黎俊君 丁 丹 盧 峻

湖北省十堰市動物疫病預防控制中心，湖北十堰442000

偽狂犬?。╬seudorabies，PR）是由偽狂犬病毒（pseudorabies virus，PRV）引起的一種急性高度接觸性傳染病，世界衛(wèi)生組織（OIE）將其列為B 類動物疫病，該病可感染豬、牛、羊、犬、貓、鼠等動物。豬是該病的天然宿主，也是主要傳染源。該病無季節(jié)性流行，以春冬兩季和產(chǎn)仔旺季多發(fā)。該病毒主要侵害神經(jīng)系統(tǒng)及生殖系統(tǒng)[1]，造成種豬繁殖障礙、仔豬大量死亡、育肥豬免疫抑制、生長停滯、飼養(yǎng)報酬率低、一旦感染難以清除。臨床上常見豬偽狂犬病病毒與圓環(huán)病毒或豬藍耳病病毒或豬瘟病毒等混合感染，病情趨向于復雜化，大大提高了發(fā)病率與死亡率，對養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失[2-3]。為了解湖北省十堰地區(qū)豬偽狂犬病的感染情況，2017-2019年在各縣市隨機采取血清，應用ELISA 方法進行豬偽狂犬病血清學調查，為制定正確的防控措施以及今后該地區(qū)偽狂犬病凈化提供依據(jù)，從而保證該地區(qū)養(yǎng)豬業(yè)健康穩(wěn)定發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 材 料

1）血清樣品。2017-2019年來自十堰市6 個縣市不同規(guī)模豬場不同批次送檢的無菌采集的豬血清741 份。

2）主要試劑。豬偽狂犬病毒gE 蛋白ELISA 抗體檢測試劑盒，購自武漢科前生物公司。

3）儀器與耗材。酶標儀（tecan F50），離心機，移液器等。

1.2 方 法

1）血清樣品制備。無菌采集豬前腔靜脈血液樣品3～5 mL，室溫靜置，析出血清，吸取上清于滅菌離心管內，編號，至于-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

2）待檢血清PRV 野毒抗體水平檢測。血清樣品的檢測嚴格按照ELISA 檢測試劑盒使用說明書進行操作，測定樣品OD630值，檢測結果根據(jù)試劑盒說明書進行判定。在試驗成立的情況下，計算S/N 值，S 值為樣品孔OD630值，N 為陰性對照平均OD630值。若S/N≤0.35，判定為PRV gE 抗體陽性；若0.35＜S/N 值≤0.4，樣品重測，結果相同，則判為PRV gE 抗體陽性；若S/N＞0.4，樣品為PRV gE 抗體陰性。

2 結果與分析

2.1 十堰地區(qū)2017-2019年PRV gE 抗體檢測結果

十堰地區(qū)2017-2019年部分豬群采樣檢測發(fā)現(xiàn)，PRV gE 蛋白抗體陽性率僅為4.72%，且2017-2018年抗體陽性率逐年降低，2017-2019年十堰地區(qū)受檢樣品PRV gE 蛋白抗體陽性率依次為8.57%、5.17%、0.83%，呈逐年降低趨勢（表1）。說明十堰地區(qū)近年來豬偽狂犬病的防控工作具有一定成效，且十堰地屬山區(qū)，自然屏障較好，養(yǎng)殖規(guī)模不大，有利于PRV 的防控。

通過PRV 野毒陽性區(qū)域分析可以看出，PRV野毒陽性區(qū)域多集中于北三縣（鄖陽區(qū)、鄖西縣、丹江口市）、北三縣相較于南三縣來說地域相對開闊、飼養(yǎng)數(shù)量相對密集、交通便利，PRV 傳播更快更廣。

2.2 規(guī)模化養(yǎng)殖場與散養(yǎng)戶豬群PRV gE 蛋白抗體檢測結果

散養(yǎng)戶檢測PRV gE 蛋白抗體陽性率為10.29%，規(guī)模場檢測樣品PRV gE 蛋白抗體檢出陽性率為3.47%（表2），散養(yǎng)戶的陽性檢出率明顯高于規(guī)模場。這與散養(yǎng)戶的飼養(yǎng)管理水平低、不注重免疫或盲目免疫而導致免疫水平較低、免疫不具備保護力、生物安全控制方面較為薄弱有極大關系。農戶生豬飼養(yǎng)周期普遍較長，增加了豬只感染PRV 的機會，也是散養(yǎng)戶PRV 野毒陽性率較高的原因之一。

2.3 不同日齡豬PRV gE 蛋白抗體檢測結果

不同日齡豬的PRV gE 抗體陽性率也有差異。仔豬的陽性率與種豬的陽性率較高，分別為9.88%、8.57%，陽性率最小的是育肥豬，僅為2%（表3）。說明種豬帶毒現(xiàn)象普遍，雖為隱性感染，但卻是豬場PRV 野毒感染的源頭，是導致母豬繁殖障礙的主要原因之一，需要引起重視。仔豬帶毒率較高多是因為種豬的垂直傳播造成，因此做好種豬凈化、注意產(chǎn)前母豬免疫、提高仔豬母源抗體、制定科學的仔豬免疫程序也是保護仔豬免受PRV 威脅的重要途徑。

3 結 論

由此次調查結果可知，十堰地區(qū)豬偽狂犬病防控形式嚴峻，特別是由于十堰地區(qū)地處山區(qū)，存在較好的天然疫病防護屏障，導致很多養(yǎng)殖場（戶）防疫意識不夠，免疫、消毒防疫、治療水平低下，發(fā)現(xiàn)陽性豬只未實行有效的清除計劃，感染豬只容易引起豬的免疫抑制，造成感染豬只繼發(fā)感染嚴重。一些養(yǎng)殖場雖然實施了免疫，但由于近年來PR 病毒株出現(xiàn)變異，全國許多豬場發(fā)生豬偽狂犬疫情與PR 病毒株出現(xiàn)變異有關。變異流行毒株增多，容易造成免疫保護失敗、免疫不具備保護力的情況[4-5]。

因此，結合調查結果和全國該病的防控形勢，我們應該加強偽狂犬病的防控。①提高防控意識。采取綜合防控，對豬場進行定期監(jiān)測，淘汰PRV gE抗體陽性豬；引種嚴格檢疫，引進PRV 陰性豬；對不同地區(qū)不同豬場制定科學的免疫程序。②加強管理。養(yǎng)殖場要加強封閉管理，嚴格控制人員來往，嚴格控制其它動物進入豬場，并定期做好消毒工作及血清學監(jiān)測等工作，保證生物安全措施的落實。散養(yǎng)戶不引入來歷不明的豬只，做好防疫消毒、生物安全、飼養(yǎng)管理等方面的工作。③推進凈化工作。免疫是手段，凈化才是徹底解決之道。該病已列入我國中長期動物疫病凈化方案，畜牧獸醫(yī)部門應根據(jù)十堰市豬偽狂犬病特點，有計劃地開展疫病凈化，鼓勵有條件的養(yǎng)殖場開展疫病凈化工作并推廣成功經(jīng)驗，逐步在全市控制和凈化豬偽狂犬病。

表1 2017-2019年十堰地區(qū)豬偽狂犬病毒gE 蛋白抗體陽性檢測結果

表2 規(guī)模化養(yǎng)殖場與散養(yǎng)戶豬偽狂犬病毒gE 蛋白抗體陽性檢測結果

表3 不同日齡豬偽狂犬病毒gE 蛋白抗體陽性檢測結果

十堰地區(qū)近年來豬偽狂犬病防控工作有一定成效，PRV 野毒陽性率不高，但還應該繼續(xù)加強豬偽狂犬病的防控工作，以達到最終凈化的目的，防止豬偽狂犬病造成嚴重經(jīng)濟損失。