鄧海英，周升志，廖健慧，黃小紅，漆 招

（江西生物科技職業(yè)學院，江西 南昌330000）

豬瘟(CSF)是由豬瘟病毒引起豬的急性、熱性和高度接觸傳染病，是危害我國養(yǎng)豬業(yè)最嚴重的傳染病之一，國際獸醫(yī)局把它列為A 類傳染病。全世界有44 個國家和地區(qū)存在豬瘟，甚至在1993 年后一些已經宣布消滅豬瘟的國家，如荷蘭、比利時、德國、英國等，又先后有豬瘟的復發(fā)報道，目前該病主要在亞洲、歐洲、非洲、美洲的國家及地區(qū)流行。該病仍是危害我國養(yǎng)豬業(yè)的主要疾病。

近年來，我國豬瘟的流行形式和發(fā)病特點已經發(fā)生了很大的變化，尤其是妊娠母豬帶毒綜合征、仔豬胎盤垂直傳播及先天免疫耐受，還存在其他多種非典型的發(fā)病特點。免疫豬群在外界應激誘因、疫苗問題和其他病原混合感染作用下發(fā)生免疫失敗現(xiàn)象也很常見。

本文對江西省部分地區(qū)的豬瘟免疫保護情況進行實驗調查，期待為本省豬瘟疾病的控制和凈化起到一定的幫助作用。

1 調查方法

1.1 調查時間

調查采樣時間：2019 年3 月～11 月。

1.2 樣品來源

在南昌市、鷹潭市、贛州市和吉安市等地區(qū)，選擇有代表性的規(guī)模化豬場隨機采取靜脈血樣。

采集方法：每頭豬使用一個一次性注射器，大豬采用耳靜脈采血，仔豬采用前腔靜脈采血。每頭豬采血量5mL，樣品冷藏送檢，一周內測完。

2 儀器試劑

2.1 試劑材料

20 倍濃縮洗液、標準陽性血清、標準陰性血清、稀釋液、終止液、包被液、磷酸鹽緩沖液、封閉液、底物液A、底物液B、羊抗豬酶標二抗。

2.2 儀器器材

恒溫箱、微量移液器、一次性注射器、洗板機、豬瘟病毒抗體試劑盒 （美國 IDEXX：99-43220-K381）。

3 檢測方法

3.1 操作步驟

3.1.1 將血樣品室溫斜面靜置2h，自然凝固后5℃冷藏2.5h；然后4 000 r/min 離心10min，取上清液。

3.1.2 將20 倍濃縮洗液恢復至室溫25℃后，在血清稀釋板中按1:40 的體積比稀釋待檢血清、標準陽性血清、標準陰性血清。

3.1.3 分別將50μL 樣品稀釋液、陽性對照、陰性對照和被檢樣品加入每個檢測孔和對照孔中，然后將反應板中的溶液振蕩混勻。注意吸頭一次性使用不重復利用，以防止交叉污染。

3.1.4 將微量反應板用封條封閉后，25℃左右，過夜。

3.1.5 取出反應板，吸出反應孔中的液體，并用稀釋好的洗滌液和洗板機洗滌3 次，拍干反應板；再分別將100μL 的羊抗豬酶標二抗加入反應孔中，用封條封閉反應板，溫箱35℃溫育30min。

3.1.6 再次洗板3 次后，分別將100μL 的底物溶液加入反應孔中，避光，25℃放置10min；再分別加入100μL 的終止液終止反應。

3.1.7 樣品在450nm 處測定樣本以及對照的吸光度值。

3.2 計算方法

（被檢樣本的平均值ODTEST；陰性對照的平均值ODNEG，陽性對照的平均值ODPOS,其中ODPOS應大于0.50）。

抗體水平判斷標準：阻斷率≥40%血清樣品為合格（＋），阻斷率≤30%血清樣品為不合格（－），阻斷率在30%～40%間為可疑（±）。

4 豬瘟抗體水平檢測結果

檢測75 頭，63 頭陽性，10 頭陰性，2 頭可疑。陽性率86.67%、平均阻斷率78%。離散度38.25%,整體抗體水平較好（見表1～5）。

表1 3 周齡仔豬檢測結果

表2 1～4 胎母豬檢測結果

表3 5 胎以上母豬檢測結果

表4 6 周齡仔豬檢測結果

表5 9 周齡仔豬檢測結果

5 結果分析

5.1 豬瘟抗體水平分析

從2019 年調查來看，母豬群抗體都比較好，陽性率100%；平均阻斷率80%；三周齡15 頭，陰性3頭，陽性率80%，平均阻斷率57.93%，最高的阻斷率90%，最低的只有7%，說明母源抗體整體還很高；6 周齡仔豬15 頭，陽性7 頭，陰性8 頭，陽性率46.7%，平均阻斷率34.8%，處于臨界點，難以保護不受病毒侵襲，要重新考慮首免日齡；9 周齡仔豬15 頭，陽性率93.3%，一頭可疑，平均阻斷率55.86%，處于正常狀態(tài)（見圖1、表6）。

圖1 豬瘟抗體水平圖

表6 豬瘟抗體結果分析 頭

6 討論

通過對江西省部分地區(qū)的豬瘟免疫保護情況做出的實驗結果，發(fā)現(xiàn)豬瘟抗體整體水平良好，江西省規(guī)模化豬場的豬瘟預防免疫工作到位，母源抗體整體保護率高，有利于降低未斷奶仔豬的豬瘟發(fā)病率，提高仔豬的存活率；9 周仔豬的預防接種及時，抗體保護率正常；缺點是6 周齡仔豬免疫保護率處于臨界點，保護率不高，應需調整免疫接種時間或首免日齡，加強免疫。