范 妮，羅雅艷，張 杰，歐玉芬，何紅波

（廣州醫(yī)科大學(xué)附屬腦科醫(yī)院，廣州市惠愛醫(yī)院，廣東 廣州 510370*通信作者：范 妮，E-mail：fanni2005@126.com）

抑郁癥是一種嚴(yán)重的、反復(fù)發(fā)作的慢性精神疾病，其發(fā)病機(jī)制仍不清楚［1］。研究顯示，炎癥細(xì)胞因子可能參與了抑郁癥的發(fā)病過程［2-3］。腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素6（IL-6）、白細(xì)胞介素18（IL-18）是常見的炎癥細(xì)胞因子，不僅在炎癥免疫反應(yīng)中具有關(guān)鍵作用，還可調(diào)節(jié)神經(jīng)元興奮性傳遞、介導(dǎo)神經(jīng)炎癥和神經(jīng)退行性過程、參與谷氨酸（Clu）、多巴胺（DA）和5-羥色胺（5-HT）等神經(jīng)遞質(zhì)代謝，這些都可能在抑郁癥的發(fā)展過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用［4］。因此，TNF-α、IL-6和IL-18成為抑郁癥的病因和病理生理學(xué)機(jī)制的研究熱點。多項研究表明，抑郁癥患者血清TNF-α、IL-6和IL-18水平較高［5-8］，抗抑郁藥治療可降低其水平［7，9-12］。然而，亦有研究表明，抗抑郁藥治療不改變甚至增加抑郁癥患者以上三種細(xì)胞因子水平［7-8，11］。本課題組前期研究顯示，住院抑郁癥患者血清TNF-α和IL-6水平較高，而血清IL-18水平較低［6］，本研究進(jìn)一步分析住院抑郁癥患者治療前后血清TNF-α、IL-6和IL-18水平的變化，并分析這一變化情況與患者臨床特征的相關(guān)性，探索細(xì)胞因子在抑郁癥發(fā)病機(jī)制及治療中的作用。

1 對象與方法

1.1 對象

選取2012年7月-2013年7月在廣州醫(yī)科大學(xué)附屬腦科醫(yī)院（廣州市精神病醫(yī)院）住院治療的抑郁癥患者為研究對象。入組標(biāo)準(zhǔn)：①符合《國際疾病分類（第10版）》（International Classification of Diseases，tenth edition，ICD-10）抑郁發(fā)作診斷標(biāo)準(zhǔn)；②年齡18～65歲；③由臨床醫(yī)生根據(jù)患者病情主導(dǎo)治療（不干預(yù)醫(yī)生治療方案）。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有癲癇、嚴(yán)重頭部外傷史、先天性心臟和肺疾病者；②有其他精神或心理相關(guān)疾病史；③現(xiàn)患自身免疫性疾病、過敏性疾病或感染性疾病；④有物質(zhì)濫用史；⑤研究期間出現(xiàn)不可控的危及生命的軀體疾病者。符合入組標(biāo)準(zhǔn)且不符合排除標(biāo)準(zhǔn)共48例。同期在廣州醫(yī)科大學(xué)附屬腦科醫(yī)院通過廣告招募健康人作為對照組。入組標(biāo)準(zhǔn)：①無精神或心理疾?。虎谧栽竻⑴c本研究；③年齡18～65歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有癲癇發(fā)作、嚴(yán)重頭部外傷、先天性心臟和肺疾病者；②有自身免疫性疾病、過敏性疾病或感染疾病；③有物質(zhì)濫用史；④研究期間出現(xiàn)不可控的危及生命的軀體疾病者。符合入組標(biāo)準(zhǔn)且不符合排除標(biāo)準(zhǔn)共64例。應(yīng)用PASS 11.0評估患者組和對照組樣本量大小的power值，兩組樣本量大小power值為0.8199。本研究通過廣州市精神病醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，所有研究對象均簽署知情同意書。

1.2 血清TNF-α、IL-6和IL-18水平檢測

研究對象入組后于清晨空腹采集手臂肘靜脈血4 mL，4 000 r/min離心15 min分離血清，分裝保存于-80℃。患者于出院前1天再次采集靜脈血。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（Enzyme-linked Immune Sorbent Assay，ELISA）試劑盒（eBioscience，San Diego，USA）檢測血清TNF-α、IL-6和IL-18水平［6］。TNF-α、IL-6和IL-18檢測靈敏度分別為0.13 pg/mL、0.3 pg/mL和9.0 pg/mL。實驗過程無交叉反應(yīng)現(xiàn)象。用酶標(biāo)儀（Bio-Rad iMark，California，USA）檢測OD450 nm處吸光值。具體操作步驟如下：400 μL洗液洗酶標(biāo)板2次，加入100 μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣品；加入50 μL生物素，室溫孵育2 h，洗液洗酶標(biāo)板6次；加入100 μL辣根過氧化物酶（Horseradish peroxidase，HRP）標(biāo)記鏈霉素，室溫孵育1 h，洗酶標(biāo)板6次；加入100 μL 3，3′，5，5′-四甲基聯(lián)苯胺（3，3′，5，5′-tetramethylbenzidine，TMB）顯色底物，室溫避光孵育10 min；加入100 μL終止液，使用酶標(biāo)儀檢測OD450 nm處標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的吸光值。

1.3 資料收集與臨床癥狀評估

收集健康對照組的年齡、性別等資料。收集患者的年齡、性別、受教育年限、既往住院次數(shù)、住院時長、病程、發(fā)病年齡、用藥劑量等資料。患者抗抑郁藥劑量換算成氟西汀等效劑量［13］。

采用漢密爾頓抑郁量表17項版（Hamilton Depression Scale-17 item，HAMD-17）評定抑郁癥患者抑郁癥狀［14］。輕度：7分＜HAMD-17總評分≤17分；中度：17分＜HAMD-17總評分≤24分；重度：24分＜HAMD-17總評分≤52分。患者在入院1周內(nèi)和出院前1周內(nèi)進(jìn)行HAMD-17評定。由2名具有5年以上臨床經(jīng)驗的精神科醫(yī)師進(jìn)行評定。對3例抑郁癥患者HAMD-17評定進(jìn)行一致性檢驗，組內(nèi)相關(guān)系數(shù)為0.90～0.96。

1.4 統(tǒng)計方法

采用SPSS 15.0進(jìn)行統(tǒng)計分析。兩組性別比較采用χ2檢驗，兩組年齡比較采用獨立樣本t檢驗?；颊咧委熐昂蟮腍AMD-17評分比較采用配對樣本t檢驗，患者組治療前后與對照組的炎癥細(xì)胞因子水平比較采用單因素方差分析，組間濃度比較采用Bonferroni檢驗。采用Pearson直線相關(guān)分析檢測患者炎癥細(xì)胞因子水平與一般資料和臨床資料的相關(guān)性，以及檢測炎癥細(xì)胞因子水平改變與癥狀改善程度的相關(guān)性。檢驗水準(zhǔn)α=0.05，均為雙側(cè)檢驗。

2 結(jié) 果

2.1 研究對象人口學(xué)資料和患者組臨床資料

患者組和對照組年齡和性別比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P均＞0.05）。48例抑郁癥患者中，有9例服用氟西汀，14例服用西酞普蘭，6例服用帕羅西汀，13例服用舍曲林，6例服用文法拉辛；有13例服用抗精神病藥物，5例服用情感穩(wěn)定劑，23例服用鎮(zhèn)靜催眠藥物。抑郁癥患者治療前后HAMD-17評分差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。見表1。

表1 兩組人口學(xué)資料及患者組臨床資料

2.2 兩組TNF-α、IL-6、IL-18水平比較

患者組治療前后與對照組TNF-α、IL-6、IL-18水平比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05）。

治療前，抑郁癥患者血清TNF-α和IL-6水平高于對照組（P=0.028、0.008），IL-18水平低于對照組（P=0.044）?；颊咧委熐昂笱錞NF-α、IL-6和IL-18水平比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P均＞0.05）。治療后，患者血清TNF-α和IL-6水平仍高于對照組（P=0.027、0.007），IL-18水平低于對照組（P=0.041）。見表2。

表2 患者組和對照組TNF-α、IL-6、IL-18水平比較（±s，pg/mL）

表2 患者組和對照組TNF-α、IL-6、IL-18水平比較（±s，pg/mL）

組 別患者組（n=48） 治療前治療后對照組（n=64）F P TNF-α 3.40±1.46 3.12±0.80 2.02±1.39 3.984 0.033 IL-6 2.54±0.69 2.11±0.46 0.49±0.30 4.248 0.028 IL-18 23.01±4.55 21.81±5.12 35.31±5.20 4.795 0.023

2.3 相關(guān)分析

抑郁癥患者治療前后TNF-α、IL-6和IL-18水平與既往住院次數(shù)、住院天數(shù)、病程、發(fā)病年齡、抗抑郁藥治療劑量、HAMD-17評分均無線性關(guān)系?；颊咧委熐昂骉NF-α、IL-6和IL-18水平變化值與HAMD-17評分變化值無顯著相關(guān)（r=-0.107、0.085、0.122，P均＞0.05）。

3 討 論

抑郁癥患者炎癥細(xì)胞因子水平異常變化已有報道，提示炎癥細(xì)胞因子誘發(fā)的免疫炎癥反應(yīng)在抑郁癥的發(fā)病機(jī)制中可能起關(guān)鍵作用［5］。本研究中，抑郁癥患者治療前后血清TNF-α和IL-6水平均高于健康對照組，與既往研究結(jié)果一致［5-8］。提示抑郁癥患者存在炎癥細(xì)胞因子介導(dǎo)的異常免疫反應(yīng)。已有研究表明，TNF-α和IL-6水平與抑郁癥狀嚴(yán)重程度呈正相關(guān)［6，10］，然而本研究未得出抑郁癥患者治療前后的TNF-α和IL-6水平與抑郁癥狀存在相關(guān)性的結(jié)果，可能與本研究納入的患者HAMD-17評分較高、病情較嚴(yán)重、病程較長有關(guān)。

與TNF-α和IL-6相比，較少研究報道IL-18在抑郁癥中的作用。研究表明，抑郁癥患者血清IL-18水平高于健康對照組［8］，與本課題組前期研究結(jié)果一致［6］。本研究中，抑郁癥患者血清IL-18水平低于健康對照組。結(jié)果的不一致性可能與研究對象的年齡、性別、吸煙習(xí)慣、飲酒狀況、病程、抑郁癥亞型等不同有關(guān)。

多項研究顯示，抗抑郁藥可降低抑郁癥患者TNF-α、IL-6和IL-18水平，且這些炎癥細(xì)胞因子水平的降低值與抑郁癥狀改善程度呈正相關(guān)［7，9-12］。但也有與此不一致的研究結(jié)果，如抗抑郁藥未改變［8，11，15-17］或增加［7，18-19］抑郁癥患者的這些細(xì)胞因子水平。本研究結(jié)果表明，接受抗抑郁藥物治療后，患者的抑郁癥狀得到改善，但治療前后的TNF-α、IL-6和IL-18水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義，說明抗抑郁藥對血清TNF-α、IL-6和IL-18水平可能并無影響。提示抑郁癥狀的改善與炎癥細(xì)胞因子水平變化可能不存在直接相關(guān)性?？挂钟羲幙赡芡ㄟ^阻礙炎癥細(xì)胞因子對腦部的作用而緩解抑郁癥狀，而不是直接降低炎癥細(xì)胞因子水平［16］。此外，如果增加的TNF-α、IL-6或降低的IL-18水平是由于免疫系統(tǒng)功能障礙或病原體相關(guān)分子過度刺激所致，抗抑郁藥物治療可能對TNF-α、IL-6和IL-18水平?jīng)]有影響，除非它們對產(chǎn)生細(xì)胞因子的免疫細(xì)胞有直接作用。盡管TNF-α、IL-6和IL-18與抑郁癥的病理機(jī)制相關(guān)，但抗抑郁藥物治療可以緩解抑郁癥狀而不伴隨外周循環(huán)細(xì)胞因子水平變化，提示抗抑郁藥的治療反應(yīng)可能獨立于炎癥性細(xì)胞因子水平的變化，炎癥細(xì)胞因子可能是抑郁癥的一個特征標(biāo)記物而非狀態(tài)標(biāo)志物。

綜上所述，本研究通過檢測抑郁癥患者治療前后的炎癥細(xì)胞因子水平，發(fā)現(xiàn)抑郁癥患者存在細(xì)胞因子水平異常，且抗抑郁治療后仍未恢復(fù)正常水平。本研究并未發(fā)現(xiàn)抑郁癥狀改善與細(xì)胞因子變化之間存在相關(guān)性。

本研究的局限性在于：①樣本量相對較小，將來的研究應(yīng)檢測更大的樣本量、進(jìn)一步分析血清TNF-α、IL-6和IL-18水平與抑郁癥的關(guān)系；②本研究納入的抑郁癥患者不是首發(fā)的未用藥患者，若納入首發(fā)或未經(jīng)藥物治療的患者，將更有利于闡明抗抑郁治療與血清TNF-α、IL-6和IL-18水平的關(guān)系；③本研究的抑郁癥患者接受了不同種類的抗抑郁藥物治療，且部分患者同時服用抗精神病藥、情感穩(wěn)定劑、鎮(zhèn)靜催眠藥，均可能對炎癥細(xì)胞因子水平產(chǎn)生影響；④未控制患者的飲酒狀況、吸煙、體質(zhì)量指數(shù)、受教育年限等混雜因素，將來研究應(yīng)控制相關(guān)混雜因素以進(jìn)行深入研究。