王 麗

黑龍江省佳木斯市中心血站 154007

Rh血型系統(tǒng)屬紅細(xì)胞血型系統(tǒng)，具有極高多態(tài)性，其中，C、c、D、E、e這5種抗原在臨床上與輸血關(guān)系密切[1]。D抗原免疫原性較強(qiáng)，而RhD陰性者接觸過D抗原后產(chǎn)生抗體的概率也相對較高[2]。篩查RhD陰性者的不規(guī)則抗體種類與性質(zhì)及其產(chǎn)生率，對保障此群體接受輸血時的安全具有重要意義。基于此，本文分析RhD陰性獻(xiàn)血者不規(guī)則抗體的篩選與鑒定結(jié)果，旨在探討對此群體行不規(guī)則抗體篩選的價值。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2016年1月—2019年1月佳木斯地區(qū)血液中心內(nèi)經(jīng)間接抗人球蛋白試驗(yàn)確定為RhD陰性獻(xiàn)血者(無親緣關(guān)系)360例的血液標(biāo)本共360份。所有獻(xiàn)血者中，男196例，女164例；年齡19～55歲，平均年齡(37.07±15.55)歲。

1.2 試劑與儀器 (1)試劑：選用單克隆IgM抗D血型定型試劑(上海血液生物醫(yī)藥有限公司)作為初步篩查試劑；選用人源單克隆IgG抗D血型定型試劑(上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、單克隆IgG+IgM抗D血型定型試劑(加拿大Dominion公司；英國Millipore公司)確定血型；選用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型抗體篩查細(xì)胞與譜細(xì)胞(上海血液生物醫(yī)藥有限公司)行不規(guī)則抗體篩選與特異性鑒定；選用單克隆抗C、抗c、抗E、抗e試劑(上海血液生物醫(yī)藥有限公司)對含不規(guī)則抗體獻(xiàn)血者行Rh表型鑒定。(2)儀器：離心機(jī)(久保田-2200)、卡式離心機(jī)及孵育器(瑞士達(dá)亞美)。

1.3 方法 (1)確認(rèn)血型：選用單克隆IgM抗D試劑以微量鹽水法進(jìn)行初步篩查，選用3類抗D試劑對初步認(rèn)定為RhD陰性的標(biāo)本行間接抗人球蛋白試驗(yàn)，只要產(chǎn)生凝集反應(yīng)則確認(rèn)為陽性，均未產(chǎn)生凝集反應(yīng)則為陰性。(2)不規(guī)則抗體篩選與特異性鑒定：選用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型抗體篩查細(xì)胞以微柱凝膠法行不規(guī)則抗體篩選；選用譜細(xì)胞根據(jù)試管法，微柱凝膠法，對篩選結(jié)果為陽性的標(biāo)本行特異性鑒定。(3)Rh表型鑒定：選用50μl RhD陰性標(biāo)本的3%～5%紅細(xì)胞，分別加入50μl的單克隆抗C、抗c、抗E、抗e試劑，混勻后離心15s，立即觀察，有凝集反應(yīng)為陽性，無則為陰性。

2 結(jié)果

2.1 不規(guī)則抗體篩選與鑒定結(jié)果 360份RhD陰性血標(biāo)本中，15份(4.17%)含有不規(guī)則抗體，其中抗D抗體占比最高，為93.33%(14/15)。見表1。

表1 不規(guī)則抗體篩選與鑒定結(jié)果

2.2 含不規(guī)則抗體標(biāo)本的Rh表型分布狀況 15份含有不規(guī)則抗體中，Rh表型則為ccdee(53.33%)、Ccdee(33.33%)、CcdEe(6.67%)、CCdee(6.67%)；ABO血型系統(tǒng)的分布狀況為A型(26.67%)、B型(6.67%)、AB型(20.00%)、O型(46.67%)。見表2。

表2 含不規(guī)則抗體標(biāo)本的Rh表型分布狀況[n(%)]

3 討論

不規(guī)則抗體指血清中除抗A、抗B外的血型抗體，其在分布上具有復(fù)雜性、多態(tài)性等特點(diǎn)，不同人群不規(guī)則抗體的產(chǎn)生率與特異性分布也存在一定差異。目前，臨床上認(rèn)為Rh血型系統(tǒng)是紅細(xì)胞血型系統(tǒng)中最為復(fù)雜的一種，且重要程度僅亞于ABO系統(tǒng)[3]。Rh血型具有較高免疫原性，抗原抗體不匹配的輸血會導(dǎo)致自身免疫性溶血性貧血、溶血性輸血反應(yīng)或新生兒溶血病等病癥的發(fā)生[4]。此外，RhD陰性者的不規(guī)則抗體產(chǎn)生率較高，故對RhD陰性者行不規(guī)則抗體篩選與鑒定，對完善地區(qū)稀有血型資料庫與提升臨床輸血治療的安全性具有重要意義。

車進(jìn)等[5]學(xué)者對北京地區(qū)的RhD陰性獻(xiàn)血者行不規(guī)則抗體篩選，結(jié)果檢出不規(guī)則抗體3例(1.2%)。于金濤等[6]學(xué)者分析河北省血液中心的RhD陰性血標(biāo)本，結(jié)果顯示不規(guī)則抗體的檢出率為2.41%，以抗D抗體為主，Rh表型以ccdee、Ccdee為主。本文結(jié)果顯示，360份RhD陰性血標(biāo)本中，4.17%含有不規(guī)則抗體，且以抗D抗體為主，RhD陰性獻(xiàn)血者則主要分布于ABO血型系統(tǒng)的O型中，且表型以ccdee為主。與車進(jìn)等、于金濤等的研究結(jié)果相比，本文的不規(guī)則抗體檢出率偏高，且同樣以抗D抗體為主。Rh血型系統(tǒng)中，D抗原免疫原性最高，故抗D抗體也相對多見。RhD陰性者通常會因妊娠、輸血、不明原因的免疫作用而出現(xiàn)抗體。Rh陰性血的產(chǎn)婦懷有RhD陽性的胎兒時，若發(fā)生母體血液循環(huán)中進(jìn)入胎兒紅細(xì)胞的現(xiàn)象，母體免疫系統(tǒng)即會做出反應(yīng)，產(chǎn)生抗體以清除胎兒紅細(xì)胞D抗原[7]。臨床上，行反復(fù)輸血的患者可因外來Rh抗原刺激而出現(xiàn)抗體，下次輸血時則容易發(fā)生無法匹配到相合血液的現(xiàn)象，影響治療效果，甚至導(dǎo)致患者死亡[8]。因此，依靠本文數(shù)據(jù)可完善地區(qū)的稀有血型資料庫，有利于為存在Rh抗體的患者匹配相應(yīng)血型，且明確Rh陰性血者的Rh表型分布在ABO血型中的狀況，可指導(dǎo)醫(yī)護(hù)人員有計(jì)劃、有目的地選擇血液標(biāo)本進(jìn)行篩選，進(jìn)而大幅提高工作效率，縮短篩選耗時，為拯救危急患者爭取寶貴時間。

綜上所述，佳木斯地區(qū)RhD陰性獻(xiàn)血者的不規(guī)則抗體檢出率較高，且以抗D抗體為主，RhD陰性獻(xiàn)血者主要分布于ABO血型系統(tǒng)的O型中，表型以ccdee為主；此結(jié)果有利于完善該地區(qū)RhD陰性人群的血液資料庫，便于臨床匹配血型與進(jìn)行Rh同表型輸血，進(jìn)而提高治療效率與安全性。