周 蜜，黃 潔，雷紅梅

(九江市第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西 九江 332000)

分枝桿菌感染引起的結(jié)核病和非結(jié)核病是嚴(yán)重危害人類健康的慢性呼吸道傳染病，在全球范圍內(nèi)流行。結(jié)核病是全世界十大死因之一，也是我國(guó)重點(diǎn)控制的乙類傳染病之一[1]。2017年，估計(jì)有1000萬(wàn)人新感染結(jié)核：580萬(wàn)男性，320萬(wàn)女性，100萬(wàn)兒童，中國(guó)估計(jì)有88.9萬(wàn)人新感染結(jié)核，僅次于印度，為世界第二大結(jié)核病高發(fā)國(guó)家[2]。近年來(lái)，非結(jié)核分枝桿菌(NTM)感染呈快速增長(zhǎng)趨勢(shì)，并已成為威脅人類健康的重要公共衛(wèi)生問(wèn)題[3]。非結(jié)核分枝桿菌與結(jié)核分枝桿菌同屬抗酸桿菌，臨床特征相似，故極易出現(xiàn)誤診，且NTM對(duì)常規(guī)抗結(jié)核藥具有較高的耐藥性，因此準(zhǔn)確快速檢測(cè)分枝桿菌菌種類型對(duì)于分枝桿菌感染類疾病的診治具有重大意義[4]。本研究應(yīng)用PCR-反向點(diǎn)雜交法對(duì)九江市第三人民醫(yī)院收治的464例疑似分枝桿菌感染患者的4種不同類型標(biāo)本進(jìn)行菌種檢測(cè)，旨在分析九江地區(qū)分枝桿菌流行狀況，為臨床診治及制訂相關(guān)防控措施提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2016年6月至2019年10月在本院就診的疑似分枝桿菌感染的門診及住院患者464例，男292例，女172例；年齡1～87歲，平均年齡45.53歲；其中標(biāo)本類型：灌洗液標(biāo)本240例、痰液209例、分泌物11例、胸腹水4例。

1.2 檢測(cè)方法

儀器與試劑：ETC811 PCR擴(kuò)增儀、電水浴箱、分子雜交儀及分枝桿菌菌種鑒定基因檢測(cè)試劑(亞能生物技術(shù)有限公司原裝試劑)等。

應(yīng)用PCR-反向點(diǎn)雜交法檢測(cè)22個(gè)分枝桿菌，包括恥垢分枝桿菌(MSM)、胞內(nèi)分枝桿菌(MIN)、堪薩斯分枝桿菌(MKA)、龜分枝桿菌龜亞種(MCH)、海/潰瘍分枝桿菌(MMA)、偶發(fā)/豬分枝桿菌(MFO)、土分枝桿菌(MTE)、不產(chǎn)色分枝桿菌(MNO)、結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群(MTC)、鳥分枝桿菌(MAV)、瘰疬分枝桿菌(MSC)、龜分枝桿菌膿腫亞腫(MAB)、蟾蜍分枝桿菌(MXE)、淺黃分枝桿菌(MGI)、草分枝桿菌(MPH)、戈登分枝桿菌(MGO)、次要分枝桿菌(MTR)、胃分枝桿菌(MGA)、母牛分枝桿菌(MUA)、蘇爾加分枝桿菌(MDI)、迪氏分枝桿菌(MDI)、猿猴分枝桿菌(MSI)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，分類計(jì)數(shù)資料用率來(lái)進(jìn)行描述。

2 結(jié)果

2.1 分枝桿菌菌種分布情況

464例標(biāo)本，共檢出分枝桿菌陽(yáng)性216例(陽(yáng)性率為46.5%)，均為單一感染。其中MTC 195例(占90.3%)，NTM 21例(占9.7%)。NTM感染21例中MIN感染11例、MGO感染6例、MAB感染2例、MXE感染2例。見(jiàn)表1。

表1 216例分枝桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性菌種分布構(gòu)成比

2.2 不同標(biāo)本類型分枝桿菌檢測(cè)結(jié)果

痰液標(biāo)本209例，分枝桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性130例，陽(yáng)性率為62.2%；灌洗液標(biāo)本240例，分枝桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性82例，陽(yáng)性率為34.2%；分泌物標(biāo)本11例，分枝桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性4例，陽(yáng)性率為36.4%。胸腹水標(biāo)本4例，分枝桿菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性0例，陽(yáng)性率為0.0%。

3 討論

分枝桿菌分為結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群、非結(jié)核分枝桿菌及麻風(fēng)桿菌三大類，目前以結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群及非結(jié)核分枝桿菌感染為主。分枝桿菌感染是全球關(guān)注的公共衛(wèi)生和社會(huì)問(wèn)題之一。我國(guó)更是結(jié)核病高負(fù)擔(dān)、高危險(xiǎn)性國(guó)家[5]。NTM系指分枝桿菌屬中，除結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群(人型、牛型、非洲型和田鼠型結(jié)核分枝桿菌)和麻風(fēng)分枝桿菌以外的分枝桿菌。NTM可侵犯全身許多臟器和組織，其中以肺部最為常見(jiàn)。肺外病變包括淋巴結(jié)、皮膚、軟組織、骨骼等。由于NTM肺病的臨床表現(xiàn)與影像學(xué)表現(xiàn)酷似肺結(jié)核，而且痰涂片找抗酸桿菌檢查也可呈陽(yáng)性，導(dǎo)致誤診誤治的問(wèn)題十分嚴(yán)重。且大多數(shù)NTM對(duì)常用的抗結(jié)核藥物耐藥，所以需要根據(jù)特異性菌種鑒定及藥敏情況制訂出治療方案[6]。因此菌種鑒定對(duì)分枝桿菌感染診治極其重要。

據(jù)報(bào)道[7]，NTM感染的患病率由1971年的0.82/10萬(wàn)上升到1997年的3.52/10萬(wàn)，是25年前的3.8倍。艾滋病的出現(xiàn)更是加劇了NTM病的流行，據(jù)研究[8]表明，HIV陽(yáng)性者是NTM感染的高危人群，尤以MAC為甚，其感染所占比例可高達(dá)95%以上。2010年我國(guó)第五次全國(guó)結(jié)核病流行病學(xué)調(diào)查[9]顯示，我國(guó)現(xiàn)有結(jié)核病患者700萬(wàn)，其中非結(jié)核分枝桿菌的感染率為22.9%，明顯高于2000年全國(guó)第四次結(jié)核病流行病調(diào)查的11.1%[10]。本研究分析的464例疑似分枝桿菌感染患者，結(jié)果為216例陽(yáng)性(占46.5%)，其中MTC占90.3%，NTM占9.7%，NTM感染率低于第五次全國(guó)調(diào)查水平。NTM中以MIN為主，與張潔等[11]研究的北京地區(qū)NTM菌種分布結(jié)果相似。本研究檢出NTM菌種為MIN、MGO、MAB、MXE，共4種。張潔等[11]研究的北京地區(qū)檢出NTM菌種為胞內(nèi)分枝桿菌、堪薩斯分枝桿菌、鳥分枝桿菌、膿腫分枝桿菌、偶然分枝桿菌、戈登分枝桿菌、蟾蜍分枝桿菌、瘰疬分枝桿菌、草分枝桿菌、恥垢分枝桿菌、母牛分枝桿菌、新金色分枝桿菌及熊本分枝桿菌共13種。由此可見(jiàn)九江地區(qū)的NTM菌種類型少于北京地區(qū)。

綜上所述，由于非結(jié)核分枝桿菌感染呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，因此對(duì)分枝桿菌進(jìn)行分析可以幫助臨床更快速有效的對(duì)疑似分枝桿菌感染的疾病實(shí)施針對(duì)性治療。可以給當(dāng)?shù)丶膊】刂茩C(jī)構(gòu)制訂相應(yīng)的呼吸道傳染性疾病防治措施提供依據(jù)。