李 波，吳翠霞，胡傳翠

（1.海南省婦幼保健院婦科，海口 570100；2.安徽醫(yī)科大學附屬巢湖醫(yī)院婦產(chǎn)科，巢湖 238000）

宮頸癌是一種常見的女性疾病，是一種發(fā)病率極高的惡性腫瘤，全球女性的病死率逐年增加，嚴重影響了患者的生活質(zhì)量。對于該種疾病不易進行診斷，導致治療不及時，延誤治療的最佳時期，不利于患者的病情恢復。在臨床的診斷過程中，由于癌癥病癥的特殊性，容易在身體各處進行轉(zhuǎn)移，這樣會加大診斷結(jié)果的難度，使得醫(yī)生對患者的病情不能準確了解［1］。患者得不到有效的治療，導致患者的病情延誤。據(jù)相應的數(shù)據(jù)顯示，宮頸高危型HPV感染受到陰部固有的免疫細胞因子的因素的影響，并且與陰道局部的環(huán)境以及病毒的因素有關系。該文章就選取了2017年4月～2018年4月在我院治療的200例宮頸高危型HPV感染的患者作為研究組，選取HPV呈陰性并且宮頸情況正常的健康人作為對照組探究對陰道局部固有免疫細胞因子表達水平的及其同宮頸高危型HPV感染的相關性分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料隨機選取2017年4月～2018年4月在我院治療的200例宮頸高危型HPV感染的患者作為研究組，選取HPV呈陰性并且宮頸情況正常的健康人作為對照組。、患者平均年齡（38.9±6.1）歲，出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者為130例，未出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者為70例。研究組中處于宮頸癌Ⅰ期的170例，處于Ⅱ期的20例，處于Ⅲ期的10例。對照組的平均年齡（39.1±6.3）歲。

納入標準：所有的患者在進行手術(shù)后病情較為穩(wěn)定，還有意識，能夠配合醫(yī)生的治療。沒有其他的疾?。?］。排除標準：患有其他的疾病，例如腎功能不全、下肢深靜脈血栓、關節(jié)脫位、心肺的功能不全以骨折以及有精神方面的問題等等。沒有其他的疾病?；颊呔橥獗狙芯浚话阗Y料具有可比性（P>0.05）。

1.2 方法對對照組和研究組兩組被測者均要在非月經(jīng)期間進行取樣，使用無菌的窺器將宮頸陰道部暴露出來，使用無菌的棉簽進行同一方向的旋轉(zhuǎn)取樣后，若在棉簽上出現(xiàn)陰道分泌物，則證明取樣成功。將取樣的器皿放置與患者的陰道內(nèi)，按照同一個方向（順時針或者逆時針）進行取樣，使用一定量的生理鹽水將細胞洗脫，將細胞進行離心進而提取其細胞的DNA，將DNA進行PCR擴展后在使用專業(yè)的軟件進行相應的分析。在對宮頸分泌物、陰道分泌物以及脫落細胞的收集時，要注意防止取樣的器皿接觸到陰道壁，進而造成陰道上皮細胞的污染，加重病情。使用生理鹽水將細胞洗脫至EP管中，進而用于衣原體、滴蟲、霉菌、淋球菌以及乳酸桿菌的感染率的檢驗。采用革蘭氏染色的檢測方法檢驗霉菌、乳酸桿菌以及淋球菌，將樣本與適量清水進行攪拌置于載玻片上，滴加適量的染色劑，在油鏡下觀察細菌的形態(tài)、結(jié)構(gòu)；采用膠體金的檢驗方法檢驗衣原體，使用微生物檢驗的方法檢驗解脲支原體，使用懸滴濕片檢驗的方法檢驗滴蟲。使用鼠抗人單克隆抗體及免疫組化試劑盒（上海研生生化試劑有限公司）對CD4+和CD8+免疫細胞進行檢驗，嚴格按照說明書的操作進行檢驗。對對照組和研究組兩組進行血清炎癥因子的測定時，被檢測者要保持空腹狀態(tài)。在空腹狀態(tài)下抽取患者靜脈血3ml，將抽取的靜脈血置于EDTA抗凝試管中，置于離心機中進行離心，待10min中后，抽取上層的血清，使用相應的試劑盒（上海康朗生物科技有限公司制造）檢驗血清中TNF-α、IL-2、IFN-γ、IL-10和IL-4的含量，嚴格按照說明書的要求進行操作［3］。

1.3 觀察指標觀察對照組和研究組的不同宮頸癌患者的宮頸分泌物中CD4+和 CD8+免疫細胞的表達率，是否出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的CD4+和 CD8+免疫細胞的表達率，研究組和對照組兩組患者血清炎癥因子的對比，例如 ：TNF-α、IL-2、IFN-γ、IL-10和IL-4。研究組和對照組兩組患者的衣原體、滴蟲、霉菌、淋球菌以及乳酸桿菌的感染率。

1.4 統(tǒng)計學方法數(shù)據(jù)應用SPSS 18.0進行分析，其中計數(shù)進行χ2（%）檢驗，計量進行t檢測，P<0.05提示有顯著差異。

2 結(jié)果

2.1 不同宮頸癌患者的宮頸分泌物中CD4+和 CD8+免疫細胞的表達率比較CD8+免疫細胞的表達率在對照組和宮頸癌Ⅰ期、宮頸癌Ⅱ期以及宮頸癌Ⅲ期這幾組中無明顯差距（P>0.05），CD4+免疫細胞的表達率在對照組和宮頸癌Ⅰ期、宮頸癌Ⅱ期以及宮頸癌Ⅲ期這幾組中呈下降的趨勢（P<0.05），CD4+/CD8+的比值在這幾組中明顯呈下降趨勢（P<0.05），具體數(shù)據(jù)見表1。

表1 不同宮頸癌患者的宮頸分泌物中CD4+和 CD8+免疫細胞的表達率的對比（例）

2.2 是否出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的宮頸分泌物中CD4+和 CD8+免疫細胞的表達率比較CD8+免疫細胞的表達率在對照組、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及未出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移這幾組中無明顯差距（P>0.05），CD4+免疫細胞的表達率在對照組、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及未出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移這幾組中呈下降的趨勢（P<0.05），CD4+/CD8+的比值在這幾組中明顯呈下降趨勢（P<0.05），具體數(shù)據(jù)見表2。

表2 是否出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的宮頸分泌物中CD4+和 CD8+免疫細胞的表達率的對比（例）

2.3 研究組和對照組兩組患者血清炎癥因子比較TNF-α和IL-10的含量在對照組和宮頸癌Ⅰ期、宮頸癌Ⅱ期以及宮頸癌Ⅲ期這幾組中無明顯差距（P>0.05），IFN-γ和IL-2的含量在對照組和宮頸癌Ⅰ期、宮頸癌Ⅱ期以及宮頸癌Ⅲ期這幾組中呈下降的趨勢（P<0.05），IL-4的含量在這幾組中明顯呈上升趨勢（P<0.05），具體數(shù)據(jù)見表3。

表3 研究組和對照組兩組患者血清炎癥因子比較（例）

2.4 是否出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清炎癥因子比較TNF-α和IL-10的含量在對照組、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及未出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移這幾組中無明顯差距（P>0.05），IFN-γ和IL-2的含量在對照組、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及未出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移這幾組中呈下降的趨勢（P<0.05），IL-4的含量在這幾組中明顯呈下降趨勢（P<0.05），具體數(shù)據(jù)見表4。

表4 是否出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清炎癥因子的對比（例）

2.5 不同宮頸癌患者的陰道菌群的檢出情況比較隨著病情的加重，患者的衣原體、滴蟲、霉菌、淋球菌以及乳酸桿菌的感染率不斷的增加（P<0.05），其中，對照組的感染率最低，宮頸癌Ⅲ期的感染率最高，具體數(shù)據(jù)見表5。

表5 不同宮頸癌患者的陰道菌群的檢出情況對比（例，%）

2.6 是否出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的陰道菌群的檢出情況比較隨著病情的加重，患者的衣原體、滴蟲、霉菌、淋球菌以及乳酸桿菌的感染率不斷的增加（P<0.05），其中，對照組的感染率最低，出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者的感染率最高，具體數(shù)據(jù)見表6。

表6 是否出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的陰道菌群的檢出情況對比（例，%）

3 討論

宮頸癌是一種嚴重危害女性健康的惡性腫瘤，其死亡率僅次于乳腺癌，我國每年死于宮頸癌的女性正在逐漸增多，嚴重影響了人們的生活質(zhì)量。近年來，宮頸癌患者逐漸趨于年輕化，越早發(fā)現(xiàn)，宮頸癌被治愈的可能性就越大。一些國家通過該種方式已經(jīng)獲得了巨大的成效，因此，通過提前診斷和盡早干預，可以極大的減少宮頸癌的病死率［4-6］。患者在感染HPV后，患者體內(nèi)的免疫防御系統(tǒng)遭到破壞，身體內(nèi)免疫系統(tǒng)的體液免疫和細胞免疫也相應的受到一定的影響。HPV是一種能夠誘發(fā)人體多種疾病的非溶性病毒，HPV的基因能夠幫助相應的病毒避開免疫系統(tǒng)的監(jiān)視，使得病毒進入身體內(nèi)部，進而造成炎癥或是癌癥的發(fā)生，嚴重影響了患者的生活質(zhì)量。目前據(jù)數(shù)據(jù)統(tǒng)計，醫(yī)學研究人員已經(jīng)發(fā)現(xiàn)200多種 HPV-DNA 亞型，其中40多種是造成生殖道感染的亞型。經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌癥的發(fā)生與HPV 感染息息相關，但是感染HPV的女性患者不一定會發(fā)展成宮頸癌癥，持續(xù)被HPV感染的女性患者發(fā)展為宮頸癌癥的概率相對較大，主要是因為當多種HPV 亞型進入人們身體中，會被免疫系統(tǒng)清除大多數(shù)的HPV亞型，但是仍然存在少數(shù)HPV亞型在身體內(nèi)，在人體免疫系統(tǒng)功能下降時，少數(shù)存留在人體內(nèi)的HPV 亞型會使人體發(fā)生感染，進而發(fā)展為癌癥。

在本次實驗中，我們隨機選取了2017年4月～2018年4月在我院治療的200例宮頸高危型HPV感染的患者作為研究組，選取HPV呈陰性并且宮頸情況正常的健康人作為對照組探究對陰道局部固有免疫細胞因子表達水平的及其同宮頸高危型HPV感染的相關性分析。研究數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)隨著病情的加重，患者的衣原體、滴蟲、霉菌、淋球菌以及乳酸桿菌的感染率不斷的增加，其中，對照組的感染率最低，宮頸癌Ⅲ期的感染率最高，隨著病情的加重，患者的衣原體、滴蟲、霉菌、淋球菌以及乳酸桿菌的感染率不斷的增加，其中，對照組的感染率最低，出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者的感染率最高。女性的陰道微環(huán)境會受到妊娠、月經(jīng)周期以及年齡等因素的影響進而使得女性身體內(nèi)的陰道環(huán)境處于一種動態(tài)平衡的狀態(tài)，這樣有利于女性的生命健康。在健康女性的陰道內(nèi)會存在革蘭陽性需氧菌、支原體、假絲酵母菌、革蘭陰性需氧菌以及專性厭氧菌等菌種來達到女性陰道環(huán)境的平衡，研究發(fā)現(xiàn)，乳酸桿菌可以抑制病原微生物在引導內(nèi)的生長和增值，進而維持女性正常的陰道環(huán)境，有利于女性身體健康。據(jù)相關資料發(fā)現(xiàn)，解脲支原體能夠促進HPV感染的女性患者進一步發(fā)生宮頸癌病變［7］。同時，支原體的存在，能夠使得宮頸周圍環(huán)境的pH 升高，進而導致陰道周圍的免疫保護屏障遭到破壞，從而使得免疫系統(tǒng)功能減弱，進而使得HPV感染更為嚴重，進而加速宮頸癌癥的發(fā)展。

正常的免疫系統(tǒng)對于外來入侵的病原體都存在免疫監(jiān)視的作用，一旦免疫系統(tǒng)發(fā)生異常，就會導致病原微生物不能及時被清除，進而導致患者陰道內(nèi)部環(huán)境的平衡打破，加速宮頸癌癥的發(fā)展［8］。對于人體內(nèi)的免疫細胞分為兩種，分別為B淋巴細胞和T淋巴細胞，在人體腫瘤機體免疫反應中，主要是T淋巴細胞起主要的作用，對腫瘤細胞進行抑制并殺死。在本次研究中發(fā)現(xiàn)，CD8+免疫細胞的表達率在對照組和宮頸癌Ⅰ期、宮頸癌Ⅱ期以及宮頸癌Ⅲ期這幾組中無明顯差距，CD4+免疫細胞的表達率在對照組和宮頸癌Ⅰ期、宮頸癌Ⅱ期以及宮頸癌Ⅲ期這幾組中呈下降的趨勢，CD4+/CD8+的比值在這幾組中明顯呈下降趨勢，CD8+免疫細胞的表達率在對照組、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及未出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移這幾組中無明顯差距，CD4+免疫細胞的表達率在對照組、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及未出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移這幾組中呈下降的趨勢，CD4+/CD8+的比值在這幾組中明顯呈下降趨勢。HPV的持續(xù)感染會導致患者體內(nèi)的免疫系統(tǒng)受到損傷，進而免疫功能下降，導致CD4+和CD8+免疫細胞在體內(nèi)的表達率失衡，進而加速宮宮頸病變的發(fā)生［9］。

宮頸癌是一種常見的女性疾病，是一種發(fā)病率極高的惡性腫瘤，全球女性的病死率逐年增加，嚴重影響了患者的生活質(zhì)量。根據(jù)該實驗數(shù)據(jù)可知，TNF-α和IL-10的含量在對照組和宮頸癌Ⅰ期、宮頸癌Ⅱ期以及宮頸癌Ⅲ期這幾組中無明顯差距，IFN-γ和IL-2的含量在對照組和宮頸癌Ⅰ期、宮頸癌Ⅱ期以及宮頸癌Ⅲ期這幾組中呈下降的趨勢，IL-4的含量在這幾組中明顯呈上升趨勢，TNF-α和IL-10的含量在對照組、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及未出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移這幾組中無明顯差距，IFN-γ和IL-2的含量在對照組、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及未出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移這幾組中呈下降的趨勢，IL-4的含量在這幾組中明顯呈下降趨勢［10-15］。血清炎癥因子與HPV感染有著密切的聯(lián)系，IFN-γ的主要作用為抑制Th2 細胞的產(chǎn)生和活化，以及促進Th1 細胞增長發(fā)育和成熟，進而起到監(jiān)督身體內(nèi)內(nèi)環(huán)境的平衡，殺死病原微生物，進而起到防止宮頸病變［16-18］。血清中的TNF-α對正常的細胞沒有任何傷害而對腫瘤病變的細胞起到清除的作用，在人體內(nèi)起到免疫防御的作用，進而保持人體內(nèi)分泌的動態(tài)平衡。血清中的IL-2因子在機體免疫反應中起到重要的作用，在機體免疫中占主導地位，該因子在人體內(nèi)表達活性的高低將會影響患者宮頸的免疫功能以及發(fā)展趨勢，IL-2因子在人體內(nèi)的表達可以加強免疫細胞中吞噬細胞的的活性，進而減少體內(nèi)腫瘤細胞的數(shù)量，防止出現(xiàn)宮頸病變的發(fā)生［19］。血清中IL-4因子在人體中起到促進Th 細胞分化為Th2 細胞，進而起到減少殺傷細胞激活的數(shù)量，保護正常體細胞，進而保證患者的身體健康［20］。血清中的IL-10因子可以抑制免疫T細胞產(chǎn)生血清中的IL-2因子，進而組織粒細胞、肥大細胞和單核細胞這些細胞產(chǎn)生炎癥因子，進而阻止患者的宮頸病變的速度。血清中TNF-α、IL-2、IFN-γ、IL-10和IL-4因子的含量在一定程度上起到提示作用，減緩宮頸病變的發(fā)展進程。

隨著社會的不斷進步，工業(yè)發(fā)展越來越快，環(huán)境污染越來越嚴重，最后導致癌癥的發(fā)病率越來越高。該病癥在早期時癥狀不明顯，因此常規(guī)的檢測并不能及時診斷出。這也就導致了患者病情的延誤，錯過了最佳治療時間，導致婦女的死亡率增加。該種病癥后期會出現(xiàn)病情轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象，這就更加加大了臨床診斷的困難性。宮頸癌癥要盡早治療，治療時間越早，患者的身體恢復情況就越好。腫瘤細胞在患者體內(nèi)不斷地快速增長，體內(nèi)的血管中的血液運輸?shù)臓I養(yǎng)已經(jīng)不能維持腫瘤細胞的生長，因此，腫瘤細胞會誘導產(chǎn)生新的腫瘤血管，增加血管中血液運輸?shù)乃俾?，為腫瘤細胞提供更多的營養(yǎng)，促進其的生長與浸潤。在腫瘤細胞生長過程中，會有淋巴結(jié)的移動，淋巴結(jié)會在身體中移動，進而加快腫瘤細胞的快速轉(zhuǎn)移，以便獲取更多的營養(yǎng)物質(zhì)供自己生長。

可見，CD4+免疫細胞的表達率的增加可以延緩宮頸癌癥的發(fā)展，而良好的陰道局部環(huán)境也有利于減緩宮頸病變的發(fā)展進程，值得在臨床上進一步推廣和應用。