石冬梅，杜 娟，蔡文元，包俊華

25羥維生素D[25(OH)D]是皮膚中7-脫氧膽固醇在紫外線照射下經(jīng)肝腎2次羥化合成維生素D過程中的中間產(chǎn)物，其在血液中含量穩(wěn)定，是評價維生素D的常用指標(biāo)[1]。而維生素D除影響骨骼生長外，在女性生殖系統(tǒng)也有分布。許多研究發(fā)現(xiàn)[2-4]，其參與性激素的合成和分泌，影響顆粒細(xì)胞的功能，甚至影響子宮內(nèi)膜的容受性。但也有研究認(rèn)為[5]，維生素D對輔助助孕的影響有限。為評價維生素D在體外受精-胚胎移植(IVF-ET)過程中的影響情況，本研究選擇就診于銀川市婦幼保健院的68例備行IVF的患者，檢測25(OH)D水平，并分析其與IVF過程中相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇2019年10月-2020年4月就診于我院生殖中心的68例患者，因輸卵管因素、排卵障礙或男方因素等接受輔助助孕。排除生殖系統(tǒng)畸形、合并代謝性疾病、宮腔黏連等疾病，年齡26～38歲，平均(30.94±5.07)歲。

1.2 控制性促排卵方案：均采用卵泡期高孕激素狀態(tài)下促排卵方案(PPOS)，于月經(jīng)第2天給予患者口服安宮黃體酮(MPA,浙江仙琚制藥有限公司)10 mg/d,同時皮下注射果納芬(重組人促卵泡激素注射液，默克雪蘭諾制藥有限公司)150～300 IU/d。從月經(jīng)周期第6天開始監(jiān)測卵泡發(fā)育情況，并同時監(jiān)測黃體生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)水平。綜合分析卵泡發(fā)育及性激素水平調(diào)整果納芬用量，當(dāng)有3個卵泡直徑≥18 mm或有1個優(yōu)勢卵泡直徑≥20 mm,當(dāng)晚21時注射短效GnRH-a(曲普瑞林，法國益普生生物制藥公司)0.1 mg加r-HCG(艾澤，重組人絨毛膜促性腺激素，默克雪蘭諾制藥有限公司)250 μg，雙重誘發(fā)卵母細(xì)胞成熟。36 h后，經(jīng)陰道超聲引導(dǎo)下取卵，取卵后第3天行全胚胎冷凍。

1.3 內(nèi)分泌檢測：抽取外周靜脈血，檢測基礎(chǔ)FSH、LH、E2、T、AMH、25(OH)D，采用電化學(xué)法檢測，按試劑說明書操作(試劑和設(shè)備均購自Roche Diagnostics GmbH公司)。

1.4 觀察指標(biāo)：按25(OH)D正常與否分為研究組38例和對照組30例，比較2組間年齡、體重指數(shù)(BMI)、基礎(chǔ)FSH、LH、E2、T、AMH、Gn天數(shù)、Gn量、取卵數(shù)、MII卵數(shù)、受精數(shù)、優(yōu)胚數(shù)以及最大卵泡達(dá)14 mm前、14 mm到HCG日卵泡大小平均日增長的差異性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法：采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件，各因素間的相關(guān)性分析采用直線相關(guān)性分析，2組間比較采用t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 25(OH)D與各指標(biāo)間的相關(guān)性：分析25(OH)D與基礎(chǔ)E2和14 mm前卵泡日增長呈正相關(guān)性(P<0.05)，與年齡、BMI、基礎(chǔ)FSH、LH、T、AMH、Gn天數(shù)、Gn量、取卵數(shù)、MII卵數(shù)、受精數(shù)、優(yōu)胚數(shù)以及14 mm到HCG日卵泡日增長之間無顯著相關(guān)性(P>0.05)，見表1。

表1 25(OH)D與各指標(biāo)間的相關(guān)性分析(n=68)

2.2 研究組與對照組各指標(biāo)間的比較：對照組的E2和14 mm前卵泡日增長顯著高于研究組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；2組間年齡、BMI、基礎(chǔ)FSH、LH、T、AMH、Gn天數(shù)、Gn量、取卵數(shù)、MII卵數(shù)、受精數(shù)、優(yōu)胚數(shù)以及14 mm到HCG日卵泡日增長差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表2-表3。

表2 2組間基礎(chǔ)情況比較

表3 2組間控制性促排卵情況比較

3 討論

維生素D是人體生長發(fā)育過程中，特別是骨骼生長的必需物質(zhì)，同時對胰島素分泌、血脂代謝、心腦血管疾病、自身免疫性疾病等均有相關(guān)[6]。動物實驗證實[7]，維生素D可增加顆粒細(xì)胞鈣水平，使顆粒細(xì)胞表面FSH受體的敏感性和穩(wěn)定性增加。成靜等[8]報道，維生素D缺乏者早期流產(chǎn)率高，臨床妊娠率低；而陳雅等[9]研究認(rèn)為，維生素D水平與IVF治療結(jié)局沒有相關(guān)性。本研究檢測了25(OH)D水平，并分析其與IVF過程中相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)25(OH)D水平與年齡、BMI、基礎(chǔ)FSH、LH、T、AMH、Gn天數(shù)、Gn量、取卵數(shù)、MII卵數(shù)、受精數(shù)、優(yōu)胚數(shù)以及14 mm到HCG日卵泡日增長差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，與Firouzabdi等[10]報道一致。由于本研究采用的是PPOS方案，均未能行新鮮胚胎移植，故沒有觀察到臨床妊娠率，但PPOS方案本身是安全有效的促排方案[11-12]，其他觀察指標(biāo)同樣有統(tǒng)計學(xué)分析的意義和價值。

本研究發(fā)現(xiàn)，25(OH)D與基礎(chǔ)E2呈正相關(guān)關(guān)系，且對照組25(OH)D水平顯著高于研究組，證實25(OH)D與E2代謝有關(guān)，與既往研究[13]的25(OH)D可以上調(diào)CYP19基因的mRNA水平，增強芳香化酶活性，增加雌激素合成報道一致。本研究在統(tǒng)計分析過程中，特意將卵泡日均生長速度納入，試圖尋找25(OH)D對控制性促排卵的可能影響，發(fā)現(xiàn)25(OH)D與最大卵泡14 mm前卵泡日均增長呈正相關(guān)性，與14 mm到HCG日卵泡日均增長無顯著相關(guān)性，且對照組14 mm前卵泡日均增長顯著高于研究組，但14 mm到HCG日卵泡日均增長差異無統(tǒng)計學(xué)意義；進(jìn)一步證實25(OH)D僅參與性激素的代謝和卵泡早期的募集與優(yōu)勢比，對獲卵數(shù)、MII卵成熟數(shù)、受精率、優(yōu)胚率影響不大，與Malloy等[9,14]報道一致。

綜上所述，25(OH)D與E2代謝和卵泡早期募集與優(yōu)勢比有關(guān)，但不影響IVF過程中的獲卵數(shù)、MII卵成熟數(shù)、受精率和優(yōu)胚率。由于本研究僅針對PPOS方案的患者進(jìn)行了比較，所得結(jié)論存在一定的局限性，有關(guān)25(OH)D與IVF的作用機制有待進(jìn)一步深入研究證實。