周雪濤，張鴻，楊楊，李慧敏，張東升#

石家莊市第三醫(yī)院1心胸外科，3病理科，石家莊050000 2正定縣人民醫(yī)院急診科，石家莊050000

世界衛(wèi)生組織發(fā)布，肺癌是引發(fā)世界人群死亡的主要癌癥之一，在男女發(fā)病、死亡的所有惡性腫瘤中均居前三位，所以及時預防診治肺癌是當前醫(yī)藥研究人員肩負的重要使命之一[1]。目前細針吸取細胞學（fine needle aspiration cytology，FNAC）檢查法是臨床進行肺癌診斷的重要方法[2‐3]。然而，在病灶部位實施FNAC后會存在腫瘤細胞沿針道轉移的風險，因此尋求有效預防并抑制該現象的治療方案是目前亟待解決的問題[4]。本研究經皮肺穿刺肺癌兔并給予化療藥物，觀察對腫瘤細胞沿針道轉移率的影響，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

62只家兔（河北醫(yī)科大學中心實驗室提供），每只月齡4個月，雌雄各半，體重2.0～2.5 kg，平均2.28 kg；VX2瘤株由河北醫(yī)科大學中心實驗室提供；雙套管切割活檢針（18G‐Gallini切割活檢針）購自巴德醫(yī)療科技（上海）有限公司。

1.2 研究方法

1.2.1 VX 2瘤株的制備[5]在無菌超凈臺取出VX2并剔除壞死組織、結締組織、肌腱、肌肉及血管，且去除腫瘤組織邊緣生長旺盛的魚肉樣組織，用生理鹽水沖洗3次，取腫瘤組織（小于1 mm3），浸泡于4℃的生理鹽水中備用。

1.2.2 建立兔VX 2肺癌模型[6]給予家兔耳緣靜脈注射利多卡因（2%），麻醉后將其仰臥固定，右前胸壁備皮，常規(guī)消毒，取穿刺針，于家兔肩胛骨前緣及右胸4～5肋間交點處刺入肺組織，固定針鞘，推入平頭針芯內瘤塊后拔出針，用無菌紗布按壓穿刺位置30 s，術后常規(guī)注射青霉素（每天20萬單位），連續(xù)給藥3天，預防感染。肺癌兔模型建立成功率為70.97%。

1.2.3 模型成功標準使用計算機斷層掃描（CT）技術觀察肺部腫瘤生長狀況，若腫瘤長至直徑1 cm，且無轉移現象即為成功。

1.2.4 實驗方法將家兔按體重分層分為治療組與對照組，每組均雌雄各半，治療組共32只，對照組30只，所有患兔在CT引導下成功進行FNAC 5次，對照組穿刺后保留套管拔出針芯，給予安慰劑并撤出套管。治療組在進行穿刺后保留套管拔出針芯，邊給予化療藥物順鉑（2 mg）和絲裂霉素（0.2 mg）邊撤出套管。治療組與對照組患兔術后均進行常規(guī)注射青霉素（每天20萬單位），連續(xù)給藥3天，預防感染。所有患兔飼養(yǎng)2周，解剖臟層胸膜、壁層胸膜及胸壁組織進行病理細胞學檢查，通過光學顯微鏡觀察腫瘤細胞的轉移情況，若腫瘤細胞沿著針道方向轉移，即為陽性轉移。實驗過程中排除動物穿刺死亡及患有惡性胸腔積液患兔，最終治療組剩余24只，對照組剩余20只，符合實驗要求，可用于結果統(tǒng)計。

1.3 統(tǒng)計學分析

采用SPSS 20.0軟件進行數據統(tǒng)計，計數資料以例數及率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 肺癌兔模型 5次穿刺后不同部位腫瘤細胞轉移陽性率的比較

治療組中，3個不同部位5次穿刺均未發(fā)現陽性轉移的發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；對照組中，臟層胸膜5次穿刺均未發(fā)現陽性轉移的發(fā)生率分別低于壁層胸膜和胸壁組織，差異均有統(tǒng)計學意義（χ2=4.286、6.144，P=0.038、0.013）；治療組臟層胸膜5次穿刺均未發(fā)現陽性轉移的發(fā)生率高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=4.207，P=0.040）。（表1）

表1 兩組肺癌兔模型 5次穿刺后不同部位腫瘤細胞轉移陽性率的比較[ n（%）]

2.2 穿刺后肺癌兔模型不同部位腫瘤細胞轉移陽性率的比較

肺癌兔經5次穿刺后，治療組臟層胸膜腫瘤細胞轉移陽性率明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；兩組壁層胸膜及胸壁組織的腫瘤細胞轉移陽性率比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。（表2）

表2 穿刺后兩組肺癌兔模型不同部位腫瘤細胞轉移陽性率的比較[ n（%）]

3 討論

FNAC是利用細針穿刺病灶，通過吸取少許的細胞成分進行涂片檢查的細胞學診斷方法。FNAC在國外已經發(fā)展了80多年，在中國也有近60年的歷史。近年來，隨著CT、B超等先進檢查定位手段的引進以及針吸活檢設備的進步，應用經皮肺FNAC檢查診斷惡性腫瘤已在臨床得到廣泛開展[7‐8]。它具有簡便、安全、準確、迅速和經濟等特點，已成為各國普遍接受的診斷方法。但是經皮肺FNAC檢查存在一個嚴重的弊端，即會引起腫瘤細胞的轉移擴散[9‐10]。為了解決這個問題，本研究設計了上述動物實驗，以探究FNAC后使用化療藥物是否可降低腫瘤細胞沿針道轉移陽性率。

肺癌兔模型不同部位腫瘤細胞轉移陽性率比較結果顯示，治療組中，3個不同部位5次穿刺均未發(fā)現陽性轉移的發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；對照組中，臟層胸膜5次穿刺均未發(fā)現陽性轉移的發(fā)生率分別低于壁層胸膜和胸壁組織，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；治療組臟層胸膜5次穿刺均未發(fā)現陽性轉移的發(fā)生率高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。兩組所有肺癌兔模型5次穿刺后不同部位腫瘤細胞轉移陽性率比較結果顯示，治療組臟層胸膜腫瘤細胞轉移陽性率明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；兩組壁層胸膜及胸壁組織的腫瘤細胞轉移陽性率比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

由實驗結論可知，在給肺癌兔進行經皮肺FNAC檢查后，無論是治療組還是對照組，臟層胸膜腫瘤細胞轉移陽性率均最高，而壁層胸膜和胸壁組織腫瘤細胞轉移陽性率較低，這說明隨著穿刺細針所經過的組織距離病灶漸遠，穿刺針上所攜帶的腫瘤細胞定植的概率就越低，腫瘤細胞沿針道轉移擴散的概率越低；而壁層胸膜和胸壁組織的腫瘤細胞陽性轉移率沒有明顯差異，這可能是由于攜帶腫瘤細胞的穿刺針在經過壁層胸膜后，穿刺針上殘余的腫瘤細胞被血液循環(huán)或者淋巴組織等免疫系統(tǒng)識別后殺滅，抑制了腫瘤細胞的轉移。另外，治療組臟層胸膜腫瘤細胞陽性轉移率明顯低于對照組，說明皮肺穿刺后使用化療藥物可有效殺死針道的腫瘤細胞，降低陽性轉移率。綜上所述，經皮肺穿刺后，局部使用化療藥物能夠有效降低腫瘤細胞沿針道轉移陽性率。因此，建議今后在臨床上在對腫瘤患者進行FNAC前，應采取有效的預防措施，術后應積極采取化療方法，以此降低腫瘤細胞轉移陽性率。