陶璐

(平頂山市第一人民醫(yī)院 病理科，河南 平頂山 467000)

肺癌為常見肺原發(fā)性惡性腫瘤，發(fā)病率較高且逐年上升，吸煙、環(huán)境污染、職業(yè)粉塵、遺傳等均為其致病因素，患者多存在咳嗽、咳痰、胸悶等癥狀，隨著病情的進展可出現(xiàn)肝、腦等其他器官的轉(zhuǎn)移，腦轉(zhuǎn)移或因壓迫誘發(fā)腦疝，嚴重威脅患者生命安全[1-3]。早期診斷可避免患者錯過最佳治療時間，有利于臨床制定有效治療方案。不同類型肺癌治療方案不同，采用病理活檢明確肺癌分型準確度高，但部分患者不適合或不愿接受手術病理活檢，故尋找其他檢查方法明確肺癌分型，對保證臨床治療效果、改善患者預后也具有重要價值?；诖耍狙芯窟x取平頂山市第一人民醫(yī)院74例肺癌患者，探討液基薄層細胞學檢查(thinprep cytologic test，TCT)聯(lián)合免疫細胞化學法(immunocytochemistry，ICC)的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2017年9月至2019年3月平頂山市第一人民醫(yī)院收治的74例肺癌患者，其中男49例，女25例，年齡為25～76歲，平均(47.12±8.56)歲，病程為2～10 a，平均(7.56±1.03)a，體質(zhì)量指數(shù)為17～25 kg·m-2，平均(22.15±1.06)kg·m-2。本研究經(jīng)平頂山市第一人民醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審批通過。

1.2 納入及排除標準

1.2.1納入標準 (1)經(jīng)胸部CT、骨掃描檢查、組織病理學檢查確診為肺癌；(2)存在咳嗽、咳痰、痰中帶血等癥狀；(3)一般資料完整。

1.2.2排除標準 (1)合并其他惡性腫瘤者；(2)妊娠期或哺乳期女性；(3)伴有精神疾病、認知障礙、溝通障礙者。

1.3 檢測方法

1.3.1標本采集 利用B超定位，常規(guī)消毒鋪巾，行胸腔穿刺，抽取100 mL胸腔積液，靜置5 min，取沉淀液20 mL，混勻，儲存送檢。

1.3.2檢測抗體 所用抗體為p63、細胞角蛋白7(cytokeratin 7，CK7)、突觸素(synaptophysin，Syn)、CK5/6、甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1(thyroid transcription factor 1，TTF-1)、神經(jīng)細胞黏附分子1(neural cell adhesion molecule 1，NCAM-1)，均購自美國Dako公司。

1.3.3TCT檢查 將胸腔積液標本放入離心管，離心處理，棄上清液，置漩渦混合器上震蕩30 s，加入5 mL緩沖液，進行2次離心，棄上清液，置漩渦混合器上震蕩30 s，進行薄層細胞涂片，采用體積分數(shù)為95%的酒精固定10 min，巴氏染色，制片2張，置于-20 ℃的冰箱中存儲，用于ICC染色。

1.3.4ICC檢測 將標本從冰箱取出，使用蠟筆劃分出6個區(qū)域，放入丙酮中固定4 h，取出標本，于55 ℃烤箱中加熱20 min，采用體積分數(shù)為50%的乙醇固定2 min，用去離子水沖洗，微波抗原修復10 min，使用磷酸緩沖鹽溶液沖洗，每次2 min，共沖洗3次；5%～10%血清室溫封閉15 min，棄血清，用磷酸緩沖鹽溶液沖洗，每次2 min，共沖洗3次。加入抗體p63、CK7、Syn、CK5/6、TTF-1、NCAM-1，置于-4 ℃冰箱中12～24 h，用磷酸緩沖鹽溶液沖洗，每次2 min，共沖洗3次。采用二氨基聯(lián)苯胺顯色溶液顯色(5～10 min)，用蒸餾水終止化學反應，復染，封固，鏡檢。

1.4 觀察指標(1)診斷結果和診斷符合率；(2)p63、CK7、Syn、CK5/6、TTF-1、NCAM-1抗體在不同類型肺癌中的表達。(3)細胞學涂片表現(xiàn)。

1.5 統(tǒng)計學方法采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以率(%)表示，行χ2檢驗，P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 診斷結果和診斷符合率74例肺癌患者中，病理結果證實，鱗癌33例，腺癌29例，小細胞癌12例。采用TCT聯(lián)合ICC正確診斷出鱗癌31例，腺癌25例，小細胞癌11例。TCT聯(lián)合ICC診斷肺癌病理類型的診斷符合率為90.54%(67/74)。

2.2 6種抗體在不同類型肺癌中的表達在鱗癌、腺癌與小細胞癌中，各種抗體的陽性率相比，差異有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)。p63、CK5/6在鱗癌中陽性率較高，分別為93.94%、90.91%；CK7、TTF-1在腺癌中陽性率較高，均為96.55%；Syn、NCAM-1在小細胞癌中陽性率較高，均為83.33%。見表1。

表1 6種不同抗體在不同類型肺癌中的表達[n(%)]

2.3 細胞學涂片表現(xiàn)p63在鱗癌中表達為(4+)，CK7在腺癌中表達為(4+)，Syn在小細胞癌中表達為(4+)，CK5/6在小細胞癌中表達為(3+)，TTF-1在腺癌中表達為(4+)，NCAM-1在小細胞肺癌中表達為(3+)。

3 討論

相關統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，每年新增肺癌患者17%，每年因肺癌死亡患者占約25%[4-8]。早期診斷治療是改善患者預后的關鍵。不同類型肺癌臨床治療方案和治療重點不同，選用合適的診斷方法，提高診斷準確度，明確肺癌病理分型，是指導臨床選擇最佳治療方案的關鍵。通過手術切除標本病理雖可準確判斷病理分型，但部分患者不適合手術活檢，此種診斷方法臨床應用有一定局限性。

胸腔積液脫落細胞學檢測為早期診斷肺癌的重要方法之一，因具有無創(chuàng)、簡便、可重復操作等優(yōu)點在肺癌篩查和臨床診斷中得到廣泛應用，但傳統(tǒng)胸腔積液制片方法存在細胞涂片厚度不一、背景模糊等不足，易遮蓋腫瘤細胞，導致漏診。TCT可最大限度利用標本，并能通過離心將炎癥細胞、腫瘤細胞分離，涂片背景干凈、細胞分布較為均勻，能清晰呈現(xiàn)細胞結構及染色情況，可依照TCT結果初步篩選可疑標本，在TCT基礎上聯(lián)合ICC可通過抗體表達情況有效實現(xiàn)疾病鑒別和肺癌分型[9]。本研究以74例肺癌患者為研究對象，探討TCT聯(lián)合ICC的診斷價值，結果顯示，TCT聯(lián)合ICC診斷肺癌的診斷符合率為90.54%，可見該診斷方法診斷符合率較高。p63在機體中的表達具有廣泛性和選擇性，其在鱗癌中呈高表達；CK7多作為腺癌分化類型的客觀指標；CK5/6主要表達于鱗狀上皮基底細胞及導管上皮基底細胞，可用于鱗癌、腺癌的鑒別；TTF-1為終末呼吸單位細胞、腫瘤標志物，主要表達于小細胞肺癌和腺癌中；NCAM-1為小細胞肺癌、非小細胞肺癌鑒別標志物[10]。此外，鑒于病理分型是臨床實施針對性治療的基礎，不同類型肺癌各個抗體表達水平、陽性率存在差異，本研究進一步觀察6種抗體在不同類型肺癌中的表達，研究數(shù)據(jù)表明p63、CK5/6在鱗癌中陽性率較高，CK7、TTF-1在腺癌中陽性率較高，Syn、NCAM-1在小細胞癌中陽性率較高，進一步證實p63、CK7、Syn、CK5/6、TTF-1、NCAM-1抗體在不同類型肺癌中的表達存在差異，臨床可根據(jù)各種抗體在肺癌中的陽性率判斷患者腫瘤分型，以科學實施治療。

綜上所述，TCT聯(lián)合ICC對肺癌病理類型的診斷符合率較高，各種抗體在不同類型肺癌中陽性率不同，可為臨床診斷和分型提供信息支持。