趙艷秋，周子鈺，尹燕杰，張昊天

(1.哈爾濱市食品藥品檢驗檢測中心，哈爾濱 150025；2.哈爾濱醫(yī)科大學，哈爾濱 150001)

近紅外光譜是在可見光(Vis)和中紅外光(MIR)之間，光譜區(qū)間為 780 ～2 526 nm 的電磁輻射波.由于有機分子中如氧氫鍵、氮氫鍵、碳氫鍵一類的含氫基團的振動的合頻和各級倍頻的吸收區(qū)間與近紅外光譜區(qū)間一致，因此，在近紅外光譜區(qū)間下對樣品進行掃描，可以獲得樣品中有機分子的含氫基團的特征信息[1].近紅外光譜分析技術檢驗藥品，操作簡便快捷，結果準確、且使用成本低、環(huán)保無污染、同時還不消耗化學試劑、不損傷樣品，優(yōu)點繁多，并且在食品、藥品、石油和化工等行業(yè)被廣泛利用[2-4].如今，近紅外檢驗的數(shù)據(jù)庫還不夠完善，各地藥檢所都在努力完善數(shù)據(jù)庫，為大家?guī)砀蟮谋憬輀5-6].

硫酸氫氯吡格雷片是一種有效的血小板高聚集抑制劑，是治療和預防因血小板高聚集狀態(tài)引起的動脈粥樣硬化血栓形成事件的專用藥.臨床上應用于治療動脈粥狀硬化疾病、急性冠脈綜合癥、預防冠脈內支架植入術后支架內再狹窄和血栓性并發(fā)癥等.與其他抗血小板藥物相比，該藥具有療效強、副作用小等優(yōu)點，在臨床上有著獨特的優(yōu)勢[7-11].目前,已上市產品僅有法國賽諾菲生產的波立維、深圳信立泰藥業(yè)生產的泰嘉及樂普藥業(yè)生產的帥泰.進口藥品波立維曾經(jīng)在我省市場上出現(xiàn)過假藥，因此，本實驗將建立進口藥品波立維的近紅外一致性檢驗模型，以求能快速、方便、準確地鑒別出假藥劣藥.

1 儀器與試藥

1.1 儀器

MATRIX—F 型傅里葉變換近紅外光譜儀(德國 Bruker 公司)，OPUS 5.0 光譜分析軟件

1.2 試藥

硫酸氫氯吡格雷片(75mg)賽諾菲制藥有限公司(批號 7A658、7A583、7A453、7A626、7A665、7A540、7A543、7A406、7A622、7A710、7A644、7A719、7A523);硫酸氫氯吡格雷片(75 mg)樂普藥業(yè)股份有限公司(批號 A181210A2).

2 方法與結果

2.1 參數(shù)設定

波長掃描范圍為 4 000～12 000 cm-1，掃描次數(shù)為 32 次，分辨率為 8 cm-1，環(huán)境溫度 20～27 ℃，空氣濕度<70%.

2.2 光譜采集

取批號為 7A658、7A583、7A453、7A626、7A665、7A540、7A543、7A406硫酸氫氯吡格雷片8批，各取1片，放置在檢測窗上，探頭抵住藥片，按2.1項設定參數(shù)依法測得光譜.每一批次藥品測定六次，共得到 48張原始光譜，如圖1所示.

圖1 硫酸氫氯吡格雷片的原始光譜

2.3 光譜的預處理

使用 OPUS5.0 分析軟件自帶功能對原始光譜進行預處理.本實驗分別采用一階導數(shù)化+矢量歸一化法以及二階導數(shù)化+矢量歸一化法分別對光譜進行預處理，結果如圖2所示.

圖2 硫酸氫氯吡格雷片預處理后的光譜

2.4 一致性模型的建立

預處理的光譜分別選取譜段9 000～7 500 cm-1、6 900～5 600cm-1、5 000～4 250cm-1，平滑點為 l7，CI 限度值為 7[12-14]，分別建立模型I(一階導數(shù)化+矢量歸一化法)模型II(二階導數(shù)化+矢量歸一化法)，如圖3所示.

圖3 硫酸氫氯吡格雷片一致性檢驗

2.5 模型的驗證

2.5.1 同廠家驗證

取批號7A622、7A710、7A644、7A719、7A523的硫酸氫氯吡格雷片各1片，放置在檢測窗上，探頭抵住藥片，按2.1項設定參數(shù)依法測得光譜.經(jīng)2.3項預處理后分別代入模型I及模型II，結果如圖4所示，CI 限度值均小于 7，同廠家5批次產品均通過模型I及模型II驗證.

圖4 同廠家硫酸氫氯吡格雷片驗證結果

2.5.2 不同人員驗證

另取2.5.1項下5批樣品，換不同人員進行光譜采集，經(jīng)2.3項預處理后分別代入模型I及模型II，結果如圖5所示，CI 限度值均小于 7，不同人員采集結果均通過模型I及模型II的驗證.

圖5 不同人員驗證硫酸氫氯吡格雷片結果

2.5.3 不同儀器驗證

另取2.5.1項下5批樣品，用本實驗室同型號近紅外光譜儀進行光譜采集，經(jīng)2.3項預處理后分別代入模型I及模型II，結果如圖6所示，CI 限度值均小于 7，不同儀器采集結果均通過模型I及模型II的驗證.

圖6 不同儀器驗證硫酸氫氯吡格雷片結果

2.5.4 不同廠家驗證

取樂普藥業(yè)生產的相同規(guī)格的硫酸氫氯吡格雷片1片，放置在檢測窗上，探頭抵住藥片，按2.1項設定參數(shù)依法測得光譜.經(jīng)2.3項預處理后分別代入模型I及模型II，結果如圖7所示，CI 限度值遠大于 7，因此模型I及模型II通過驗證.

圖7 不同廠家硫酸氫氯吡格雷片驗證結果

3 討 論

原始光譜中包含信息繁雜，既有主成分及輔料的有用信息，也有背景、噪音、光散射效應等干擾信息.適當處理頻譜可以減少或消除各種干擾因素對頻譜的影響.使用 OPUS5.0 分析軟件自帶功能對原始光譜進行預處理.預處理的方法有很多，常見的如光譜數(shù)據(jù)平滑、求導、歸一化和基線校正.光譜數(shù)據(jù)平滑是消除噪聲的最常用方法之一.用于平滑數(shù)據(jù)的常用方法包括鄰域比較方法，移動平均方法，指數(shù)平均方法等.在近紅外分析中，樣品中的不同組分之間會相互干擾從而導致吸收光譜的譜線出現(xiàn)重疊的現(xiàn)象.當出現(xiàn)譜線重疊的現(xiàn)象時，可采用求導的方法進行處理，通常使用的是一階求導和二階求導.當樣品稀釋或光程變化等變化影響光譜時，可以通過歸一化方法對圖譜進行處理，其中包括最小/最大歸一化、矢量歸一化、回零校正，其中最常使用的是矢量歸一化.因此本次實驗中，我們分別采用一階導數(shù)化+矢量歸一化以及二階導數(shù)化+矢量歸一化分別對光譜進行預處理并各自建立模型[15].

經(jīng)不同廠家同規(guī)格的樣品驗證模型I及模型II后，二者比較結果顯示，用二階導數(shù)化和矢量歸一化預處理的光譜比用一階導數(shù)化和矢量歸一化預處理的光譜更為偏離 CI限度值.推測模型II對于硫酸氫氯吡格雷片的鑒別更靈敏.

4 結 語

本實驗成功建立進口藥品硫酸氫氯吡格雷片的近紅外一致性檢驗模型，并通過驗證，該方法快速、簡便、準確，適用于進口藥品硫酸氫氯吡格雷片的一致性快速檢驗，大大提高稽查檢驗人員工作效率.