 g,MgSO450 mg；MnSO412.5 mg,K2HPO41 g,L-半胱氨酸鹽酸鹽0.25 g,吐溫-80 500 μL。

MRS固體培養(yǎng)基(1 L)：MRS合成培養(yǎng)基55 g,L-半胱氨酸鹽酸鹽0.5 g,瓊脂18 g,CaCO315 g。

MRS液體培養(yǎng)基(1 L)：MRS合成培養(yǎng)基55 g,L-半胱氨酸鹽酸鹽0.5 g。

1.1.2 主要儀器與設(shè)備

電熱恒溫水浴鍋(HWS24型)，上海一恒科技有限公司；pH計(PHSJ-3F型)，上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司；電泳儀(DYY-6D型)，北京市六一儀器廠；PCR儀(T100型)、凝膠成像儀(Gel Doc XR型)，Bio-Rad。

1.2 實驗方法

1.2.1 菌株的活化

實驗菌株采用體積分?jǐn)?shù)為50%的甘油于-20 ℃保存。實驗時平板活化后挑取單一菌落接種于MRS液體培養(yǎng)基，37 ℃靜置培養(yǎng) 24 h，連續(xù)轉(zhuǎn)接2次，將最后1次培養(yǎng)液采用4 ℃、8 000 r/min離心10 min，得菌體沉淀，然后用無菌生理鹽水洗滌菌體沉淀2次，再用相同體積的無菌生理鹽水重懸得到乳酸菌細(xì)胞懸液，備用。

1.2.2 代謝低聚糖乳酸菌菌株的篩選

1.2.2.1 代謝低聚糖乳酸菌菌株的初篩

配制Basal MRS培養(yǎng)基，并加入溴甲酚紫(終質(zhì)量濃度0.03 g/L)，實驗組分別加入10 g/L的低聚木糖、低聚異麥芽糖、低聚果糖和菊粉，陽性對照組加入10 g/L葡萄糖，陰性對照組在培養(yǎng)基中加入體積分?jǐn)?shù)為1%的水，滅菌待用。將上述活化的菌株按體積分?jǐn)?shù)為2%的接種量接種于上述3組培養(yǎng)基中，于37 ℃ 培養(yǎng)觀察，顏色變黃者即為陽性。

1.2.2.2 代謝多種低聚糖乳酸菌菌株的復(fù)篩

配制Basal MRS培養(yǎng)基，分別加入10 g/L低聚木糖、低聚異麥芽糖、低聚果糖和菊粉，滅菌待用。將可代謝4種低聚糖的菌株活化后以體積分?jǐn)?shù)2%接種量接種于上述培養(yǎng)基中，在37 ℃ 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后，取1 mL發(fā)酵液采用平板法計數(shù)。選取平板菌落數(shù)較高的菌株作為后續(xù)研究菌株。

1.2.3 代謝多種低聚糖乳酸菌菌株的鑒定

1.2.3.1 菌落形態(tài)與細(xì)胞形態(tài)觀察

用接種環(huán)取1環(huán)菌懸液，劃線于MRS平板，37 ℃培養(yǎng)24 h后，觀察菌落特征。挑取單菌落，經(jīng)革蘭氏染色，在生物學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。

1.2.3.2 生理生化鑒定

采用乳酸菌生化鑒定條對實驗菌株進(jìn)行生理生化鑒定，包括七葉苷、纖維二糖、麥芽糖、甘露醇、水楊苷、山梨醇、蔗糖、棉子糖、蔗糖和乳糖的發(fā)酵實驗。

1.2.3.3 16S rDNA 序列測定

采用細(xì)菌基因組提取試劑盒對實驗菌株的基因組DNA進(jìn)行提取，以實驗菌株的基因組DNA為模板，利用通用引物7F：5′-CAGAGTTTGATCCTGGCT-3′和1540R：5′-AGGAGGTGATCCAGCCGCA-3′進(jìn)行PCR擴(kuò)增，將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物用瓊脂糖凝膠電泳驗證純度，割膠回收目的片段，送成都擎科梓熙生物有限公司完成序列測定，最后將測得的16S rDNA基因序列在NCBI上注冊并進(jìn)行Blast比對，并利用MAGE5.0軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。

1.2.4 代謝多種低聚糖乳酸菌的益生特性研究

1.2.4.1 單種低聚糖添加量對乳酸菌生長的影響

配制Basal MRS培養(yǎng)基，加入低聚糖并使質(zhì)量濃度分別達(dá)到0、10、30、50和70 g/L，將配制好的培養(yǎng)基滅菌待用。取活化后的菌株以體積分?jǐn)?shù)2%接種量接種于上述培養(yǎng)基中，37 ℃靜置培養(yǎng)24 h后測定發(fā)酵液OD600值，比較不同含量低聚糖以及不同種類低聚糖對乳酸菌生長的影響。

1.2.4.2 生長曲線的測定

根據(jù)1.2.4.1實驗結(jié)果，分別選取1種低聚糖作為實驗菌株的最佳低聚糖并確定濃度，在Basal MRS培養(yǎng)基中分別加入菌種的最佳低聚糖和葡萄糖，靜置培養(yǎng)，0～5 h時，每隔1 h取出發(fā)酵液，5～13 h時，每隔2 h取出發(fā)酵液測定，13～37 h時，每隔4 h取出發(fā)酵液測定OD600值，測定乳酸菌生長曲線。

1.2.4.3 pH耐受性試驗

將活化后的菌株以體積分?jǐn)?shù)2%接種量分別接種到pH 2.0、3.0、4.0和5.0的MRS液體培養(yǎng)基中，37 ℃水浴振蕩培養(yǎng)2 h，在0、2 h取樣，采用平板法計數(shù)，同時做平行試驗。

1.2.4.4 膽鹽耐受性試驗

將活化后的菌株以體積分?jǐn)?shù)2%接種量分別接種于質(zhì)量濃度為1、2和3 g/L膽鹽的MRS液體培養(yǎng)基中，37 ℃水浴振蕩培養(yǎng)2 h，分別在0、2 h時取樣，采用平板法計數(shù)，同時做平行試驗。

1.2.4.5 模擬胃腸道耐受性試驗

耐人工胃腸液試驗：分別取1.0 mL菌懸液與9.0 mL人工胃液和人工腸液混合后，放入37 ℃水浴鍋振蕩培養(yǎng)，分別在0、2 h取樣，采用平板計數(shù)法測定活菌數(shù)，同時做平行實驗。

人工胃液：取16.4 mL稀HCl (1 mol/L)，加約800 mL蒸餾水與10 g胃蛋白酶，充分混勻溶解，加水定容至1 000 mL，調(diào)pH至2.5，用0.22 μm無菌微孔濾膜過濾除菌。使用前37 ℃預(yù)熱。

人工腸液：將胰腺液和膽液以2∶1的體積比混合均勻，得到人工腸液。使用前37 ℃預(yù)熱。

胰腺液：1 g/L胰蛋白酶、11 g/L NaHCO3、2 g/L NaCl，將pH調(diào)8.0后，用0.22 μm無菌微孔膜過濾除菌。

膽液：9 g/L膽鹽，將pH調(diào)整到8.0后，用0.22 μm無菌微孔濾膜過濾除菌。

1.2.4.6 藥敏試驗

采用K-B法[12]對實驗菌株進(jìn)行藥敏性試驗。調(diào)整菌體濁度為0.5麥?zhǔn)蠁挝?，用無菌棉簽均勻涂布MRS固體培養(yǎng)基表面，用無菌鑷子取藥敏紙片貼于培養(yǎng)基表面。培養(yǎng)48 h后取出，用游標(biāo)卡尺測量抑菌圈直徑，藥敏實驗使用E.coliATCC 25922作為質(zhì)控菌株。藥敏紙片包括慶大霉素、紅霉素、四環(huán)素、氯霉素、鏈霉素、利福平和環(huán)丙沙星。同時做平行試驗。

1.3 數(shù)據(jù)分析

2 結(jié)果與分析

2.1 可代謝低聚糖乳酸菌菌株情況

測試的110株乳酸菌在初篩時對低聚木糖、低聚異麥芽糖、低聚果糖和菊粉的代謝情況見表1。由表1可知，僅有8株乳酸菌不能代謝實驗中的4種低聚糖。四川臘肉源55株乳酸菌中有38株、四川泡菜源20株乳酸菌中有17株、而生牛乳源35株乳酸菌中僅有8株可以代謝4種低聚糖，合計有63株乳酸菌對低聚木糖、低聚異麥芽糖、低聚果糖和菊粉均有代謝能力，為代謝低聚糖益生菌篩選提供了重要菌源。

表1 乳酸菌對不同低聚糖的代謝情況Table 1 Metabolism of different oligosaccharides by lactic acid bacteria

以可利用4種低聚糖的菌株進(jìn)行復(fù)篩試驗，選擇菌落計數(shù)結(jié)果最多的生牛乳源菌株SNR24、四川臘肉源菌株RP30和四川泡菜源菌株P(guān)C140 三株菌作為后續(xù)實驗菌株。這3株菌的復(fù)篩試驗結(jié)果見表2，其在以4種低聚糖為唯一碳源的培養(yǎng)基中良好生長，活菌數(shù)可達(dá)109CFU/mL左右。

表2 三株菌于不同低聚糖培養(yǎng)基中的生長情況 單位：lg(CFU·mL-1)Table 2 Growth of three strains in different oligosaccharide media

2.2 代謝多種低聚糖乳酸菌菌株的鑒定

將2.1小節(jié)中篩選得到的3株乳酸菌在MRS培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng)，菌落形態(tài)如圖1所示，3株菌的菌落形態(tài)呈近圓形，乳白色，表面濕潤，無褶皺，中間突起，邊緣整齊。經(jīng)革蘭氏染色后，其細(xì)胞形態(tài)為革蘭氏陽性、短桿狀、無芽孢，如圖2所示。

a-菌株SNR24; b-菌株RP30; c-菌株P(guān)C140圖1 三株乳酸菌的菌落形態(tài)圖Fig.1 Colony morphology of three lactic acid bacteria strains

a-菌株SNR24; b-菌株RP30; c-菌株P(guān)C140圖2 三株乳酸菌的細(xì)胞形態(tài)圖(1 000×)Fig.2 Cell morphology of three lactic acid bacteria strains

3株乳酸菌的生理生化鑒定結(jié)果見表3，可根據(jù)《伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊》[13]對菌株進(jìn)行鑒定，但最終鑒定結(jié)果還應(yīng)結(jié)合形態(tài)學(xué)分析、16S rDNA序列分析結(jié)果來確定。

表3 三株乳酸菌的生理生化特性Table 3 Physiological and biochemical characteristics of three lactic acid bacteria strains

將菌株SNR24、RP30和PC140的16S rDNA基因經(jīng)PCR擴(kuò)增及其產(chǎn)物電泳后回收測序，其測序結(jié)果提交 GenBank 數(shù)據(jù)庫注冊，登錄號分別為MN602938、MN602939和MN602940。通過在NCBI數(shù)據(jù)庫進(jìn)行Blast比對，菌株SNR24與Lactobacillusfermentum同源性為100%，菌株RP30、PC140與Lactobacillusplantarum同源性為100%?；?6S rDNA測序結(jié)果的系統(tǒng)發(fā)育樹如圖3所示。結(jié)合形態(tài)學(xué)、傳統(tǒng)生理生化和16S rDNA 基因序列分析可知，菌株SNR24被鑒定為發(fā)酵乳桿菌，菌株RP30、PC140被鑒定為植物乳桿菌。

圖3 三株乳酸菌基于16S rDNA繪制的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.3 Phylogenetic tree of three lactic acid bacteria strains based on 16S rDNA

2.3 代謝多種低聚糖乳酸菌的益生特性

2.3.1 低聚糖不同添加量對乳酸菌生長的影響

不同含量的各種低聚糖對菌株SNR24、RP30和PC140生長的影響如圖4所示。菌株SNR24、RP30和PC140在未添加低聚糖對照組的OD600值分別為0.036、0.034和0.025，而添加了低聚糖實驗組的OD600值>0.2，呈顯著性差異(P<0.05)，表明菌株SNR24、RP30和PC140均能代謝低聚木糖、低聚果糖、低聚異麥芽糖和菊粉。隨著部分低聚糖添加量的增加，發(fā)酵液OD600值并非一直遞增，說明低聚糖添加量與發(fā)酵液OD600并非呈現(xiàn)線性增長關(guān)系。試驗結(jié)果表明，菌株SNR24、RP30和PC140的最適宜低聚糖及添加量分別為50 g/L菊粉和30 g/L低聚異麥芽糖、50 g/L菊粉。

a-菌株SNR24; b-菌株RP30; c-菌株P(guān)C140圖4 低聚糖添加量對3株乳酸菌生長的影響Fig.4 Effect of oligosaccharide addition on the growth of three lactic acid bacteria strains

2.3.2 三株乳酸菌生長曲線

根據(jù)2.3.1結(jié)果，以50 g/L的菊粉作為唯一糖源的培養(yǎng)基分別培養(yǎng)菌株SNR24和PC140，以30 g/L的低聚異麥芽糖作為唯一糖源的培養(yǎng)基培養(yǎng)菌株RP30，并以相同質(zhì)量濃度的葡萄糖作為對照組，繪制生長曲線。如圖5所示，這3菌珠在低聚糖的Basal MRS中生長曲線與在葡萄糖的Basal MRS中生長曲線基本一致；3株乳酸菌在最初培養(yǎng)的3 h內(nèi)生長緩慢為生長延滯期，之后開始進(jìn)入對數(shù)生長期，菌株SNR24在培養(yǎng)11 h后開始進(jìn)入穩(wěn)定期，而菌株RP30和PC140在培養(yǎng)13 h后才進(jìn)入穩(wěn)定期。在相同的條件下培養(yǎng)達(dá)到穩(wěn)定期后，菌株RP30和PC140發(fā)酵液的OD600值顯著>菌株SNR24。

a-菌株SNR24; b-菌株RP30; c-菌株P(guān)C140圖5 三株乳酸菌生長曲線Fig.5 Growth curve of three lactic acid bacteria strains

2.3.3 三株菌的耐酸性

人體胃液pH通常在3.0左右, 空腹和食用酸性食品可達(dá)1.5, 食用堿性食物可達(dá)4.0～5.0, 且食物 (尤其是流體) 通過胃的時間相對較短, 一般1～2 h。乳酸菌作為益生菌必須具備相對較好的耐酸性[14]。以0 h時乳酸菌活菌數(shù)為對照，乳酸菌經(jīng)不同pH處理2 h后活菌數(shù)結(jié)果如圖6所示。由圖6可知，3株乳酸菌對pH分別為5.0、4.0和3.0的環(huán)境均有較好的耐受能力。但3株乳酸菌對pH 2.0環(huán)境的耐受能力較差，經(jīng)處理后，菌株SNR24、RP30和PC140的活菌對數(shù)值分別下降了2.30、2.93和3.40。

圖6 不同酸度環(huán)境對3株乳酸菌存活的影響Fig.6 Effect of different acidity environment on the survival of three lactic acid bacteria strains

2.3.4 三株菌的膽鹽耐受性

人體小腸的膽鹽質(zhì)量濃度一般在0.3～3 g/L，可以在細(xì)胞外產(chǎn)生高滲透壓，對菌體細(xì)胞造成影響[15]。以0 h時乳酸菌活菌數(shù)為對照，乳酸菌經(jīng)不同膽鹽含量處理2 h后活菌數(shù)結(jié)果如圖7所示。由圖7可知，3株乳酸菌對質(zhì)量濃度1和2 g/L膽鹽耐受能力較好，經(jīng)質(zhì)量濃度2 g/L膽鹽處理2 h后，菌株SNR24、RP30和PC140的活菌對數(shù)值分別下降了1.56、1.46和1.53。3株菌對質(zhì)量濃度3 g/L膽鹽的耐受能力較差，經(jīng)處理后，菌株SNR24、RP30和PC140的活菌對數(shù)值分別下降了4.19、3.66和4.05。

圖7 不同膽鹽含量對3株乳酸菌存活的影響Fig.7 Effect of different bile salt concentration on the survival of three lactic acid bacteria strains

2.3.5 三株菌的模擬胃腸道耐受性

由表4可知，經(jīng)人工胃液和人工腸液處理2 h后，3株乳酸菌的活菌數(shù)均有所下降，但下降的數(shù)量<一個數(shù)量級，說明這3株乳酸菌對人工模擬的胃腸道環(huán)境均有較好的耐受能力。其中菌株SNR24對人工胃液的耐受能力最強(qiáng)，存活率達(dá)71.23%，但對人工腸液的耐受能力最弱，存活率僅有16.15%。菌株RP30在經(jīng)過人工胃液和人工腸液處理后，其活菌率>50%。綜合來看，菌株RP30對人工模擬胃腸液的耐受性最強(qiáng)。

表4 三株乳酸菌經(jīng)人工胃腸液處理后活菌數(shù)及其存活率Table 4 The number and survival rate of three lactic acid bacteria strains treated with artificial gastrointestinal fluid

2.3.6 三株菌對常見抗生素的藥敏性

表5為抑菌圈直徑判斷標(biāo)準(zhǔn)[16]及乳酸菌藥敏試驗結(jié)果，質(zhì)控菌株ATCC 25922對抗生素產(chǎn)生的抑菌圈直徑均在質(zhì)控范圍內(nèi)，因此實驗測得的數(shù)據(jù)可信。由表5可知，3株乳酸菌對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素紅霉素、氯霉素類抗生素氯霉素和安沙霉素類抗生素利福平均敏感，而對氨基糖苷類抗生素鏈霉素、喹諾酮類抗生素環(huán)丙沙星均有耐藥性。對于氨基糖苷類抗生素慶大霉素，菌株SNR24中度敏感，而菌株RP30和PC140為耐藥。對于四環(huán)素類抗生素四環(huán)素，菌株SNR24敏感性，而菌株RP30和PC140為耐藥。

表5 抑菌圈直徑判斷標(biāo)準(zhǔn)及3株乳酸菌藥敏試驗結(jié)果Table 5 Criterion for inhibitory result and antibiotic resistance results for three lactic acid bacteria strains

3 結(jié)論與討論

本實驗測試了110株乳酸菌對低聚木糖、低聚異麥芽糖、低聚果糖和菊粉的代謝情況，其中四川臘肉源38株、四川泡菜源17株和生牛乳源8株乳酸菌都可以代謝4種低聚糖，發(fā)酵食品如臘肉和泡菜源乳酸菌利用低聚糖的能力強(qiáng)于生牛乳源，不同來源乳酸菌對低聚糖的代謝能力存在差異。劉思思[17]篩選得到11株對低聚果糖和低聚木糖均有代謝能力的乳酸菌，其中有8株為分離自發(fā)酵食品的植物乳桿菌；IGNATOVA等[18]從乳制品中分離到18 株對低聚果糖和低聚半乳糖均有代謝能力的保加利亞乳桿菌；而毛丙永[19]從人體糞便中僅篩選出2株對低聚果糖有代謝能力的乳酸菌，且不能同時代謝乳酮糖。綜上所述，相較于人體腸道來源乳酸菌而言，來源于發(fā)酵食品源中乳酸菌代謝低聚糖能力較強(qiáng)和具有廣譜性，為篩選代謝低聚糖乳酸菌提供了重要菌源。

乳酸菌對抗生素的抗性可能是固有的，也可能是獲得的。若乳酸菌的耐藥性基因是由質(zhì)粒編碼的，則其耐藥性基因可以在系統(tǒng)發(fā)育中遠(yuǎn)緣細(xì)菌間轉(zhuǎn)移，這致使乳酸菌作為益生菌使用存在著潛在的危險性[20]。通常研究認(rèn)為諸多乳桿菌(如干酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌等)以及雙歧桿菌均具有對萬古霉素有耐藥性，且被認(rèn)為是一種固有耐藥性[21]。JACOBSEN等[22]通過小鼠體內(nèi)實驗發(fā)現(xiàn)從發(fā)酵香腸中分離的L.plantarumDG 522和L.plantarumDG 507通過質(zhì)粒將抗性基因tet(M)、erm(B)轉(zhuǎn)移至E.faecalisJH2-2。因此，對于本實驗篩選獲得的菌株是否具有獲得性耐藥基因也可以通過全基因組序列分析做進(jìn)一步的安全評價。

近年來許多文獻(xiàn)表明，乳酸菌對低聚糖的代謝機(jī)制具有菌種特異性，并存在多種轉(zhuǎn)運機(jī)制，且其對不同聚合度低聚糖的代謝能力也并不相同[23]。ROSSI等[24]探究了55株雙歧桿菌對菊粉的利用情況，發(fā)現(xiàn)短果聚糖先消失后長果聚糖逐漸消耗，OSE等[25]在相關(guān)實驗中也觀察到類似現(xiàn)象。本實驗獲得的發(fā)酵乳桿菌和2株植物乳桿菌均能強(qiáng)烈代謝4種低聚糖，具有良好的益生特性，具有益生菌開發(fā)的潛質(zhì)，在后續(xù)工作中還應(yīng)加強(qiáng)其安全評價及低聚糖代謝機(jī)制的深入研究。