李娜 董建國 胡永帥
摘要:蒔蘿精油作為一種優(yōu)質(zhì)的天然健康食用材料,越來越受到人們的青睞,關于該物質(zhì)的研究也越來越多。對蒔蘿精油的功能特性進行了綜述,以期為蒔蘿精油在農(nóng)產(chǎn)品精深加工中的研究應用提供理論參考,并對植物精油的開發(fā)前景進行了展望。
關鍵詞:蒔蘿精油;功能特性;研究進展;抗癌;抗氧化;抗菌;降糖;降脂
中圖分類號:TS251.7? ? ? 文獻標志碼:A? ? doi:10.16693/j.cnki.1671-9646(X).2020.01.053
Abstract:Dill essential oil,as a kind of high quality natural and healthy edible material,has been gradually favored by people. There are more and more studies on this substance. The functional properties of dill essential oil were reviewed in this paper. The development prospects of plant-derived essential oils were prospected,which could provide theoretical reference for the application of dill essential oil in the intensive processing of agricultural products.
Key words:dill essential oil;functional property;research progress;anticancer;antioxidant;antibacterial;hypoglycemic;lipid-lowering
蒔蘿(Anethum graveolens L. (dill))是最早見于印度的一種傘形科芳香植物,自地中海沿岸、印度及埃及等地傳至歐洲,在唐代時經(jīng)絲綢之路傳入我國,現(xiàn)在我國東北、西北、華南均有分布。其主要食用部分為嫩莖葉及種子,富含葛縷酮(Carvone)、蒔蘿油腦(Dillapiole)、檸檬烯(Limonene)和γ -谷甾醇(γ-Sitosterol)等。在食品應用中,將莖葉切碎,用作色拉、海鮮及湯類的增香調(diào)料,種子為調(diào)味香辛料,特別用于中式香腸及泡菜的制作,同時在意大利調(diào)味料中應用較多。此外,蒔蘿還可被用來治療肝病、腸胃脹氣、食欲不振、咳嗽感冒、月經(jīng)痙攣、泌尿系統(tǒng)疾病等,對于園藝學者或親子園藝活動來說,其密集的傘形花序即美觀又能吸引有益昆蟲,是菜園里絕佳的伴生植物。20世紀50年代,國外將其揮發(fā)油開發(fā)為香辛料蒔蘿精油,用于多種食品添加劑,在歐洲、美洲、東南亞地區(qū)比較暢銷,又因其兼有抗痙攣、祛腸胃脹氣、利消化、消毒、促進泌乳、助產(chǎn)、鎮(zhèn)靜、利胃、促發(fā)、治療口臭等多種功效,在食品、藥品、保健品、化妝品、農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏等諸多領域被開發(fā)應用。目前,蒔蘿精油在國內(nèi)外的研發(fā)主要集中在提取工藝和功能特性2個方面。
1? ?抗癌活性
有研究表明,蒔蘿精油香氣成分都是單萜類化合物,單萜類物質(zhì)是一種天然興奮劑,可以激活谷胱甘肽- S -轉移酶(GST)的分泌,這種酶可以有效中和致癌物質(zhì),尤其是氰基和苯丙衍生物的自由基,從而起到抗癌效果。此外,其重要成分檸檬烯能作用于細胞生長有關的小分子G蛋白,可抑制異戊二烯化并增加潛在生長抑制劑TGFβ活性及生長量,故而對由化學因素引發(fā)的胃癌、肝肺癌、皮膚癌、乳腺癌、淋巴瘤等有明顯的預防和治療作用[1-2]。李夢賢[3]在研究中指出,蒔蘿精油中的檸檬烯可抑制誘導發(fā)生致癌源的Ⅱ期酶和異戊烯轉移酶的轉錄翻譯,從而對嚙齒動物的乳腺癌起到預防作用。陸占國等人[4]采用水蒸汽蒸餾法以2.1%得油率獲得蒔蘿精油,并將精油用于消除有毒致癌物質(zhì)NaNO2。結果表明,當精油用量為0.25 mL時,消除率最大為78.4%。由此可見蒔蘿精油不僅可以有效抑制癌細胞的生長,還可以在一定程度上消除食品工業(yè)中常見的有毒致癌物質(zhì)NaNO2的含量。
目前,有關蒔蘿精油抗癌活性的研究尚在探究階段,只是通過檢測其有效成分及其對致癌物質(zhì)的清除效果,推斷其具有增強抗癌效果,但相關報道并不多見,其抗癌療效、作用強度及后期應用成效有待進一步研究探索。
2? ?抗氧化活性
蒔蘿精油的抗氧化性活性早已受到研究學者的重視,并在保健養(yǎng)身、食品生產(chǎn)、烹調(diào)制作中被消費者普遍認可并積極接受。Mohammad Al等人[5]研究了洋甘菊花、茴香、蒔蘿籽3種物質(zhì)提取物的抗氧化活性,指出3種提取物在亞油酸和脂質(zhì)體模型體系中均表現(xiàn)出顯著的抗氧化活性,洋甘菊花和蒔蘿籽水提物的抗氧化活性高于正丁酸羥基茴香醚,而? 3種植物醇提物的抗氧化活性均低于水提物。此外,提取物還顯示出良好的自由基清除活性,提取物對自由基(如ABTS自由基、DPPH自由基)有一定清除能力,其中水提取物質(zhì)量濃度為0.06 mg/mL時對DPPH自由基清除率為90.5%,醇提取物質(zhì)量濃度為0.2 mg/mL時清除率為90.2%,結果表明洋甘菊花、茴香、蒔蘿籽提取物可作為含脂肪食品中的抗氧化劑。Satyanarayana S等人[6]研究了蒔蘿、茼香、孜然、香菜、芫荽5種植物水提取物的抗氧化性,結果表明以上天然植物水提取物具有很強的抗氧化活性,其清除自由基、抑制脂質(zhì)過氧化物及羥基自由基的性能優(yōu)于已知的抗壞血酸抗氧化劑,上述水果在印度的日常食用非常普遍,如果這些天然植物提取物作為食品添加劑被攝入,對人體可能是有益的。Amirdivani S等人[7]研究了薄荷、蒔蘿和羅勒對酸奶發(fā)酵特性、抗氧化能力及血管緊張素-1轉化酶(ACE)體外抑制作用的影響,研究指出草本酸奶比普通酸奶具有更快的pH值降解率,在發(fā)酵結束和整個貯藏期間,所有草本酸奶的抗氧化活性均高于普通酸奶(p<0.05),經(jīng)7 d貯藏后,草本酸奶中的鄰苯二甲醛肽增加了28%~36%,在相應的貯藏期,所有的草本酸奶均表現(xiàn)出比普通酸奶更高的抗ACE活性。結果表明,薄荷、蒔蘿和羅勒可以用來改良牛奶的微生物發(fā)酵,生產(chǎn)出具有更高抗氧化性和抗ACE活性的乳制品。董曉等人[8]從總抗氧化活性、超氧陰離子自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、羥自由基清除能力和抑制卵黃脂質(zhì)過氧化能力5個方面評價了蒔蘿葉精油的抗氧化活性,并將其與合成抗氧化劑沒食子酸丙酯(PG)進行比較,結果發(fā)現(xiàn)蒔蘿葉精油的總抗氧化活性、清除羥自由基和超氧陰離子自由基能力強于PG,但是其清除DPPH自由基和抑制脂質(zhì)過氧化的能力不及PG。
隨著植物提取工藝及生物檢測技術的進步,近幾年來植物精油成分分析及其抗氧化活性的研究日益興起。Vallverdú-Queralt A等人[9]對香菜、姜黃、蒔蘿、馬郁蘭、肉豆蔻等5種中草藥和香料的抗氧化活性和酚類成分進行了研究,利用液相色譜和LTQ軌道質(zhì)譜聯(lián)用技術鑒別了42種酚類化合物。發(fā)現(xiàn)了姜黃中還沒有報道過的2種成分即芹菜素- C -己糖苷- C -戊糖苷和芹菜素- C -己糖苷- C -己糖苷,在多酚圖譜中觀察到了定性和定量的差異,在香菜中發(fā)現(xiàn)了最高的酚含量,并對研究結果進行多元統(tǒng)計處理,檢測出了5種香料的獨特特征。El-Zaeddi H等人[10]研究了不同濃度的蘋果酸、草酸、乙酰水楊酸對香菜、蒔蘿和歐芹的生物活性和抗氧化能力的影響,用液相色譜-質(zhì)譜-夸脫法對多酚類化合物進行定量分析,結果表明3種物質(zhì)中的主要化合物有:①胡荽,二甲氧基肉桂己糖和槲皮素- 3 -? ? O -蕓香苷;②蒔蘿,新綠原酸和槲皮素葡萄糖醛酸;③歐芹,芹菜素- 7 -阿糖基葡萄糖苷和異鼠李素- 3 - O -己糖。用3種不同的處理方法測定了3種物質(zhì)提取物的抗氧化能力。結果表明,酸處理對香菜的抗氧化能力作用明顯,在蒔蘿中產(chǎn)生了中間產(chǎn)物,而在歐芹中未發(fā)現(xiàn)任何作用。此外,有關其他植物精油成分分析、抗氧化活性的研究也非常多見[11-14]。植物精油的抗氧化應用日益廣泛,目前大部分集中在食品制作和部分中草藥配制過程中,對其抗氧化機理及抗氧化活性強度的探究將成為未來面臨的趨勢。
3? ?抗菌活性
真菌可對人體進行直接侵染,給人類的生活帶來嚴重危害,真菌侵染食品、植物及藥材又容易間接傳染給人類,蒔蘿精油作為天然食品防腐劑具有很好的潛在開發(fā)價值。
田俊[15]以蒔蘿籽揮發(fā)油為研究對象,采用水蒸氣蒸餾法提取蒔蘿籽揮發(fā)油,用氣相色譜-質(zhì)譜法對揮發(fā)油成分進行分離和鑒定,以色譜峰面積歸一法計算了各成分的相對含量,同時對食品腐敗真菌活性進行研究,指出蒔蘿籽揮發(fā)油抗真菌作用機理:通過引起A. flavus線粒體ROS累積,進而激活Metacaspase誘導A. flavus細胞凋亡,并制備了一種蒔蘿籽揮發(fā)油固體升華劑。楊生強[16]采用微量稀釋法測定蒔蘿籽揮發(fā)油對棉花黃萎病菌的最低抑菌濃度,用帶毒平板法測定蒔蘿籽揮發(fā)油對棉花黃萎病菌菌絲的抑制作用,用碘化吡啶染色法測定蒔蘿籽揮發(fā)油對棉花黃萎病菌孢子細胞膜的損壞程度,并闡述了蒔蘿籽揮發(fā)油對棉花黃萎病菌孢子萌發(fā)和生物量的影響。結果表明,蒔蘿籽揮發(fā)油對棉花黃萎病菌最低抑菌濃度為0.625 μL/mL,揮發(fā)油對棉花黃萎病菌生物量、孢子萌發(fā)和菌絲抑制作用呈濃度依賴關系,蒔蘿籽揮發(fā)油能嚴重破壞棉花黃萎病菌孢子的細胞膜而達到抑菌作用。Jirovetz L等人[17]采用氣相色譜、氣相色譜-質(zhì)譜、嗅覺測定等方法,對保加利亞貯藏了35年的蒔蘿精油進行分析,提取了40多種揮發(fā)物,并用不同菌株對其抗菌活性進行了測定,研究表明令人愉悅的d -檸檬烯和高質(zhì)量的d -香芹酮對黑曲霉、釀酒酵母和白念珠菌的抑制作用顯著。Melnikova D N等人[18]從蒔蘿的地上部分分離到一種新的脂質(zhì)轉移蛋白,命名為Ag-LTP,并對其結構、抗菌和脂質(zhì)結合特性進行了研究,結果指出該蛋白由93個氨基酸殘基組成,其中8個半胱氨酸形成4個二硫鍵,其分子量為9 524.4.820 1,并指出該蛋白具有較弱的抗真菌活性和未公開的脂質(zhì)結合特異性,且能有效結合植物激素茉莉酸。Hamza L F等人[19]在研究中指出蒔蘿的不同提取物對多種微生物具有抗菌作用,其中精油和丙酮化合物對金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌、糞腸球菌、單核細胞李斯特菌、大腸桿菌、小腸結腸炎耶爾森菌、霍亂沙門氏菌、傷寒沙門氏菌、志賀氏菌、傷寒沙門氏菌、假單胞菌、地毯菌和分枝桿菌具有抗菌活性;蒔蘿籽對幽門螺桿菌具有中等活性。Dimov M等人[20]研究了蒔蘿精油的化學成分,指出蒔蘿籽油的主要成分是香芹酮(46.89%)和檸檬烯(28.93%),蒔蘿草精油的主要成分為香芹酮(27.81%)、檸檬烯(16.94%)、黃柏烯(15.87%)和對聚氧乙烯(14.18%),同時測定了2種精油的抗氧化和抗菌活性。Miclea V等人[21]以芫荽、茴香、蒔蘿、香芹、胡荽等5種種子為原料,經(jīng)蒸餾制得精油,測定了所得精油的化學成分,指出胡荽(73%),蒔蘿(52.7%),香菜(67.55%)中主要是香芹酮,茴芹(95.2%)和茴香(89.64%)中主要是反式茴香腦,對其抗氧化、抗菌和酪氨酸酶抑制活性研究結果表明,所有的精油都表現(xiàn)出相當大的抗菌活性,其中茴芹籽精油具有最高的抗氧化活性,胡荽精油最低;并證明茴芹精油是一種有效的酪氨酸酶抑制劑,胡荽精油對革蘭氏陰性細菌大腸桿菌和肺炎克雷伯氏菌具有很高的抗菌活性。
有關蒔蘿精油抗菌性研究,主要集中在直接提取蒔蘿籽油,通過與多種揮發(fā)油的比較,表明其抗菌功效,如今陸續(xù)有研究人員針對蒔蘿不同部位,地上特定部分、全株提取物展開了研發(fā),以及對其抗菌成分、作用機理、作用對象進行了深入探究,相信隨著蒔蘿的有效價值被不斷挖掘的同時,其具有針對性的抗菌特性將取得科學界的廣泛推廣。
4? ?降糖降脂活性
在現(xiàn)代醫(yī)學實踐發(fā)現(xiàn)之前,藥用植物是古代初級醫(yī)療保健系統(tǒng)治療的唯一來源。過去20年中,草藥及草藥產(chǎn)品的生物活性研究引起了全球研究人員的關注,與其他著名的草藥一樣,蒔蘿自古以來就被種植并用于醫(yī)藥和烹飪,可以追溯到希臘和埃及文明,至今在伊朗和我國民間蒔蘿仍被用來調(diào)節(jié)血液疾病。賀偉平等人[22]在研究中指出蒔蘿中的成分具有降膽固醇、降血糖作用,蒔蘿及其精油能有效預防動脈硬化。Goodarzi M T等人[23]在研究中提到蒔蘿精油已在亞洲傳統(tǒng)醫(yī)學中使用了幾個世紀,其成分對糖尿病和心血管疾病的控制和管理(包括降血脂和降血糖)具有有益作用,并介紹了蒔蘿精油對糖尿病和心血管疾病的治療作用,以支持其在糖尿病和心血管疾病管理中的安全使用,同時推測其作用機理可能是通過影響葡萄糖和脂質(zhì)途徑中某些基因的變化發(fā)揮作用。Bahrami E等人[24]設置非糖尿病和男性糖尿病患者為對照組,研究了蒔蘿提取物對人類血糖和血液參數(shù)的影響。結果表明,40,80 mg/kg的蒔蘿提取物可降低空腹血糖數(shù),并影響血細胞和血小板計數(shù)。Mohammed F A等人[25]對蒔蘿及其活性化合物進行了全面廣泛的研究,通過對蒔蘿成分作用于體內(nèi)和體外治療效果及隨機臨床試驗數(shù)據(jù)進行分析討論,進一步確認其抗癌、抗菌、降血脂和降血糖特性,指出其作為一種安全的補充替代藥物,有助于治療心血管疾病、糖尿病和癌癥。
由以上研究可知,目前關于蒔蘿降血糖血脂方面的研究,尚處在粗提取物作用于樣本,觀察分析療效階段,對于其有效化合物精確提取及深入研究其作用機理是有待探究的重點。
5? ?其他作用
?譒aric-Kundalic B等人[26]調(diào)查發(fā)現(xiàn),波黑共和國部分地區(qū)用蒔蘿茶治療痔瘡,用煎劑治療失眠癥,用酊劑治療胃部脹氣及肌肉痙攣。Kazemi M[27]在綜述中指出,印度蒔蘿可用來驅蟲、制作利尿劑,并著重強調(diào)了這種藥用植物的次生代謝產(chǎn)物。Hamza L F[19]在研究中指出,蒔蘿常被用來治療消化不良和腸胃脹氣,以及作為牛奶分泌興奮劑。Monsefi M等人[28]以54只正常發(fā)情的雌性大鼠為研究對象,研究了蒔蘿提取物對雌性大鼠生殖系統(tǒng)的影響,研究指出蒔蘿提取物可延長發(fā)情周期的持續(xù)時間、增強孕酮濃度,并推測蒔蘿精油可作為女性月經(jīng)周期的調(diào)節(jié)劑或抗生育劑。Babri R A等人[29]研究了蒔蘿精油的化學成分及其殺蟲活性,研究指出巴基斯坦蒔蘿精油針對美洲大蠊、家蠅和蓖麻蠶均有毒性,不同昆蟲的平均死亡率為25%~100%,同時提出蒔蘿精油有潛力作為一種天然殺蟲劑,用于防治各種昆蟲。
由此可見,蒔蘿精油在胃病、失眠、肌肉痙攣、痔瘡、利尿、調(diào)節(jié)雌性周期、催乳、抗生育、殺蟲等方面依然存在不可估量的應用價值,有待進一步深入研發(fā)。
6? ?結語
蒔蘿精油是良好的芳香型保健物質(zhì),不僅天然健康、給人以愉悅的享受,還可以凈化空氣、消毒、殺菌、治療疾病。既可作為醫(yī)藥原料,也可作為食品添加劑直接添加到食品中,其應用廣泛且備受歡迎。發(fā)展精油的精深加工,有助于提高植物資源的利用率、開發(fā)食品新產(chǎn)品和新配方,并可促進芳香療法的發(fā)展,同時,為取代人們普遍排斥的有害化學添加劑開辟了新思路。相信隨著生活水平和健康意識的不斷提高,蒔蘿精油必將在未來優(yōu)質(zhì)健康的食藥市場備受青睞,對其提取工藝及功能特性的進一步研發(fā)亦將成為未來食品加工與貯藏領域的熱點。
參考文獻:
Kaefer C M,Milner J A. The role of herbs and spices in cancer prevention[J]. The Journal of? nutritional biochemistry,2008,19(6):347-361.
Acimovic M G,Kostadinovic L M,Popovic S J,et al. Apiaceae seeds as functional food[J]. Journal of Agricultural Sciences,2015,60(3):237-246.
李夢賢. 蒔蘿不同極性提取物抗炎抗氧化作用的研究[D]. 天津:天津科技大學,2013.
陸占國,李偉,封丹. 蒔蘿籽精油成分及消除亞硝酸鈉研究[J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2010,22(3):479-482.
Mohammad Al,Ismail K,Aburjai T. Antioxidant activity of water and alcohol extracts of chamomile flowers,anise seeds and dill seeds[J]. Journal of the Science of Food and Agriculture,2004(2):173-178.
Satyanarayana S,Sushruta K,Sarma G S,et al. Antioxidant activity of the aqueous extracts of spicy food additives-evaluation and comparison with ascorbic acid in in vitro systems[J]. Journal of herbal pharmacotherapy,2004,4(2):1-10.
Amirdivani S,Baba A S. Changes in yogurt fermentation characteristics,and antioxidant potential and in vitro inhibition of angiotensin-1 converting enzyme upon the inclusion of peppermint,dill and basil[J]. LWT-Food Science and Technology,2011,44(6):1 458-1 464.
董曉,姜子濤,李榮. 蒔蘿葉精油抗氧化性質(zhì)的研究[J]. 食品科技,2012,37(12):235-239.
Vallverdú-Queralt A,Regueiro J,Alvarenga J F R,et al. Characterization of the phenolic and antioxidant profiles of selected culinary herbs and spices:Caraway,turmeric,dill,marjoram and nutmeg[J]. Food Science and Technology,2015,35(1):189-195.
El-Zaeddi H,Calín-Sánchez A,Nowicka P,et al. Preharvest treatments with malic,oxalic,and acetylsalicylic acids affect the phenolic composition and antioxidant capacity of coriander,dill and parsley[J]. Food Chemistry,2017(5):179-186.
Jianu C,Misca C,Stoin D,et al. Chemical composition and antioxidant properties of dill essential oll[J]. International Multidisciplinary Scientific Geo Conference:SGEM:Surveying Geology & Mining Ecology Management,2018(18):88-93.
Kawee-Ai A,Phumat P,Okonogi S,et al. Phenolic compounds and antioxidant activities of four edible species during seed germination[J]. Chiang Mai Journal of? Science,2018,45(2):905-916.
Kaur N,Chahal K K,Kumar A,et al. Antioxidant activity of Anethum graveolens L. essential oil constituents and their chemical analogues[J]. Journal of Food Biochemistry,2019,43(4):12 782-12 786.
Paven E C S J,Alexa E,Pintilie L S,et al. Anethum graveolens an important source of antioxidant compounds for food industry[J]. Preservation,2018(6):9-11.
田俊. 蒔蘿籽揮發(fā)油抗食品腐敗真菌活性、作用機理及天然防腐劑的開發(fā)研究[D]. 武漢:武漢大學,2012.
楊生強. 蒔蘿籽揮發(fā)油抗棉花黃萎病菌活性及其作用機理[J]. 棉花學報,2015,27(6):576-582.
Jirovetz L,Buchbauer G,Stoyanova A S,et al. Composition,quality control,and antimicrobial activity of the essential oil of long-time stored dill(Anethum graveolens L.)seeds from Bulgaria[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry,2003,51(13):3 854-3 857.
Melnikova D N,Mineev K S,F(xiàn)inkina E I,et al. Anovel lipid transfer protein from the dill Anethum graveolens L.:isolation,structure,heterologous expression,and functional characteristics[J]. Journal of Peptide Science,2016,22(1):59-66.
Hamza L F. Anethum graveolens:Physicochemical properties,medicinal uses,antimicrobial effects,antioxidant effect,anti-inflammatory and analgesic effects:A review[J]. World,2017(5):7-11.
Dimov M,Dobreva K,Damianova S,et al. Chemical composition,antioxidant and antimicrobial activities of dill essential oils(Anethum graveolens L.)[J]. Annual Assen Zlatarov University,2017(6):37-42.
Miclea V,Donca I,Culea M,et al. Comparative study on essential olls of? selected aplaceous seeds cultivated in? transylvania[J]. Studia Universitatis Babes-Bolyai,Chemia,2019,64(2):235-240.
賀偉平,黃寶康. 蒔蘿化學成分和藥理作用研究進展[J]. 現(xiàn)代藥物與臨床,2011,26(6):457-460.
Goodarzi M T,Khodadadi I,Tavilani H,et al. The role of Anethum graveolens L.(Dill)in the management of diabetes[J]. Journal of Tropical Medicine,2016(2):11-14.
Bahrami E,Khedri M R,Zangeneh M M,et al. Effect of Anethum graveolens aqueous extract on blood fasting glucose and hematological parameters in diabetic male BALB/c mice[J]. Onl. J. Vet. Res,2017,21(12):784-793.
Mohammed F A,Razvi S S,Abdul W M,et al. Protective Role of medicinal herb Anethum Graveolens(Dill)against various human diseases and metabolic disorders[M]// Plant and Human Health,Volume 3. Springer,Cham,2019(5):181-194.
?譒aric-Kundalic B,Dobes C,Klatte-Asselmeyer V,et al. Ethnobotanical study on medicinal use of wild and cultivated plants in middle,south and west Bosnia and Herzegovina[J]. Journal of Ethnopharmacology,2010(1):33-55.
Kazemi M. Phenolic profile,antioxidant capacity and anti-inflammatory activity of Anethum graveolens L. essential oil[J]. Natural Product Research,2015,29(6):551-553.
Monsefi M,Ghasemi M,Bahaoddini A. The effects of Anethum graveolens L. on female reproductive system[J]. Phytotherapy Research:An International Journal Devoted to Pharmacological and Toxicological Evaluation of Natural Product Derivatives,2006,20(10):865-868.
Babri R A,Khokhar I,Mahmood Z,et al. Chemical composition and insecticidal activity of the essential oil of Anethum graveolens L[J]. Seeds,2012(5):10-15. ◇