尚志忠，姜彥彪，趙 冰，張哲文，趙 霏，張 婷，張俊華，馬 彬,7＊

1.蘭州大學(xué)循證醫(yī)學(xué)中心（蘭州 730000）

2.蘭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院（蘭州 730000）

3.蘭州大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院（蘭州 730000）

4.蘭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心（蘭州 730000）

5.西北民族大學(xué)醫(yī)學(xué)院機(jī)能學(xué)教研室（蘭州730030）

6.天津中醫(yī)藥大學(xué)（天津 301617）

7.甘肅省循證醫(yī)學(xué)與臨床轉(zhuǎn)化重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（蘭州 730000）

2010年，為提高臨床前動物實(shí)驗(yàn)報告的一致性，Carol Kilkenny等[1]在國際實(shí)驗(yàn)動物3R中心（National Centre for the Replacement,Refinement and Reduction of Animals in Research，NC3Rs）的資助下，牽頭制定了動物實(shí)驗(yàn)研究報告指南——ARRIVE指南（Animal Research: Reporting In Vivo Experiment: The ARRIVE Guidelines）。該指南目前已被EQUATOR Network收錄，得到廣泛認(rèn)可[2]。

內(nèi)容細(xì)化，條目精簡的指南有利于研究人員更好的遵守與使用[3]。然而，NC3Rs對動物實(shí)驗(yàn)人員的調(diào)查顯示，未按照ARRIVE指南條目報告研究的主要原因?yàn)?，?shí)驗(yàn)人員認(rèn)為ARRIVE中包含的條目與其自己的實(shí)驗(yàn)無關(guān)，而且指南中的部分條目，例如減少偏倚的措施等未被實(shí)驗(yàn)人員很好地理解，因此，加劇了動物實(shí)驗(yàn)的不完整報告[4]。同時，在ARRIVE 2010的應(yīng)用過程中發(fā)現(xiàn)，由于指南制定專家未對涉及的所有條目的重要性的先后順序做出說明，導(dǎo)致部分科研人員未充分意識到指南中各個條目所涵蓋信息的重要性[1,5]。此外，盡管ARRIVE 2010對每個條目的內(nèi)容進(jìn)行了簡要解釋，但未提供如何使用各條目的說明或示例。例如：在動物實(shí)驗(yàn)分組及結(jié)果評估中使用盲法能顯著降低動物實(shí)驗(yàn)的偏倚風(fēng)險[6]，然而ARRIVE 2010僅把盲法作為條目6的一個亞條目中的部分內(nèi)容進(jìn)行報告，并未強(qiáng)調(diào)盲法的重要性，導(dǎo)致研究人員容易忽視動物實(shí)驗(yàn)中應(yīng)報告的重要信息[7]。

為確保研究人員、編輯、審稿人及其他相關(guān)期刊工作人員更好地使用動物報告指南，以提高動物研究的嚴(yán)謹(jǐn)性和可重復(fù)性，由Nathalie Percie du Sert等人組成的新的國際工作組重新對ARRIVE 2010指南進(jìn)行修訂，最終于2019年在線發(fā)布（https://www.biorxiv.org/），即ARRIVE 2019。同時，該工作組開發(fā)了解讀性文件，對ARRIVE 2019全部條目的基本原理、重要概念予以解釋，并提供了具體示例以便理解[8]。為幫助國內(nèi)研究人員充分了解ARRIVE 2019指南，本文對其進(jìn)行詳細(xì)介紹，并著重比較ARRIVE 2019與ARRIVE 2010的差異，以便于國內(nèi)研究人員及時知曉該指南的更新內(nèi)容，充分利用指南改進(jìn)動物實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)與實(shí)施，提高報告標(biāo)準(zhǔn)并確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)得到充分評估和利用。

1 ARRIVE 2019的基本內(nèi)容

ARRIVE 2019根據(jù)德爾菲法確定各條目的優(yōu)先順序，并根據(jù)條目的重要性將其分成ARRIVE Essential 10和 Recommended Set兩個部分。每個部分中的條目根據(jù)文章的邏輯順序進(jìn)行排序，并沒有重要性的先后順序。

ARRIVE 2019共涉及21個條目和39個亞條目。其中，ARRIVE Essential 10包括10個條目和23個亞條目，為動物實(shí)驗(yàn)中必須報告的基本條目（詳見表1），報告內(nèi)容包括“研究設(shè)計(jì)、樣本量、納入和排除標(biāo)準(zhǔn)、隨機(jī)化、盲法、結(jié)果測量、統(tǒng)計(jì)方法、實(shí)驗(yàn)動物、實(shí)驗(yàn)步驟、結(jié)果”10個方面，目的是使評論者和讀者能夠準(zhǔn)確地評估動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果和結(jié)論的可靠性[9]。Recommended Set包括11個條目和16個亞條目，為動物實(shí)驗(yàn)中推薦報告的條目（詳見表2），報告內(nèi)容包括“摘要、背景、目的、倫理聲明、飼養(yǎng)場所和飼養(yǎng)、動物護(hù)理和監(jiān)測、詮釋/科學(xué)內(nèi)涵、概括/轉(zhuǎn)換、注冊計(jì)劃書、數(shù)據(jù)共享、利益聲明”11個方面，目的是在保證ARRIVE Essential 10中條目充分報告的前提下，隨著時間的推移，逐漸添加Recommended Set中的條目，直到所有的條目都在動物實(shí)驗(yàn)中常規(guī)報告[9]。

表1 10項(xiàng)必經(jīng)條目Table 1.ARRIVE Essential 10

表2 推薦條目Table 2.Recommeded set

2 ARRIVE 2019與ARRIVE 2010的區(qū)別

ARRIVE 2019重新對條目進(jìn)行排序，并根據(jù)其重要性分成兩個部分，以評估研究的可靠性。每個部分中無重要性的先后順序，各條目按邏輯排序。

2.1 新增條目/亞條目

①納入和排除標(biāo)準(zhǔn)（條目3）：研究表明數(shù)據(jù)的臨時排除會導(dǎo)致假陽性結(jié)果[10]，因此，ARRIVE 2019規(guī)定在實(shí)驗(yàn)開始和數(shù)據(jù)收集之前定義納入和排除標(biāo)準(zhǔn)[8]（新增條目3a），以確保動物實(shí)驗(yàn)研究的嚴(yán)謹(jǐn)性。

②結(jié)果測量（條目6）：假設(shè)檢驗(yàn)研究中的次要結(jié)局指標(biāo)可反映干預(yù)措施的附加效果，但部分研究缺少對次要結(jié)局指標(biāo)的報告，使其研究結(jié)果的全面性和可靠性降低[8]。因此，ARRIVE 2019要求動物實(shí)驗(yàn)研究應(yīng)報告所有的結(jié)局指標(biāo)，同時新增了1個亞條目（條目6b）以強(qiáng)調(diào)假設(shè)檢驗(yàn)研究中報告主要結(jié)局指標(biāo)的必要性；并將條目名稱改為“結(jié)果測量”。

③動物護(hù)理和監(jiān)測（條目16）：ARRIVE 2019新增1個亞條目（條目16c）以鼓勵報告人道終點(diǎn)和監(jiān)測，同時將“不良反應(yīng)”（原條目17）改為“動物護(hù)理和監(jiān)測”以更好地反映內(nèi)容。

④注冊計(jì)劃書（條目19）：有研究顯示：動物實(shí)驗(yàn)的測量結(jié)果中有高達(dá)50%的結(jié)局指標(biāo)未被報告，這種選擇性結(jié)果報告會導(dǎo)致對生物效應(yīng)的夸大[11]。因此，ARRIVE 2019新增“注冊計(jì)劃書”（條目19）以規(guī)范實(shí)驗(yàn)結(jié)果報告，提高動物研究透明度[9]。

⑤數(shù)據(jù)共享（條目20）：通過系統(tǒng)評價方法，對多個研究的原始數(shù)據(jù)進(jìn)行嚴(yán)格評價、整合和分析以得出綜合性結(jié)論，可減少實(shí)驗(yàn)動物不必要的使用，并增加原始數(shù)據(jù)的利用程度[8]，因此ARRIVE 2019新增條目“數(shù)據(jù)共享”（條目20），以鼓勵作者提供數(shù)據(jù)共享聲明。

⑥利益聲明（條目21）：ARRIVE 2019新增關(guān)于報告潛在利益沖突的亞條目（條目21a）；同時在條目21b中增加對資助者角色的說明，將有助于讀者評估任何競爭利益及潛在的偏倚來源。

2.2 條目簡化

①實(shí)驗(yàn)動物（條目8）、背景（條目12）、概括/轉(zhuǎn)換（條目18）：澄清了措辭并刪除了示例以簡化指南。

②實(shí)驗(yàn)步驟（條目9）：ARRIVE 2019規(guī)定要詳細(xì)地描述實(shí)驗(yàn)步驟以允許其他人能夠重復(fù)，同時刪除了示例以簡化指南。

③飼養(yǎng)場所和飼養(yǎng)（條目15）：將有關(guān)利益評估和干預(yù)的亞條目移至條目16“動物護(hù)理和監(jiān)測”，并刪除了示例以簡化指南。

2.3 條目修訂

①樣本量（條目2）：動物實(shí)驗(yàn)中實(shí)驗(yàn)單位的數(shù)量可能不同于實(shí)驗(yàn)動物的數(shù)量，如使用飼養(yǎng)成對動物的籠子為研究對象的實(shí)驗(yàn)中，動物的數(shù)量是實(shí)驗(yàn)單位數(shù)量的兩倍[8]。因此，ARRIVE 2019澄清了實(shí)驗(yàn)單位的數(shù)量可能不同于動物的數(shù)量，同時，在結(jié)果（條目10）中提到獨(dú)立重復(fù)實(shí)驗(yàn)，以避免與生物學(xué)重復(fù)混淆。

②隨機(jī)化（條目4）：ARRIVE 2019將有關(guān)隨機(jī)化的信息進(jìn)行整合，并重新對內(nèi)容進(jìn)行了說明，以突出隨機(jī)化在動物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中的重要性；同時澄清了實(shí)驗(yàn)單位而非單個動物被分配給各個實(shí)驗(yàn)組。

③盲法（條目5）：研究表明，未采用盲法對結(jié)果進(jìn)行評估導(dǎo)致治療效果被高估近30%～45%[8]。因此，作為研究設(shè)計(jì)（原6b項(xiàng)）的一部分，ARRIVE 2019在條目5中增加了更多對盲法的描述以突出其重要性和特異性。

④統(tǒng)計(jì)方法（條目7）：ARRIVE 2019使用術(shù)語“實(shí)驗(yàn)單位”代替“分析單位”以保證整個指南的一致性。

⑤結(jié)果（條目10）：為防止與條目6“結(jié)果測量”混淆，ARRIVE 2019將該條目名稱改為“結(jié)果”；同時詳細(xì)解釋了該條目，以便就結(jié)果報告提供明確的指導(dǎo)。

⑥摘要（條目11）：研究表明，在生物醫(yī)學(xué)研究中存在地方性的雄性偏見[12]，因此動物實(shí)驗(yàn)研究在摘要中應(yīng)說明所用動物的性別。

⑦倫理聲明（條目14）：ARRIVE 2019刪除了對英國立法的使用以擴(kuò)大指南的適用范圍；同時，ARRIVE 2019新增了相關(guān)許可證或協(xié)議編號的規(guī)定,以提高動物實(shí)驗(yàn)的透明度。

2.4 刪除條目/亞條目

①標(biāo)題（原條目1）：該條目沒有提供對標(biāo)題撰寫的具體指導(dǎo)。

②目的（原條目4）：因不適用于探索性研究，ARRIVE 2019刪除了對主要和次要目的的使用，并要求報告與研究類型相關(guān)的研究問題。

③研究設(shè)計(jì)（原條目6）：研究表明，“隨機(jī)化、隱蔽分組和在結(jié)果評估中采用盲法”可有效降低動物實(shí)驗(yàn)的偏倚風(fēng)險[6]。因此，ARRIVE 2019 將有關(guān)“隨機(jī)化”和“盲法”的信息從“研究設(shè)計(jì)”（條目1）中刪除，并將其作為單獨(dú)的條目在指南中呈現(xiàn)以引起研究人員的重視。同時，指南刪除了原條目6b中模糊的表達(dá)，即“旨在減少主觀性偏倚影響而采取的任何步驟”。

④基線數(shù)據(jù)（原條目14）：該條目與條目8“實(shí)驗(yàn)動物”重復(fù)。

⑤詮釋/科學(xué)內(nèi)涵（原條目18）：該條目中的亞條目“描述該研究方法或研究發(fā)現(xiàn)對于替代、優(yōu)化或減少動物使用（3R原則）的意義”與動物研究不相關(guān)。

3 討論

透明而準(zhǔn)確的報告是審查實(shí)驗(yàn)方法的嚴(yán)謹(jǐn)性，評估實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的必要條件，對提高生物醫(yī)學(xué)研究的可重復(fù)性至關(guān)重要[8]。2010年制定的ARRIVE指南的目的是改進(jìn)動物實(shí)驗(yàn)的報告規(guī)范，最大限度地利用動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果。多年來，盡管ARRIVE 2010得到了資助者和期刊編輯的極力推薦，并被EQUATOR Network收錄，但研究人員對指南的使用程度依舊很低，動物研究的報告質(zhì)量也沒有達(dá)到預(yù)期的改善[2,13]。

本文介紹的ARRIVE 2019是在ARRIVE 2010的基礎(chǔ)上，根據(jù)德爾菲法對各個條目的優(yōu)先級進(jìn)行排序，有助于期刊編輯和審稿人確定動物實(shí)驗(yàn)研究中最重要的條目，以及判斷是否在文章中進(jìn)行報告的重要參考依據(jù)；同時，指南制定專家對全部條目的內(nèi)容進(jìn)行重新審核與修訂以確保指南所提供的指導(dǎo)符合當(dāng)前的最佳證據(jù)。此外，ARRIVE 2019附帶全部條目的解釋和說明文件，用于解釋指南中每個條目的原理并澄清關(guān)鍵概念，并提供示例以方便對指南的理解與實(shí)施[8]。雖然ARRIVE 2019對很多條目進(jìn)行了精簡與補(bǔ)充，但科研人員在實(shí)際操作環(huán)節(jié)可能仍需要花費(fèi)一定時間學(xué)習(xí)和反復(fù)練習(xí)，以掌握細(xì)節(jié)。同時，后期可能還需要采取多種途徑，對ARRIVE 2019進(jìn)行推廣和普及以提高動物實(shí)驗(yàn)研究人員對指南的知曉率，最終促進(jìn)動物實(shí)驗(yàn)報告質(zhì)量的提升[14]?？傊?，ARRIVE 2019重新修訂全部條目以確保研究人員、審稿人和期刊編輯能夠更好地使用ARRIVE指南，從而提高動物實(shí)驗(yàn)研究的可重復(fù)性和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的再現(xiàn)性。