齊正

摘 要：目的 分析下調(diào)miR-27a表達對三陰乳腺癌（TNBC）細胞增殖、遷移和侵襲的影響。方法 選取我院自2018年4月～2020年4月收治的85例三陰乳腺癌患者，采用實時熒光定量PCR法對患者癌組織miR-27a表達進行分析，并分析該表達與患者臨床特征之間的關(guān)系。結(jié)果 CCK-8檢測結(jié)果，在接種后3、4和5 d，miR-27a inhibitor組細胞增殖活性較NC組明顯降低（P<0.05）;Transwell 遷移實驗結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染miR-27a 抑制物 48 h 后穿膜細胞數(shù)明顯少于NC 組（P<0.05），而 NC 組 與 control 組相比穿膜細胞數(shù)無明顯差異。結(jié)論 miR-27a在TNBC組織中表達升高，將miR-27a表達下調(diào)可有效抑制TNBC細胞中MDA-MB-453的增值、遷移與侵襲能力，對控制患者病情具有極為重要的作用。

關(guān)鍵詞：miR-27a 三陰乳腺癌 細胞增殖 細胞遷移 細胞侵襲

中圖分類號：R737.9文獻標識碼：A文章編號：1003-9082（2020）06-0-01

三陰乳腺癌（triple-negative breast cancer，TNBC）是指孕激素受體（（progesterone receptor，PR）與人類表皮生長因子受體2（human epidermal growth factor receptor-2，HER2）表達為陰性的乳腺癌，在所有乳腺癌患者中占約15%～25%，且具有特殊生物表達及臨床病理特征的疾病。與非三陰乳腺癌（non-triple-negative breast cancer，non-TNBC）相比，TNBC具有更高的復發(fā)率與轉(zhuǎn)移性，對患者的生存周期造成了極為顯著的影響[1]。因此，在對TNBC發(fā)生與發(fā)展的分子機制進行探討，尋找有效的治療靶點成為當前對乳腺癌研究中的重要課題。本此研究針對下調(diào)miR-27a表達對TNBC細胞增殖、遷移和侵襲的影響進行分析，現(xiàn)報道入下。

一、資料與方法

1. 一般資料

選取我院自2018年4月～2020年4月收治的85例三陰乳腺癌患者，年齡42～65歲，平均年齡（53.52±3.25）歲，所有患者均行病理學診斷為非特殊型浸潤性導管癌，且行免疫組化學法染色ER、PR、HER2均為陰性。同時，根據(jù)行熒光測定量PCR結(jié)果，miR-27a表達與癌旁組織對比升高大于50%則為miR-27a高表達組，而miR-27a表達與癌旁組織對比不升高過升高<50%則為miR-27a低表達組。所有患者術(shù)前均接受放化療。

2. 方法

TNBC細胞MDA-MB-453采用RPMI-1640培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，而MCF-10A細胞則采用DMEM高糖培養(yǎng)基培養(yǎng)。在所有培養(yǎng)基中均加入10%胎牛血清、100U/L請每組與100U/L鏈霉素，培養(yǎng)條件為37℃、95%飽和溫濕度以及5%CO2。并根據(jù)細胞生長狀態(tài)2～3d進行1次換液。細胞生長至70%融合時，0.25%胰酶細胞消化液消化穿戴，取第3代對數(shù)生長期細胞進行后續(xù)試驗。

細胞轉(zhuǎn)染：取對數(shù)生長期細胞接種于6孔板，使用Lipofectamine 3000轉(zhuǎn)染試劑，參考說明書分別向MDA-MB-453細胞轉(zhuǎn)染miR-27a抑制物（miR-27a inhibitor組）和miR-27a陰性對照片段（NC 組），未轉(zhuǎn)染組作為空白對照（control組）。熒光顯微鏡下檢查轉(zhuǎn)染效率，轉(zhuǎn)染成功后培養(yǎng)板置37℃培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)，48h后收集細胞進行后續(xù)實驗。miR-27a抑制物序列為5-GCGGAACUUAGCCCACUGUGAA-3。

3.觀察指標

轉(zhuǎn)染miR-27a抑制物對MDA-MB-453細胞增殖的影響。

轉(zhuǎn)染miR-27a抑制物對MDA-MB-453細胞遷移和侵襲的影響。

4. 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 19.0 進行統(tǒng)計學分析，計數(shù)資料采用（%）和x2檢驗，計量資料采用（x±s）和t檢驗，以（P<0.05）具有統(tǒng)計學意義。

二、結(jié)果

1.轉(zhuǎn)染miR-27a抑制物對MDA-MB-453細胞增殖的影響

CCK-8 檢測結(jié)果，在接種后3、4和5 d，miR-27a inhibitor組細胞增殖活性較NC組明顯降低（P<0.05），表明下調(diào)MDA-MB-453細胞中miR27a表達可顯著抑制細胞增殖能力。

2.轉(zhuǎn)染miR-27a抑制物對MDA-MB-453細胞遷移和侵襲的影響。

Transwell遷移實驗結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染miR-27a抑制物48h后穿膜細胞數(shù)明顯少于NC組（P<0.05），而 NC 組 與 control 組相比穿膜細胞數(shù)無明顯差異;同樣， Transwell 侵襲實驗呈現(xiàn)出一致的結(jié)果。表明下調(diào) miR-27a表達可抑制TNBC細胞MDA-MB-453的遷移和侵襲能力。

三、討論

乳腺癌是女性患者中極為常見的惡性腫瘤之一，具有較高的發(fā)病率與死亡率。TNBC是臨床中特殊的乳腺癌，具有發(fā)病年齡低、家族史明顯、惡性程度高等特點，因此其發(fā)展機制受到了醫(yī)學界的重視[2]。

臨床研究中表示，miR-27a作為致癌因子已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)了在多種實體腫瘤中表達升高，并且與細胞的增值、遷移以及侵襲有著極為密切的關(guān)系。本此研究通過對此進行研究表明，下調(diào)MDA-MB-453細胞中miR27a表達可顯著抑制細胞增殖能力，并且下調(diào) miR-27a表達可抑制TNBC細胞MDA-MB-453的遷移和侵襲能力[3]。

綜上所述，通過對下調(diào)miR-27a表達對三陰乳腺癌細胞增殖、遷移和侵襲的影響進行研究，能準確地對患者病情進行評價，從而為患者后續(xù)治療提供可靠的參考依據(jù)。

參考文獻

[1]蔣雪梅，權(quán)毅.上調(diào)miRNA-27a-3p對乳腺癌MCF-7細胞增殖、侵襲和遷移能力的影響[J].鄭州大學學報：醫(yī)學版，2019，54，（02）：136—140.

[2]李繼勇，解榮，喻遠航等.微小RNA-26a對三陰性乳腺癌細胞遷移和侵襲的調(diào)控作用[J].中華實驗外科雜志，2019，36，（2）：245—247.

[3]王偉淋，王海波，張潤澤等.KIF3A基因沉默和過表達對人三陰性乳腺

癌細胞增殖、遷移及侵襲能力的影響[J].中華實驗外科雜志，2019，36，（12）：

2173—2175.