李續(xù)亮

（山西省腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科，山西 太原 030013）

HIV是導(dǎo)致艾滋?。ˋIDS）主要因素，關(guān)于HIV的傳播目前已成為社會(huì)公共衛(wèi)生重點(diǎn)防護(hù)對(duì)象。AIDS作為免疫缺乏綜合征，能夠嚴(yán)重?fù)p害患者的免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致免疫功能最終喪失[1]。HIV主要由血液、性傳播以及母嬰三個(gè)主要途徑傳播，目前性傳播成為最主要的傳播方式，尤其是男男性傳播。早期發(fā)現(xiàn)HIV病毒可以提高治療效果，幫助醫(yī)生確診并制定方案。目前關(guān)于HIV病毒的篩查方法主要結(jié)合實(shí)驗(yàn)室HIV抗體檢查進(jìn)行明確，本次研究將ELISA以及ECLIA應(yīng)用其中，分析兩種監(jiān)測(cè)方法的應(yīng)用效果。結(jié)合我院110懷疑HIV感染者展開研究，資料如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年11月～2019年12月我院110懷疑HIV感染者作為研究對(duì)象。所有受檢者均接受酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）及化學(xué)發(fā)光（ECLIA）檢測(cè)。受檢者中男58例，女52例，年齡（19～58）歲，平均年齡（38.5±6.3）歲，是否有性生活（是87例，否23例）。采取血液標(biāo)本后不經(jīng)溶血和清亮處理，在2～6攝氏度恒溫下儲(chǔ)存。

1.2 方法

1.2.1 ELISA

采取雙抗原夾心法，準(zhǔn)備聚苯乙烯板，并將抗體與蛋白質(zhì)稀釋后加入實(shí)驗(yàn)反應(yīng)孔中[2]，規(guī)格為0.1 mL/孔，加入后放置在4攝氏度恒溫狀態(tài)下儲(chǔ)存12 h，取出聚苯乙烯板后將反應(yīng)孔中溶液倒出，將反應(yīng)孔充分洗滌（使用緩沖液），將待檢標(biāo)本加入孔內(nèi)，流出空白孔以及對(duì)照孔，其余孔內(nèi)加酶標(biāo)抗體放置在37攝氏度恒溫狀態(tài)下60 min，隨后使用TMB溶液顯色。

1.2.2 ECLIA

采取KPS-PM型號(hào)的化學(xué)發(fā)光法分析儀，首先展開免疫分析，其次制作抗原并結(jié)合辣根過氧化氫物酶完成標(biāo)記。清洗試劑盒后將受檢標(biāo)本加入，并將發(fā)光底物加入展開檢測(cè)。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

對(duì)所有受檢血樣標(biāo)本均行ELISA及ECLIA檢驗(yàn)，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果評(píng)估兩種監(jiān)測(cè)方法下的確診率、誤診率以及漏診率。以最終的免疫印跡（WB法）試驗(yàn)結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)估兩種檢測(cè)方法的可信度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

經(jīng)ELISA及ECLIA檢驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)，與金標(biāo)準(zhǔn)的確診率（92.7%）相比，ECLIA檢驗(yàn)后確診率（91.8%）更接近，漏診率為（0.9%），誤診率為（0.9%）；ELISA檢驗(yàn)后確診率為（82.7%），漏診率為（4.5%），誤診率為（5.5%）。與ECLIA相比誤診率以及漏診率相對(duì)較高，確診率較低，檢測(cè)結(jié)果存在差異，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。如表1。

表1 ELISA及ECLIA檢驗(yàn)結(jié)果評(píng)價(jià)[n（%）]

3 討 論

HIV病毒感染存在三個(gè)分期（急診期、無(wú)癥狀期、艾滋病期），不同階段患者所表現(xiàn)的癥狀類型存在差異。目前關(guān)于HIV病毒的檢查主要結(jié)合實(shí)驗(yàn)室抗原檢查為主，除此之外機(jī)體免疫功能檢查，致病性感染以及病原體檢查也是常用手段，但相比之下HIV抗體檢測(cè)的臨床可信度更高。其中主要包括ELISA及ECLIA兩種，但目前HIV檢測(cè)的干擾因素增加，臨床檢驗(yàn)結(jié)果的可信度仍待考究。檢測(cè)時(shí)較高的特異度以及敏感度均是證明檢驗(yàn)方法可靠的有力依據(jù)，而本文結(jié)合最終的WB法試驗(yàn)結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，觀察兩種檢驗(yàn)方法的診斷準(zhǔn)確率及誤診和漏診率。

研究結(jié)合我院110懷疑HIV感染者作為研究對(duì)象，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：ECLIA檢驗(yàn)后確診率較ELISA高，漏診率誤診率較ELISA低，檢測(cè)結(jié)果存在差異，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），這說明ECLIA檢驗(yàn)HIV時(shí)的可信度相對(duì)較高。國(guó)內(nèi)臨床診斷HIV感染時(shí)主要以血清病毒抗體檢測(cè)為標(biāo)準(zhǔn)，抗HiV抗體是判斷患者有無(wú)感染的重要依據(jù)，而將病毒與相關(guān)抗原作為輔助手段，這是因?yàn)镠IV難以被完全清除，一般患者將終生持續(xù)感染，所以檢測(cè)體內(nèi)抗體，便能判斷病毒存在與否。以往常采用膠體金法予以檢測(cè)，具有儀器設(shè)備少、檢測(cè)成本低以及快速簡(jiǎn)單的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)，然而膠體金法尚存在敏感性低、難以實(shí)施實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控、無(wú)統(tǒng)一檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)等缺點(diǎn)，所以極易漏檢，不過可用于小型實(shí)驗(yàn)室，用以檢測(cè)急癥患者或HIV抗體。另外，ELISA在檢測(cè)HIV時(shí)具有下列優(yōu)勢(shì)：（1）可結(jié)合抗體/抗原，保留其免疫活性；（2）能夠形成酶標(biāo)記抗體/抗原，既保留其免疫活性，也可保留酶的活性；（3）按照測(cè)定流程將酶標(biāo)記抗體/抗原、受檢樣本置于固相載體上，可促成免疫復(fù)合物形成；（4）經(jīng)由洗滌作用，能夠分離免疫復(fù)合物，使固相載體上的物質(zhì)達(dá)成一定比例，再加入底物，可以生成有色產(chǎn)物，有助于明確待測(cè)物質(zhì)水平；但是由于ELISA需要分離結(jié)合態(tài)抗體/抗原、游離態(tài)抗體/抗原，所以檢測(cè)時(shí)需反復(fù)洗板并加樣，可增大誤差概率，并且由于酶標(biāo)板孔間有所差異，也容易增大變異系數(shù)，導(dǎo)致假陽(yáng)性率升高，此外，ELISA操作繁瑣，往往需要1～2 h才能得到結(jié)果，所以判斷難度較大。ECLIA是結(jié)合了電化學(xué)發(fā)光技術(shù)、生物素-親和素技術(shù)以及磁性微珠包被技術(shù)的一項(xiàng)檢測(cè)技術(shù)，具有較高靈敏度，能夠大幅減少批間、批內(nèi)誤差，獲取準(zhǔn)確臨床結(jié)果，并且由于檢測(cè)期間在流動(dòng)、封閉的系統(tǒng)中實(shí)施，可避免交叉污染，加之試劑穩(wěn)定，所以結(jié)果較為可靠；另外，需要特別提出的是，ECLIA分析時(shí)間較短，僅需20 min便能得出臨床結(jié)果；此外，較之ELISA，ECLIA可測(cè)定較大線性范圍，能夠高出ELISA4個(gè)數(shù)量級(jí)，可預(yù)防前帶倒鉤所致假陰性情況，重復(fù)性以及穩(wěn)定性均十分突出，便于批量化分析，可縮短診斷窗口期，不過不容忽視的是，ECLIA應(yīng)用成本較高，難以在基層醫(yī)院推廣。

綜上所述，HIV檢測(cè)時(shí)采取化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫吸附法兩種檢驗(yàn)方法后，所獲得的檢測(cè)結(jié)果存在差異，其中ECLIA的檢驗(yàn)結(jié)果更有可信度，但ECLIA不適合室間質(zhì)控的檢測(cè)，容易發(fā)生漏檢。