雷東紅，葛雯雯，閆凡，遲建秀

榆林市第一醫(yī)院兒科，陜西 榆林 718000

支氣管哮喘屬兒科常見多發(fā)呼吸系統(tǒng)疾患，主要臨床特征為氣道慢性炎癥與氣道高反應(yīng)性，有資料統(tǒng)計(jì)，我國14歲以下兒童群體中支氣管哮喘發(fā)病率為0.11%～2.03%，且有逐年增高趨勢[1-2]。肺炎支原體(MP)為介于病毒與細(xì)菌之間的病原微生物之一，可黏附在呼吸道纖毛上皮細(xì)胞表面，引起兒童肺炎、支氣管炎、咽炎等。近年來，有關(guān)研究指出，MP感染可能會(huì)參與氣道炎癥與高反應(yīng)性，在哮喘發(fā)病、進(jìn)展中起著重要作用[3]。免疫球蛋白E(IgE)為免疫因子之一，可黏附于支氣管黏膜下的肥大細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞細(xì)胞膜上，加速一些生物活性物質(zhì)生成及釋放，引發(fā)哮喘[4]。腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白 細(xì) 胞 介 素 -4(IL-4)、白 細(xì)胞 介素 -17(IL-17)均為重要炎性細(xì)胞因子，在機(jī)體炎癥產(chǎn)生、進(jìn)展中扮演著重要角色[5-6]。但目前臨床關(guān)于MP感染與支氣管哮喘患兒發(fā)病的關(guān)系及其對(duì)患兒IgE、細(xì)胞因子影響的研究報(bào)道尚較少。本研究旨在探究MP感染與支氣管哮喘患兒發(fā)病的關(guān)系及其對(duì)患兒IgE、細(xì)胞因子的影響，以期為臨床疾病診治提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年4月至2020年2月榆林市第一醫(yī)院收治的200例支氣管哮喘患兒設(shè)為試驗(yàn)組，同期200例上呼吸道感染患兒設(shè)為上感組，200例健康體檢兒童設(shè)為健康組。試驗(yàn)組中男性111例，女性89例；體質(zhì)量8～57 kg，平均(22.74±4.49)kg；年齡1～12歲，平均(6.36±2.21)歲；疾病病程：急性期108例，緩解期92例。上感組中男性107例，女性93例；體質(zhì)量 8～59 kg，平均(23.04±4.27)kg；年齡1～12歲，平均(6.52±2.14)歲。健康組中男性109例，女性91例；體質(zhì)量 9～58 kg，平均(23.39±4.06)kg；年齡1～12歲，平均(6.68±2.35)歲。三組受檢者的性別、體質(zhì)量、年齡等一般資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)同意。

1.2 病例選擇

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) (1)試驗(yàn)組符合《支氣管哮喘防治指南》[7]中支氣管哮喘相關(guān)診斷與分期標(biāo)準(zhǔn)；(2)上感組經(jīng)臨床證實(shí)為非MP感染、非哮喘的上呼吸道感染患兒；(3)健康組為健康體檢兒童；(4)三組近期均未應(yīng)用免疫抑制劑、糖皮質(zhì)激素治療，家屬知曉本研究方案，自愿簽訂知情同意書。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) (1)合并肺結(jié)核、呼吸衰竭、間質(zhì)性肺炎、呼吸道畸形、支氣管異物等其他呼吸系統(tǒng)疾病者；(2)合并心、肺、肝、腎等臟器功能嚴(yán)重異常者；(3)合并免疫、血液系統(tǒng)疾病者；(4)合并認(rèn)知、精神功能嚴(yán)重障礙者；(5)合并惡性腫瘤、營養(yǎng)不良、腦血管疾病者；(6)臨床資料不全者。

1.3 方法 (1)標(biāo)本采集：采集受檢兒童5 mL清晨空腹靜脈血樣，以離心機(jī)施行離心處理10 min，離心速度為3 500 r/min，離心半徑為8 cm，取上層血清，低溫保存待檢，剔除溶血樣本。(2)檢測方法：以被動(dòng)冷凝集法測定MP水平，檢測試劑盒購于日本富士瑞必歐株氏會(huì)社，致敏離子和血清最終稀釋倍數(shù)超過1：40產(chǎn)生凝集判定為陽性；以雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-4(IL-4)、白細(xì)胞介素-17(IL-17)水平，試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司；以免疫比濁法測定免疫球蛋白E(IgE)水平，試劑盒購于寧波美康生物有限公司，相關(guān)操作均嚴(yán)格按儀器及試劑盒說明書由醫(yī)院專業(yè)人員完成。

1.4 觀察指標(biāo) (1)三組受檢者的MP表達(dá)(滴度、陽性率)情況；(2)試驗(yàn)組不同病程(急性期、緩解期)患兒的MP表達(dá)(滴度、陽性率)情況；(3)試驗(yàn)組MP陽性、陰性患兒的血清IgE、細(xì)胞因子表達(dá)情況；(4)試驗(yàn)組不同MP程度(MP感染重癥、MP感染輕癥)患兒的血清IgE、細(xì)胞因子表達(dá)情況。

1.5 MP感染程度判定標(biāo)準(zhǔn) MP檢測陽性，肺部體征較嚴(yán)重，熱程≥15 d，肺部并發(fā)癥≥2個(gè)為MP感染重癥；MP檢測陽性，肺部體征較輕，熱程＜15 d，肺部并發(fā)癥＜2個(gè)為MP感染輕癥[8]。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，兩組均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，多組均數(shù)比較采用單因素方差分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，采用Logistic回歸分析篩選出支氣管哮喘發(fā)病的影響因素，采用Spearman相關(guān)性分析法分析支氣管哮喘患兒MP表達(dá)與IgE、細(xì)胞因子水平之間的關(guān)聯(lián)性，均以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組受檢者的MP表達(dá)水平比較 試驗(yàn)組患兒的MP滴度及陽性率明顯高于上感組和健康組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 三組受檢者的MP表達(dá)水平比較

2.2 支氣管哮喘發(fā)病的影響因素 以是否發(fā)生支氣管哮喘為因變量，將年齡、性別與有無MP感染作為自變量實(shí)施Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，MP感染為支氣管哮喘發(fā)病的重要危險(xiǎn)因素(P＜0.05)，見表2。

表2 支氣管哮喘發(fā)病有關(guān)影響因素的多元回歸分析結(jié)果

2.3 試驗(yàn)組不同病程患兒MP表達(dá)水平比較 試驗(yàn)組急性期患兒MP滴度及陽性率明顯高于緩解期患兒，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表3。

表3 試驗(yàn)組不同病程患兒MP表達(dá)水痘比較

2.4 試驗(yàn)組MP陽性與陰性患兒血清IgE、細(xì)胞因子表達(dá)水平比較 試驗(yàn)組MP陽性患兒血清IgE、TNF-α、IL-4、IL-17水平明顯高于陰性患兒，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表4。

表4 試驗(yàn)組MP陽性與陰性患兒血清IgE、細(xì)胞因子表達(dá)水平比較(±s)

表4 試驗(yàn)組MP陽性與陰性患兒血清IgE、細(xì)胞因子表達(dá)水平比較(±s)

項(xiàng)目 例數(shù)IgE(U/mL)細(xì)胞因子MP陽性MP陰性t值P值89 111 651.71±129.67 437.96±116.48 12.262＜0.05 TNF-α (μg/L)36.72±6.39 22.85±4.12 18.563＜0.05 IL-4(pg/mL)237.18±39.84 115.47±26.73 25.763＜0.05 IL-17(ng/L)43.39±10.27 37.84±9.12 4.043＜0.05

2.5 試驗(yàn)組不同MP程度患兒血清IgE、細(xì)胞因子表達(dá)水平比較 試驗(yàn)組MP感染重癥患兒血清IgE、TNF-α、IL-4、IL-17水平明顯高于輕癥患兒，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表5。

表5 試驗(yàn)組不同MP程度患兒血清IgE、細(xì)胞因子表達(dá)水平比較(±s)

表5 試驗(yàn)組不同MP程度患兒血清IgE、細(xì)胞因子表達(dá)水平比較(±s)

程度 例數(shù)IgE(U/mL)細(xì)胞因子MP感染重癥MP感染輕癥t值P值38 51 853.60±146.24 501.28±102.41 13.369＜0.05 TNF-α (μg/L)48.42±7.40 28.00±5.82 14.573＜0.05 IL-4(pg/mL)296.53±44.16 192.96±36.28 12.136＜0.05 IL-17(ng/L)49.06±11.25 39.17±9.74 4.434＜0.05

2.6 MP表達(dá)與支氣管哮喘患兒IgE、細(xì)胞因子水平的關(guān)系 經(jīng)Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示，MP表達(dá)與支氣管哮喘患兒IgE、TNF-α、IL-4、IL-17水平呈顯著正相關(guān)(r=0.682、0.706、0.795、0.517，P＜0.05)。

3 討論

支氣管哮喘為一種氣道慢性炎癥性疾病，呼吸道上皮細(xì)胞、肥大細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞與其組分共同參與該病發(fā)生、進(jìn)展，可對(duì)患兒生命健康造成嚴(yán)重影響[9-10]。近年來，有研究報(bào)道，MP作為一種呼吸道病原體，在嬰幼兒群體中感染率有不斷增高趨勢，且與哮喘急性發(fā)作、預(yù)后等有關(guān)[11]。本研究發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)組MP滴度及陽性率高于上感組、健康組，且疾病處于急性期患兒MP滴度及陽性率高于緩解期患兒，回歸分析可知，MP感染為支氣管哮喘發(fā)病的重要危險(xiǎn)因素。表明MP感染與小兒支氣管哮喘發(fā)生、進(jìn)展密切相關(guān)，MP感染可能為引起該病重要危險(xiǎn)因素。相關(guān)研究指出，氣道炎癥反應(yīng)可因內(nèi)源性因素激活，亦可因病原體感染抑或變應(yīng)原刺激誘發(fā)[12]。而MP可作為感染源黏附于氣道上皮細(xì)胞，損害呼吸道黏膜上皮纖毛結(jié)構(gòu)和功能，促進(jìn)肥大細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等增殖及釋放炎癥因子，加劇呼吸道炎癥，且還可致使呼吸道平滑肌收縮，導(dǎo)致非膽堿能神經(jīng)功能產(chǎn)生障礙，加劇呼吸道高反應(yīng)性，進(jìn)而造成哮喘發(fā)病。刁敏等[13]也通過對(duì)照研究顯示，哮喘患兒MP感染陽性率可顯著增高。

有關(guān)研究報(bào)道，多種炎性細(xì)胞及炎性因子均會(huì)參與氣道炎癥，屬哮喘發(fā)作啟動(dòng)機(jī)制，且氣道高反應(yīng)性和自身免疫失調(diào)均會(huì)誘發(fā)哮喘[14]。TNF-α屬炎癥反應(yīng)過程出現(xiàn)最早的炎性介質(zhì)，可增加內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子表達(dá)，促進(jìn)血小板活化和炎性細(xì)胞浸潤，導(dǎo)致組織損傷，在哮喘發(fā)病中起著重要作用[15]；IL-4為一種可誘導(dǎo)體液免疫反應(yīng)的炎性介質(zhì)，可刺激人體分泌特異性IgE，誘導(dǎo)Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)，致使哮喘發(fā)病[16]；IL-17屬Th17所分泌的炎性介質(zhì)之一，能促進(jìn)中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞向氣道聚集，引發(fā)高反應(yīng)性氣道炎癥，促進(jìn)哮喘發(fā)病[17]；IgE為參與哮喘變態(tài)反應(yīng)重要抗體，于變應(yīng)原首次進(jìn)入到人體后，可生成特異性IgE，后者可同肥大細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等相結(jié)合，致使機(jī)體產(chǎn)生致敏狀態(tài)，當(dāng)相同變應(yīng)原再次刺激人體時(shí)，則會(huì)造成生理功能失調(diào)，誘發(fā)哮喘[18]?？梢娚鲜鲋笜?biāo)在哮喘發(fā)病中具有重要作用?；诖?，本研究進(jìn)一步觀察了對(duì)支氣管哮喘患兒IgE及細(xì)胞因子(TNF-α、IL-4、IL-17)的影響，發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)組MP陽性患兒血清IgE、TNF-α、IL-4、IL-17水平高于陰性患兒，MP感染重癥患兒高于輕癥患兒，且相關(guān)性分析可知，MP表達(dá)與支氣管哮喘患兒IgE、細(xì)胞因子水平呈正相關(guān)。表明MP表達(dá)與患兒IgE、細(xì)胞因子水平有關(guān)。顏海峰等[19]研究亦指出，MP感染哮喘患兒血清IgE、白細(xì)胞介素水平可顯著增高。MP感染后，體內(nèi)Th0細(xì)胞朝Th2分化增強(qiáng)，Th2功能提升，Th1功能降低，致使IL-4分泌量增多，且MP感染后，機(jī)體對(duì)外界抵抗力降低，可致使TNF-α、IL-17等于免疫應(yīng)答反應(yīng)過程中大量生成、釋放，此外，MP作為特異性抗原之一，可促使人體生成IgE，最終加劇炎癥反應(yīng)與免疫損傷，促使哮喘發(fā)生、進(jìn)展[20]。

綜上所述，MP感染與小兒支氣管哮喘發(fā)生、進(jìn)展密切相關(guān)，且其表達(dá)與患兒IgE、細(xì)胞因子水平有關(guān)，可能為造成氣道炎癥及免疫紊亂的重要原因，可為小兒支氣管哮喘預(yù)防及治療提供新思路。