周 蜜，黃 潔，雷紅梅

(九江市第三人民醫(yī)院檢驗科，江西 九江 332000)

分枝桿菌感染引起的結(jié)核病和非結(jié)核病是嚴重危害人類健康的慢性呼吸道傳染病，在全球范圍內(nèi)流行。結(jié)核病是全世界十大死因之一，也是我國重點控制的乙類傳染病之一[1]。2017年，估計有1000萬人新感染結(jié)核：580萬男性，320萬女性，100萬兒童，中國估計有88.9萬人新感染結(jié)核，僅次于印度，為世界第二大結(jié)核病高發(fā)國家[2]。近年來，非結(jié)核分枝桿菌(NTM)感染呈快速增長趨勢，并已成為威脅人類健康的重要公共衛(wèi)生問題[3]。非結(jié)核分枝桿菌與結(jié)核分枝桿菌同屬抗酸桿菌，臨床特征相似，故極易出現(xiàn)誤診，且NTM對常規(guī)抗結(jié)核藥具有較高的耐藥性，因此準確快速檢測分枝桿菌菌種類型對于分枝桿菌感染類疾病的診治具有重大意義[4]。本研究應(yīng)用PCR-反向點雜交法對九江市第三人民醫(yī)院收治的464例疑似分枝桿菌感染患者的4種不同類型標本進行菌種檢測，旨在分析九江地區(qū)分枝桿菌流行狀況，為臨床診治及制訂相關(guān)防控措施提供實驗室依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2016年6月至2019年10月在本院就診的疑似分枝桿菌感染的門診及住院患者464例，男292例，女172例；年齡1～87歲，平均年齡45.53歲；其中標本類型：灌洗液標本240例、痰液209例、分泌物11例、胸腹水4例。

1.2 檢測方法

儀器與試劑：ETC811 PCR擴增儀、電水浴箱、分子雜交儀及分枝桿菌菌種鑒定基因檢測試劑(亞能生物技術(shù)有限公司原裝試劑)等。

應(yīng)用PCR-反向點雜交法檢測22個分枝桿菌，包括恥垢分枝桿菌(MSM)、胞內(nèi)分枝桿菌(MIN)、堪薩斯分枝桿菌(MKA)、龜分枝桿菌龜亞種(MCH)、海/潰瘍分枝桿菌(MMA)、偶發(fā)/豬分枝桿菌(MFO)、土分枝桿菌(MTE)、不產(chǎn)色分枝桿菌(MNO)、結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群(MTC)、鳥分枝桿菌(MAV)、瘰疬分枝桿菌(MSC)、龜分枝桿菌膿腫亞腫(MAB)、蟾蜍分枝桿菌(MXE)、淺黃分枝桿菌(MGI)、草分枝桿菌(MPH)、戈登分枝桿菌(MGO)、次要分枝桿菌(MTR)、胃分枝桿菌(MGA)、母牛分枝桿菌(MUA)、蘇爾加分枝桿菌(MDI)、迪氏分枝桿菌(MDI)、猿猴分枝桿菌(MSI)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計處理，分類計數(shù)資料用率來進行描述。

2 結(jié)果

2.1 分枝桿菌菌種分布情況

464例標本，共檢出分枝桿菌陽性216例(陽性率為46.5%)，均為單一感染。其中MTC 195例(占90.3%)，NTM 21例(占9.7%)。NTM感染21例中MIN感染11例、MGO感染6例、MAB感染2例、MXE感染2例。見表1。

表1 216例分枝桿菌核酸檢測陽性菌種分布構(gòu)成比

2.2 不同標本類型分枝桿菌檢測結(jié)果

痰液標本209例，分枝桿菌核酸檢測陽性130例，陽性率為62.2%；灌洗液標本240例，分枝桿菌核酸檢測陽性82例，陽性率為34.2%；分泌物標本11例，分枝桿菌核酸檢測陽性4例，陽性率為36.4%。胸腹水標本4例，分枝桿菌核酸檢測陽性0例，陽性率為0.0%。

3 討論

分枝桿菌分為結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群、非結(jié)核分枝桿菌及麻風(fēng)桿菌三大類，目前以結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群及非結(jié)核分枝桿菌感染為主。分枝桿菌感染是全球關(guān)注的公共衛(wèi)生和社會問題之一。我國更是結(jié)核病高負擔、高危險性國家[5]。NTM系指分枝桿菌屬中，除結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群(人型、牛型、非洲型和田鼠型結(jié)核分枝桿菌)和麻風(fēng)分枝桿菌以外的分枝桿菌。NTM可侵犯全身許多臟器和組織，其中以肺部最為常見。肺外病變包括淋巴結(jié)、皮膚、軟組織、骨骼等。由于NTM肺病的臨床表現(xiàn)與影像學(xué)表現(xiàn)酷似肺結(jié)核，而且痰涂片找抗酸桿菌檢查也可呈陽性，導(dǎo)致誤診誤治的問題十分嚴重。且大多數(shù)NTM對常用的抗結(jié)核藥物耐藥，所以需要根據(jù)特異性菌種鑒定及藥敏情況制訂出治療方案[6]。因此菌種鑒定對分枝桿菌感染診治極其重要。

據(jù)報道[7]，NTM感染的患病率由1971年的0.82/10萬上升到1997年的3.52/10萬，是25年前的3.8倍。艾滋病的出現(xiàn)更是加劇了NTM病的流行，據(jù)研究[8]表明，HIV陽性者是NTM感染的高危人群，尤以MAC為甚，其感染所占比例可高達95%以上。2010年我國第五次全國結(jié)核病流行病學(xué)調(diào)查[9]顯示，我國現(xiàn)有結(jié)核病患者700萬，其中非結(jié)核分枝桿菌的感染率為22.9%，明顯高于2000年全國第四次結(jié)核病流行病調(diào)查的11.1%[10]。本研究分析的464例疑似分枝桿菌感染患者，結(jié)果為216例陽性(占46.5%)，其中MTC占90.3%，NTM占9.7%，NTM感染率低于第五次全國調(diào)查水平。NTM中以MIN為主，與張潔等[11]研究的北京地區(qū)NTM菌種分布結(jié)果相似。本研究檢出NTM菌種為MIN、MGO、MAB、MXE，共4種。張潔等[11]研究的北京地區(qū)檢出NTM菌種為胞內(nèi)分枝桿菌、堪薩斯分枝桿菌、鳥分枝桿菌、膿腫分枝桿菌、偶然分枝桿菌、戈登分枝桿菌、蟾蜍分枝桿菌、瘰疬分枝桿菌、草分枝桿菌、恥垢分枝桿菌、母牛分枝桿菌、新金色分枝桿菌及熊本分枝桿菌共13種。由此可見九江地區(qū)的NTM菌種類型少于北京地區(qū)。

綜上所述，由于非結(jié)核分枝桿菌感染呈現(xiàn)上升趨勢，因此對分枝桿菌進行分析可以幫助臨床更快速有效的對疑似分枝桿菌感染的疾病實施針對性治療?？梢越o當?shù)丶膊】刂茩C構(gòu)制訂相應(yīng)的呼吸道傳染性疾病防治措施提供依據(jù)。