姜曉芹 宮興基 宮嘉慧

【摘 要】目的：探究酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法（ELISA）與電化學(xué)發(fā)光免疫法（ECLIA）對人類免疫缺陷病毒疾?。℉IV）檢驗(yàn)結(jié)果。方法：分別應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法和電化學(xué)發(fā)光免疫法，對我院檢驗(yàn)科2017年1月～2019年1月收到的10000分血清樣本進(jìn)行HIV抗體檢測，并通過蛋白蛋白質(zhì)印跡法確認(rèn)，對比兩種檢驗(yàn)方法的應(yīng)用價(jià)值。結(jié)果：兩種檢測方法陽性符合率均為100%，ECLIA法特異性為100%，高于ELISA法的93.33%，P>0.05，數(shù)據(jù)對比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：電化學(xué)發(fā)光免疫法在人類免疫缺陷病毒檢驗(yàn)中應(yīng)用效果顯著，具有自動化程度高、檢測速度快、特異性高等優(yōu)勢，值得全面推廣應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】人類免疫缺陷病毒;酶聯(lián)免疫吸附法;電化學(xué)發(fā)光免疫法;診斷價(jià)值

人類免疫缺陷病毒（HIV）誘導(dǎo)艾滋?。ˋIDS）發(fā)生，具有傳播速度虧、潛伏期長、危害大等特點(diǎn)，目前HIV病毒感染率呈逐年上升態(tài)勢發(fā)展，對人們的生命安全造成了嚴(yán)重威脅。有效的檢測措施和明確診斷，是控制傳播、指導(dǎo)用藥、判斷預(yù)后的重要手段?，F(xiàn)階段，人類免疫缺陷病毒抗體檢測已成為艾滋病的常規(guī)診斷方法，本文將對ELESA和ELESA在人類免疫缺陷病毒抗體檢測中的應(yīng)用價(jià)值作出分析，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 基本資料

本次研究選擇2017年1月～2019年1月我院檢驗(yàn)科收到的10000份血清為樣本，均為血庫獻(xiàn)血員血清或病房、門診送檢血清，樣本無菌采集并置于低溫冰箱備檢。

1.2 方法

兩種檢測方法均遵循實(shí)驗(yàn)室、操作者、試劑批號一致的基本原則，嚴(yán)格按照說明書操作。經(jīng)不同方法檢測后，初篩HIV陽性樣本需送到市級以上疾控中心進(jìn)行確認(rèn)，若血樣檢測結(jié)果高于截?cái)嘀?，判定為HIV陽性，反之則為HIV陰性。

ELISA檢測：采用HIV抗原抗體診斷試劑盒（北京萬泰生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)）檢測，血液樣本800r/min離心后，取血漿進(jìn)行HIV抗體檢測，在滴定板小孔里加入有已知抗體的抗血清，洗滌后加入待測抗原，觀察兩者是否發(fā)生結(jié)合反應(yīng)，然后洗除多于抗體，加入呈特異反應(yīng)的酶聯(lián)抗體，使其形成“夾心”，若產(chǎn)生有色的酶解產(chǎn)物，說明樣本存在相應(yīng)的抗原。

ECLIA檢測：采用Sysmex HISCL5000化學(xué)發(fā)光分析儀及配套試劑（希森美康醫(yī)用電子有限公司生產(chǎn)）檢測，將被檢測血漿和HIV-1p24單克隆抗體共同孵育，用磁石收集磁性粒子后洗凈，然后加入抗HIV抗原（堿性磷酸酶標(biāo)記后），使其HIV抗體發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)，然后添加發(fā)光底物并用磁石再次收集磁性粒子，在磁性粒子分散后加入清洗液，檢測其發(fā)光強(qiáng)度，從而得出樣本的HIV截?cái)嘀怠?/p>

1.3 觀察指標(biāo)

對比兩種檢測方法的初篩陽性率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

將研究數(shù)據(jù)錄入到Excel內(nèi)，采用新版SPSS 23.0對收集的數(shù)據(jù)加以分析，計(jì)數(shù)資料以n（%）的形式表達(dá)，檢驗(yàn)工具為;當(dāng)檢驗(yàn)工具顯示P<0.05時(shí)，提示數(shù)據(jù)間的對比存在意義。

2 結(jié)果

ELISA法檢測陽性率為0.30%，ECLIA法檢測陽性率為0.28%，確認(rèn)結(jié)果顯示10000份血樣中有28例為HIV陽性，即ECLIA法特異性為100%，高于ELISA法的93.33%，=0.0692，P=7926，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05，見表1。

3 討論

HIV感染主要傳播方式包括血液傳播、母嬰傳播、性傳播等，目前我國HIV感染率呈逐年上升趨勢，HIV病毒入侵人體后，受感染者年齡、營養(yǎng)情況、健康狀況、免疫功能等因素影響，潛伏期長短及癥狀也不盡相同，部分患者將直接進(jìn)入無癥狀期，部分患者則會出現(xiàn)頭痛、咽喉部白斑、皮膚出現(xiàn)粉紅色斑點(diǎn)、淋巴結(jié)腫大等癥狀。ELISA法是HIV的通過檢測方法，在醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室中得到了廣泛應(yīng)用，這種檢測方法需要將游離的抗體與抗原進(jìn)行分離，然后反復(fù)加樣與洗板，雖然技術(shù)成熟，但對操作人員要求較高、操作復(fù)雜、檢測時(shí)間長，且產(chǎn)生誤差的幾率較大[1]。ECLIA法是一種新型HIV篩查方法，應(yīng)用了磁珠包被技術(shù)、電化學(xué)發(fā)光技術(shù)、生物素親和素技術(shù)，具有有效期長、靈敏度高、發(fā)生誤差幾率小、檢測速度快等優(yōu)勢，可真正實(shí)現(xiàn)HIV抗體檢測自動化，故越來越受到重視[2]。本次研究結(jié)果顯示，兩種檢測方法陽性符合率均為100%，ECLIA法特異性為100%，高于ELISA法的93.33%，P>0.05，數(shù)據(jù)對比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明ECLIA法可完全代替ELESA法進(jìn)行HIV抗體檢測，這與劉麗娜等[3]學(xué)者研究結(jié)果一致。由于ELESA法檢測成本較高，因此未能在小型醫(yī)院普及。ECLIA法與其相比，不僅具有批量操作、檢測成本較低等應(yīng)用優(yōu)勢，同時(shí)ECLIA法檢測在封閉的流動系統(tǒng)中進(jìn)行，在保障檢測便捷、快速、可靠、準(zhǔn)確的同時(shí)，可最大限度降低交叉污染[4]。ECLIA法具備獨(dú)特的優(yōu)越性，未來對其進(jìn)行大力推廣，以此擴(kuò)大HIV感染篩查的覆蓋面[5]。

綜上所述，電化學(xué)發(fā)光免疫法在人類免疫缺陷病毒檢驗(yàn)中應(yīng)用效果顯著，具有自動化程度高、檢測速度快、特異性高等優(yōu)勢，值得全面推廣應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

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牛妞，張玉盈.酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)與電化學(xué)發(fā)光免疫分析法在乙肝標(biāo)志物診斷中的效果比較[J].醫(yī)藥前沿，2019，9（29）：137-138.

劉麗娜，高陽.酶聯(lián)免疫吸附法和電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測血清HBsAg結(jié)果的比較[J].實(shí)用醫(yī)藥雜志，2018，35（12）：1105-1106.

張葉鋒，張義東，徐志江.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)與電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測孕婦乙型肝炎表面抗原效果[J].中國計(jì)劃生育學(xué)雜志，2019，27（6）：783-785.

謝玉娜.電化學(xué)發(fā)光免疫法與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測人類免疫缺陷病毒的臨床價(jià)值[J].醫(yī)療裝備，2019，32（6）：61-62.