陳達(dá)富，李景松，楊月星，郭 敏

臺(tái)山市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 臺(tái)山 529200

地中海貧血是一種臨床常見(jiàn)貧血疾病，主要是由珠蛋白基因表達(dá)障礙，引起肽鏈合成完全抑制或受限的一種顯性遺傳性溶血性疾病，具有發(fā)病率高、分布范圍廣泛、危害嚴(yán)重等特點(diǎn)，逐漸受到臨床高度重視［1-2］。孕婦帶有地貧基因容易遺傳到下一代，如果夫婦雙方均有地貧生出重度地貧的幾率會(huì)大大增加。基因診斷是目前臨床確診地中海貧血的主要手段，但由于耗費(fèi)高、時(shí)間長(zhǎng)，無(wú)法在基層醫(yī)院廣泛推廣開來(lái)［3-4］。血紅蛋白電泳是目前臨床診斷地中海貧血的常用方法，兩種方法單一檢測(cè)的檢出率較低，基于以上背景，本文進(jìn)一步探究地中海貧血診斷中地中海貧血基因+血紅蛋白電泳的應(yīng)用價(jià)值，具體如下。

1 資料與方法

1.1 基本資料

2018年1月—2019年10月為研究時(shí)段，醫(yī)院倫理委員會(huì)已批準(zhǔn)本項(xiàng)研究，納入病例是臺(tái)山市人民醫(yī)院收治的1 758例孕婦地中海貧血患者作為實(shí)驗(yàn)組，以及同期門診體檢的1 758例健康女性作為對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組：年齡在22～43歲，年齡均值為（34.52±3.41）歲；BMI（體質(zhì)量指數(shù)）是20～26 kg/m2，BMI均值為（23.16±1.04）kg/m2。對(duì)照組：年齡在23～43歲，年齡均值為（34.49±3.39）歲；BMI是21～26 kg/m2，BMI均值為（23.18±1.02）kg/m2。兩組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡在18周歲以上；（2）生命體征穩(wěn)定、精神正常；（3）無(wú)器質(zhì)性病變；（4）患者、家屬均已簽署與本項(xiàng)研究有關(guān)的知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）未開展研究前進(jìn)行補(bǔ)血治療者；（2）合并惡性腫瘤者；（3）存在酒精、藥物濫用史者；（4）合并血液、內(nèi)分泌、免疫系統(tǒng)疾病者；（5）合并心力衰竭、呼吸衰竭者；（6）存在認(rèn)知、精神、心理障礙者；（7）合并感染性、傳染性疾病者、遺傳性球形細(xì)胞增多癥者。

1.2 方法

地中海貧血基因：抽取所有患者2～5 ml空腹靜脈血，以EDTA-Na2抗凝后混勻后送檢。以PCR擴(kuò)增儀（型號(hào)：ABI3100）提取血液樣本DNA，由江門市婦幼保健院完成檢測(cè)。血紅蛋白電泳：抽取所有患者2～5ml空腹靜脈血，以EDTA-Na2抗凝后混勻，以海倫娜V8血紅蛋白電泳儀檢測(cè)HbF、HbA2、HbA，試劑均為配套試劑，操作嚴(yán)格按操作規(guī)程完成檢測(cè)。

1.3 觀察指標(biāo)與判定標(biāo)準(zhǔn)

對(duì)比實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組血紅蛋白電泳結(jié)果，對(duì)比地中海貧血基因、血紅蛋白電泳單獨(dú)檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)對(duì)α型地中海貧血以及β型地中海貧血檢出率。HbF正常參考值是0%～10%，HbA2正常參考值是2.0%～3.5%，HbA正常參考值是97%～98%［5-6］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 25.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用例數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)比實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組血紅蛋白電泳結(jié)果

實(shí)驗(yàn)組1 758例患者中，疑似802例α型地中海貧血，占45.62%（802/1758）；疑似956例β型地中海貧血，占54.38%（956/1758）。α型地中海貧血患者HbA2明顯低于對(duì)照組，對(duì)照組明顯低于β型地中海貧血患者（P＞0.05）。對(duì)照組患者HbF明顯低于a型地中海貧血患者，α型地中海貧血患者HbF明顯低于β型地中海貧血患者（P＞0.05）。β型地中海貧血患者HbA明顯低于α型地中海貧血患者，α型地中海貧血患者患者HbA明顯低于對(duì)照組（P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1 對(duì)比實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組血紅蛋白電泳結(jié)果（±s） %

表1 對(duì)比實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組血紅蛋白電泳結(jié)果（±s） %

1.32±0.251.45±0.26 α型地中海貧血（n=802）β型地中海貧血（n=956）94.38±3.66實(shí)驗(yàn)組（n=1 758）5.65±0.69 5.19±0.41 92.52±1.62對(duì)照組（n=1 758）0.92±0.05 2.58±0.16 97.85±2.46

2.2 對(duì)比地中海貧血基因、血紅蛋白電泳單獨(dú)檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)檢出率

地中海貧血基因、血紅蛋白電泳聯(lián)合檢測(cè)檢出率明顯高于單獨(dú)檢測(cè)（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 對(duì)比地中海貧血基因、血紅蛋白電泳單獨(dú)檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)檢出率 例（%）

3 討論

地中海貧血主要是由于血紅蛋白基因突變所致，具體表現(xiàn)為血紅蛋白表達(dá)較少或紅細(xì)胞數(shù)目減少［7］。血紅蛋白在人體生命活動(dòng)中具有重要作用，可以向機(jī)體各個(gè)組織、臟器輸送氧氣，如果血紅蛋白缺乏，則機(jī)體很難維持正常的生命活動(dòng)，正常工作以及生活等均造成了不良影響［8-9］。地中海貧血的發(fā)病率具有一定的地域性，南方的發(fā)生率明顯高于北方，而α型的發(fā)生率明顯高于β型［10］。目前，我國(guó)對(duì)于地中海貧血的孕婦尚無(wú)特效的治療方法，每年都會(huì)有大量的重癥地中海貧血新生兒出生，給社會(huì)以及家庭帶來(lái)沉重負(fù)擔(dān)［11］。因此加強(qiáng)產(chǎn)前篩查，及早檢出地中海貧血，及早進(jìn)行對(duì)癥治療，對(duì)于提高優(yōu)生優(yōu)育質(zhì)量具有重要意義。

孕婦地中海貧血患者早期臨床癥狀不典型，極易被患者忽視，如果沒(méi)進(jìn)行產(chǎn)前檢查，容易生出地貧小孩，對(duì)自身以及胎兒生命安全均構(gòu)成了一定威脅［12-13］。血紅蛋白電泳試驗(yàn)檢測(cè)，α型貧血患者HbA2以及HbA明顯較低，但HbF卻明顯較高，而β型貧血患者HbA2以及HbF相對(duì)較高，HbA相對(duì)較低［14］。血紅蛋白電泳試驗(yàn)可以對(duì)機(jī)體血紅蛋白表達(dá)情況做出準(zhǔn)確的評(píng)估，具有特異性高、操作方便、迅速等優(yōu)點(diǎn)，但是容易受到操作者水平、檢測(cè)時(shí)間、標(biāo)本處理等因素的影響［15］。而地中海貧血基因檢測(cè)是目前臨床診斷該病的金標(biāo)準(zhǔn)，隨著我國(guó)PCR技術(shù)的不斷發(fā)展，地中海貧血基因可準(zhǔn)確的檢測(cè)出基因的缺失和突變，具有較高的應(yīng)用價(jià)值的，但是地中海貧血基因檢測(cè)成本高、操作復(fù)雜，無(wú)法在臨床中廣泛推廣開來(lái)。從本研究結(jié)果可知：地中海貧血基因、血紅蛋白電泳聯(lián)合檢測(cè)檢出率明顯高于單獨(dú)檢測(cè)。提示地中海貧血基因、血紅蛋白電泳聯(lián)合檢測(cè)，在孕婦地中海貧血診斷中檢出率較高，對(duì)產(chǎn)前篩查地中海貧血減少地貧兒的出生有重要意義。

綜上所述，孕婦地中海貧血診斷中采納地中海貧血基因、血紅蛋白電泳聯(lián)合檢測(cè)，可顯著提高檢出率，為產(chǎn)前篩查地中海貧血減少地貧兒提供一定的科學(xué)依據(jù)，值得將該檢測(cè)方法進(jìn)一步推廣。