牟沿華

近年來(lái)，免疫檢測(cè)法因其靈敏度高、檢測(cè)時(shí)間短而受到業(yè)內(nèi)人士的青睞。其中，膠體金免疫層析法是應(yīng)用越來(lái)越廣泛的一種。在糧食食品檢測(cè)中，重金屬鎘是農(nóng)藥殘留檢測(cè)常見(jiàn)的一類物質(zhì)。如何采取科學(xué)高效的檢測(cè)方法是糧食食品檢測(cè)部門及檢測(cè)人員關(guān)注和研究的重要內(nèi)容。隨著化學(xué)技術(shù)和設(shè)備的日益更新，免疫學(xué)檢測(cè)法被應(yīng)用于糧食農(nóng)藥殘留檢測(cè)工作中，有效解決了傳統(tǒng)檢測(cè)方法的弊端。在免疫學(xué)檢測(cè)法的應(yīng)用中，膠體金免疫層析法十分適用。本文進(jìn)行了該方法的實(shí)驗(yàn)分析和論證，給業(yè)內(nèi)人士一些思路和啟發(fā)。

實(shí)驗(yàn)材料與方法

實(shí)驗(yàn)儀器：干式加熱器、計(jì)時(shí)器、原子吸收光譜儀、便攜式試紙條讀數(shù)儀、離心機(jī)、渦旋混合器、篩網(wǎng)（20目）、分析天平

實(shí)驗(yàn)試劑：氯化鈉、乙酸乙酯、硫酸、硝酸、EDTA、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、純水

實(shí)驗(yàn)方法：對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理。取待測(cè)糧食樣品質(zhì)量2.0g，然后將樣品過(guò)篩（20目），轉(zhuǎn)移至干凈的離心管中并向其中加入0.5moL/L的硝酸溶液6.0mL，加入4.0mL乙酸乙酯，振蕩混勻，4000r/min離心5min。取上清液向其中加入1.0moL/L的硫酸2.0mL，4000r/min離心3min。離心后取下層液體500μL，向其中加入0.5moL/L的PBS緩沖液2.0mL，振蕩混勻后取出250μL，向其中加入0.5moL/L的EDTA溶液200μL，振蕩混勻，備用。

糧食樣品的鎘陰性樣本由石墨爐原子吸收光譜法獲得，本實(shí)驗(yàn)中加標(biāo)點(diǎn)設(shè)定為50.0μg/kg、200μg/kg、400μg/kg。平行實(shí)驗(yàn)3組。根據(jù)便攜式試紙條讀數(shù)儀的使用說(shuō)明，建立檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線。

方法檢出限測(cè)定。對(duì)糧食樣品進(jìn)行檢測(cè)，平行實(shí)驗(yàn)3組，以空白組加上3倍的標(biāo)準(zhǔn)差作為檢測(cè)樣品的最低檢出限。

回收率測(cè)定。對(duì)糧食樣品進(jìn)行檢測(cè)，平行實(shí)驗(yàn)3組，將檢測(cè)濃度和理論濃度對(duì)比，計(jì)算回收率。

重復(fù)性測(cè)定。分別取3個(gè)批次的試紙條對(duì)糧食樣品進(jìn)行檢測(cè)，平行實(shí)驗(yàn)3組，計(jì)算糧食樣品的重復(fù)性和變異系數(shù)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)糧食樣品中空白組的檢測(cè)平均值加上3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差計(jì)算，得到樣品中的重金屬鎘的最低檢出限為10.35μg/kg。樣品回收率為86.1%～103.9%。選取3個(gè)不同批次的試紙條進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)重復(fù)率在3.3%～8.9%之間。

由檢測(cè)得到的數(shù)據(jù)可知，膠體金免疫層析試紙條檢測(cè)對(duì)糧食樣品中的重金屬鎘具有較強(qiáng)的識(shí)別能力，檢測(cè)特異性良好，檢測(cè)準(zhǔn)確率較高，檢測(cè)回收率和重復(fù)率符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。本實(shí)驗(yàn)方法可供業(yè)內(nèi)人士參考和借鑒。