楊 威，王丹丹，賈琳琳

(佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，黑龍江 佳木斯 154007)

糖尿病并發(fā)抑郁癥(DD) 是繼發(fā)于糖尿病(DM)的高危害性疾病，自殺風(fēng)險(xiǎn)約為普通人的8倍, 我國(guó)DM合并DD的臨床發(fā)病率為30%～46.5%[1]。有研究表明細(xì)胞因子IL-6能使下丘腦分泌的腎上腺激素釋放激素(CRH) 活性增高，導(dǎo)致下丘腦-垂體-腎上腺素軸(HPA)過度激活產(chǎn)生抑郁癥狀，激活的HPA軸通過升高血清皮質(zhì)醇水平促進(jìn)脂肪降解、糖原異生、減少葡萄糖攝取、消弱胰島素的作用、造成或加重組織胰島素抵抗，使糖代謝紊亂難以控制[2,3]。由此可見，IL-6既參與糖尿病的發(fā)生發(fā)展，也與抑郁行為的產(chǎn)生密切相關(guān)。本課題通過探討DD大鼠抑郁行為與血清IL-6水平相關(guān)性及可能機(jī)制，以期為臨床DD的治療提供新的思路。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物分組及模型制備

清潔級(jí)Wistar大鼠48只(佳木斯大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)進(jìn)行適應(yīng)性喂養(yǎng)3d后隨機(jī)分為4組：正常對(duì)照組(Ctr)、抑郁癥模型組(CMS)、糖尿病模型組(DM)、糖尿病合并抑郁癥組(DM+CMS)。通過高脂高糖飲食40d后，按照30mg/kg一次性尾靜脈注射鏈脲佐菌素(STZ)，7d后尾靜脈取血測(cè)空腹血糖，以空腹血糖≥7.8mmol/L判定為糖尿病模型。繼續(xù)給予糖尿病模型動(dòng)物28d慢性應(yīng)激刺激建立糖尿病并發(fā)抑郁癥動(dòng)物模型：4℃冰水浴5min，45℃熱刺激5min，傾籠45℃24h，噪聲8h，晝夜顛倒24h，夾尾1min，每天采用一種刺激，同種刺激不連續(xù)出現(xiàn)[2,3]。

1.2 主要藥物、試劑和儀器STZ

北京索萊寶公司(批號(hào)1122F031)；ELISA試劑盒購(gòu)自武漢博士德生物有限公司；Open-field敞箱：美國(guó)產(chǎn)；血糖儀等。

1.3 行為學(xué)檢測(cè)

曠場(chǎng)試驗(yàn)在安靜、避光的環(huán)境進(jìn)行，將大鼠放置于行為測(cè)試箱內(nèi)，利用同步錄像裝置觀察和記錄其5min內(nèi)總移動(dòng)距離、移動(dòng)速度[4]。

1.4 血糖和血清胰島素檢測(cè)

血糖儀檢測(cè)實(shí)驗(yàn)期間大鼠靜脈全血血糖值；實(shí)驗(yàn)結(jié)束后內(nèi)眥靜脈取血離心，應(yīng)用葡糖糖氧化酶法測(cè)大鼠空腹血糖值；放射免疫法檢測(cè)大鼠空腹血清胰島素值。

1.5 ELISA檢測(cè)

各組大鼠血清IL-6水平檢測(cè)嚴(yán)格按照ELISA 試劑盒說明書進(jìn)行。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 曠場(chǎng)試驗(yàn)結(jié)果和血清IL-6水平的關(guān)系

結(jié)果表明，與正常對(duì)照組相比，其余三組大鼠5min內(nèi)總移動(dòng)距離、移動(dòng)速度均低于正常，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；DM+CMS組和CMS組5min內(nèi)總移動(dòng)距離、移動(dòng)速度雖低于DM組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。正常對(duì)照組大鼠血清IL-6 水平明顯低于其余三組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；血清IL-6水平隨著大鼠5min內(nèi)總移動(dòng)距離和移動(dòng)速度減少而增加，與對(duì)照組相比差異明顯，表明血清IL-6水平與抑郁程度有相關(guān)性，見表1。

表1 各組大鼠5min內(nèi)總移動(dòng)距離、移動(dòng)速度和血清 IL-6 水平

2.2 血糖和血清胰島素檢測(cè)

DM組和DM+CMS組大鼠血糖水平明顯高于正常對(duì)照組和CMS組，而血清胰島素水平明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表2。

表2 各組大鼠血糖、血清胰島素水平檢測(cè)

3 討論

糖尿病與抑郁癥可互為因果，糖尿病可大幾率誘發(fā)抑郁癥，而抑郁癥的發(fā)生可導(dǎo)致患者治療配合程度下降、血糖控制不佳從而降低糖尿病的治療效果。糖尿病合并抑郁癥發(fā)病機(jī)制不明，近年研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞因子作為體內(nèi)重要的調(diào)節(jié)因子參與了糖尿病及抑郁癥的發(fā)病進(jìn)程[5,6]。細(xì)胞因子是由淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞分泌的調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的信號(hào)分子，免疫激活產(chǎn)生的細(xì)胞因子可影響機(jī)體許多功能，包括神經(jīng)遞質(zhì)代謝、神經(jīng)內(nèi)分泌、神經(jīng)可塑性以及與行為改變有關(guān)的信息處理加工過程等。同時(shí)炎癥或免疫因素也是胰島素抵抗和胰島β細(xì)胞功能衰竭最終導(dǎo)致糖尿病的重要原因，大量的免疫炎癥介質(zhì)造成或加重組織胰島素抵抗和糖代謝紊亂[7,8]，因此臨床上有望通過檢測(cè)相關(guān)的炎性因子或其相應(yīng)受體的表達(dá)水平了解DD的發(fā)生及發(fā)展進(jìn)程。

IL-6作為一種多組織表達(dá)的多功能因子，不僅參與體內(nèi)的炎癥反應(yīng)，如促進(jìn)和活化T細(xì)胞、刺激B細(xì)胞分化和免疫球蛋白分泌等，還可調(diào)節(jié)體重、造血功能和新陳代謝[9,10]。如前所述IL-6等細(xì)胞因子水平增加可導(dǎo)致HPA軸功能紊亂，此外IL-6 還可通過促進(jìn)血管緊張素原的合成誘導(dǎo)多種炎癥因子的釋放，進(jìn)一步刺激中性粒細(xì)胞釋放IL-6，形成正反饋循環(huán)[11,12]。還有研究證實(shí) IL-6介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)是糖尿病足發(fā)生、發(fā)展的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[13,14]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，DD大鼠血清IL-6 水平高于正常對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并與抑郁癥指標(biāo)5min內(nèi)總移動(dòng)距離、移動(dòng)速度密切相關(guān)，糖尿病組和抑郁癥組大鼠血清IL-6水平也明顯高于正常對(duì)照組。因此我們推測(cè)IL-6參與了DD的發(fā)生進(jìn)程，在糖尿病患者中監(jiān)測(cè)IL-6 水平有助于判斷病情進(jìn)展和指導(dǎo)治療，對(duì)減少DD的發(fā)病率具有重要意義。