彭玉潔,郭振波,李淑雅,王立升

(廣西大學(xué) 醫(yī)學(xué)院，廣西 南寧 530004)

在藥物、生物堿和潛在治療劑等材料中，與不同雜環(huán)縮合的吲哚衍生物具有較強(qiáng)的生理活性[1]。吲哚結(jié)構(gòu)大量存在于的海洋生物堿中，包括咔唑、四氫咔唑、單吲哚生物堿和雙吲哚生物堿[2]等，其衍生物通過作用于多個(gè)生物靶點(diǎn)如微管蛋白[3]、去乙?；竅4]和PIM[5]等大量應(yīng)用于臨床癌癥治療[6]。環(huán)戊并[b]吲哚也出現(xiàn)在大量生物堿中，包括結(jié)構(gòu)復(fù)雜的吲哚二萜類天然生物堿如Paxilline[7]，Penitrems[8]，Lolitrems[9]，Janthitrems[10]和Yuehchukene[11](Chart 1)。在生物堿中，含有環(huán)戊并[b]吲哚[12]單元的生物堿被發(fā)現(xiàn)具有抗菌[13]、抗炎、抗植入[14]、抗氧化、震顫[15]以及抗腫瘤活性[16-18]。而嘧啶作為堿性含氮雜環(huán)化合物，該類化合物及其衍生物具有較強(qiáng)的生物活性[19]，是治療領(lǐng)域中許多藥物分子的重要組成部分。其中2-氨基嘧啶結(jié)構(gòu)又是許多常見藥物的必要結(jié)構(gòu)，是最簡單的單取代嘧啶結(jié)構(gòu)，氨基基團(tuán)在C2位上，能夠有效改善抗癌活性[20]，也是臨床藥物的重要中間體[21]。有關(guān)環(huán)戊并[b]吲哚類化合物和嘧啶類化合物的合成研究備受關(guān)注，但對它們之間的串聯(lián)反應(yīng)及生物活性研究較少。

Chart 1

分析結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，4-甲基-1，4-二氫環(huán)戊二烯并[b]吲哚-3(2H)-酮是環(huán)戊并[b]吲哚類化合物的重要衍生物，可作為構(gòu)建廣泛的稠雜環(huán)化合物的重要前體，其衍生物具有重要藥理活性[22]。此外環(huán)戊并[b]吲哚類化合物和醛類化合物反應(yīng)得(E)-2-芳香基-1，4-二氫環(huán)戊二烯并[b]吲哚-3(2H)-酮與鹽酸羥胺或丙二氰反應(yīng)得到的雜環(huán)環(huán)戊并[b]吲哚衍生物對人子宮頸癌(Hela)細(xì)胞和人鼻咽癌(CNE-1)細(xì)胞具有較高的抑制活性[23]。根據(jù)藥物拼合原理，本研究以環(huán)戊并[b]吲哚為母環(huán)，以4-芳香基嘧啶-2-胺為嫁接物，探索10-甲基-2-氨基-4-R-嘧啶并[4,5-a]環(huán)戊并[b]吲哚類化合物的高效合成方法。

本文以3-吲哚丙酸為原料，經(jīng)環(huán)化、N-甲基化、Claisen-Schmidt縮合和環(huán)加成反應(yīng)合成了新型氨基嘧啶環(huán)戊并[b]吲哚衍生物(6a～6j,Scheme 1)，其結(jié)構(gòu)經(jīng)1H NMR、13C NMR及HR-MS(ESI)表征，采用MTT法篩選了它們對HepG-2(人肝癌細(xì)胞)、HeLa(人子宮頸癌)和CNE-1(人鼻咽癌細(xì)胞)的體外細(xì)胞活性。

Scheme 1

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

WRS-1B型數(shù)字熔點(diǎn)儀；Bruker AvanceIII HD 600 MHz型核磁共振儀(DMSO-d6或CDCl3為溶劑，TMS為內(nèi)標(biāo));UPLC I-CLASS-XE-VOG2-XSQTOF型超高效液相-質(zhì)譜聯(lián)用儀。

3-吲哚丙酸，多聚磷酸，氫化鈉，碘甲烷，芳香甲醛類，鹽酸胍均來自薩恩化學(xué)技術(shù)(上海)有限公司；人肝癌細(xì)胞(HepG-2)、人宮頸癌細(xì)胞(Hela)和人鼻咽癌細(xì)胞(CNE-1)購自美國細(xì)胞保存中心(ATCC)，并由本課題組傳代培養(yǎng)；其余所用試劑均為分析純。

1.2 合成

(1)2的合成

稱取3-吲哚丙酸5.2 g(27.5 mmol)，加入到多磷聚酸25 g(74.0mol)的甲苯(75 mL)溶液中，110 ℃下回流反應(yīng)4 h。冷卻至室溫，冰水淬滅反應(yīng)，抽濾，烘干得化合物2，收率60%;1H NMR(600 MHz,CDCl3)δ:12.47(dt,J=8.1 Hz,1.0 Hz,1H,Ar-H),12.19(dt,J=8.3 Hz,1.0 Hz,1H,Ar-H),12.10(ddd,J=8.3 Hz,6.9 Hz,1.2 Hz,1H,Ar-H),11.88(ddd,J=8.0 Hz,6.9 Hz,1.0 Hz,1H,Ar-H),7.85～7.74(m,2H,CH2-H),7.70～7.59(m,2H,CH2-H),7.26(p,J=1.9 Hz,1H,NH-H)。

(2)3的合成

稱取25.31 g(30 mmol) 溶解于150 mL DMF中，0 ℃下加入氫化鈉1.5 g(36 mmol)，繼續(xù)攪拌15 min，滴加2.25 mL(36 mmol)碘甲烷，反應(yīng)30 min(TLC監(jiān)測)。升溫至室溫，冰水淬滅反應(yīng)，用乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液濃縮，殘余物經(jīng)硅膠柱層析(洗脫劑:乙酸乙酯/石油醚=1/4,V/V)純化得白色絮狀固體3，收率87%;1H NMR(600 MHz,CDCl3)δ:7.71(dt,J=8.0 Hz,1.0 Hz,1H,Ar-H),7.49～7.41(m,1H,Ar-H),7.37(dd,J=8.5 Hz,1.0 Hz,1H,Ar-H),7.23～7.11(m,1H,Ar-H),3.91(s,3H,CH3-H),3.10～3.02(m,2H,CH2-H),3.01～2.95(m,2H,CH2-H)。

(3)5a～5j的合成(以5j為例)

取35 mmol 溶解于25 mL四氫呋喃中，冰浴下緩慢加入氫化鈉0.3 g(7.5 mmol)，隨后加入3-噻吩甲醛(4j)6 mmol ，于0 ℃繼續(xù)反應(yīng)30 min(TLC監(jiān)測)。加入冰水淬滅反應(yīng)，過濾得淡黃色固體5j5.0 g，收率82%;1H NMR(600 MHz,CDCl3)δ:8.32～8.25(m,1H,8′-H),8.10～8.06(m,1H,5′-H),7.93～7.89(m,1H,1′-H),7.89～7.82(m,1H,4′-H),7.81～7.77(m,1H,3′-H),7.75(dd,J=8.8 Hz,7.3 Hz,1H,6-H),7.66(d,J=1.8 Hz,1H,14-H),7.54(dt,J=6.3 Hz,3.5 Hz,2H,6′,7′-H),7.47～7.43(m,1H,2-H),7.38(dd,J=8.4 Hz,7.2 Hz,1H,3-H),7.26～7.21(m,1H,1-H),4.00(s,3H,15-H),3.97(s,2H,12-H);13C NMR(151 MHz,CDCl3)δ:183.15(C10),144.60(C4),141.83(C8),140.31(C14),138.63(C11),133.39(C2′),133.36(C9′),133.02(C10′),131.71(C8′),131.04(C4′),128.55(C5′),128.44(C5),127.66(C9),127.07(C1′),126.89(C7′),126.76(C6′),126.57(C3′),123.99(C6),121.84(C2),120.54(C1),110.99(C3),30.29(C15),26.60(C12)。

(4)6a～6j的合成(以6g為例)

取5g0.27 mL(2 mmol)，2.87 g(20 mmol)鹽酸胍，2 g(50 mmol)氫化鈉分別依次加入至20 mL甲苯溶液中，110 ℃下回流14 h，TLC監(jiān)測反應(yīng)結(jié)束。冷卻至室溫后減壓除去甲苯，加入碎冰，用1mol/L的鹽酸溶液處理反應(yīng)混合物，乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)層，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓除去溶劑，殘余物用硅膠柱層析(洗脫劑:乙酸乙酯/石油醚=2/7,V/V)純化得淡黃色固體6g。

用類似的方法合成6a～6f,6h,6j。

6a：淡黃色固體，產(chǎn)率68%,m.p.223～227 ℃;1H NMR(600 MHz,CDCl3)δ:7.94～7.90(m,2H,2′,6′-H),7.69(dt,J=8.0 Hz,0.9 Hz,1H,6-H),7.43(dt,J=8.3 Hz,0.9 Hz,1H,3-H),7.37～7.32(m,3H,2,3′,5′-H),7.22～7.18(m,1H,1-H),5.12(s,2H,NH2-H),4.16(s,3H,17-H),3.85(s,2H,12-H),2.47(s,3H,CH3-H)；13C NMR(151 MHz,CDCl3)δ:163.66(C16),162.57(C10),158.87(C14),143.32(C4),141.47(C8),139.68(C4′),135.35(C1′),129.28(2C,C3′,C5′),128.32(2C,C2′,C6′),128.31(C5),124.64(C6),123.62(C11),123.47(C9),120.08(C2),120.01(C1),110.45(C3),30.92(C17),28.03(C12),21.43(CH3)；HR-MS(ESI)m/z:Calcd for C21H18N4{[M+Na]+} 326.40,found 349.22。

6b:淡黃色固體，產(chǎn)率63%,m.p.254～258 ℃;1H NMR(600 MHz,DMSO-d6)δ:8.08(dd,J=9.2 Hz,0.7 Hz,1H,8′-H),7.98～7.91(m,1H,5′-H),7.60(d,J=9.2 Hz,1H,6-H),7.58～7.54(m,2H,3,6′-H),7.46～7.42(m,1H,2-H),7.41～7.34(m,2H,2′,7′-H),7.30～7.24(m,1H,3′-H),7.12～7.05(m,1H,1-H),6.59(s,2H,NH2-H),4.17(s,3H,17-H),3.86(s,3H,OCH3-H),3.34(s,2H,12-H);13C NMR(151 MHz,DMSO-d6)δ:163.74(C16),162.47(C10),158.38(C14),154.04(C4′),143.20(C4),141.68(C8),132.28(C1′),130.64(C9′),128.81(C10′),128.43(C5),127.18 (2C,C7′,C8′),126.79(C6′),124.74(C2′),124.02(C5′),123.74(C6),123.61(C11),120.74(C9),120.40(C2),120.24(C1),114.21(C3′),111.38(C3),56.73(OCH3),31.30(C17),26.19(C12);HR-MS(ESI)m/z:Calcd for C25H20N4O{[M+H]+}392.46,found 393.25。

6c:淡黃色固體，產(chǎn)率47%,m.p.229～232 ℃;1H NMR(600 MHz,DMSO-d6)δ:7.74～ 7.68(m,3H,3,2′,5′-H),7.55(dt,J=8.4 Hz,0.9 Hz,,1H,6-H),7.31～ 7.26(m,1H,2-H),7.17～ 7.12(m,1H,1-H),7.10(d,J=8.9 Hz,1H,4′-H),6.52(s,2H,NH2-H),4.12(s,3H,17-H),3.93(s,2H,12-H),3.88(s,3H,OCH3-H),3.86(s,3H,OCH3-H);13C NMR(151 MHz,DMSO-d6)δ:163.35(C16),163.31(C10),158.11(C14),150.59(C5′),149.00(C4′),143.25(C4),141.55(C8),131.03(C1′),127.66(C5),123.69(C6),123.53(C11),122.52(C6′),121.92(C9),120.41(C2),120.24(C1),112.11(C2′),111.76(C5′),111.36(C3),56.08(OCH3),56.03(OCH3),31.16(C17),28.32(C12);HR-MS(ESI)m/z:Calcd for C22H20N4O2{[M+H]+}372.43,found 373.25。

6d:淡黃色固體，產(chǎn)率58%,m.p.233～238 ℃;1H NMR(600 MHz,CDCl3)δ:7.64(dt,J=8.0 Hz,1.0 Hz,1H,6-H),7.56(d,J=1.9 Hz,1H,6′-H),7.46～7.39(m,3H,3,3′,5′-H),7.37～7.33(m,1H,2-H),7.21～7.16(m,1H,1-H),5.11(s,2H,NH2-H),4.19(s,3H,17-H),3.57(s,2H,12-H)；13C NMR(151 MHz,CDCl3)δ:163.42(C16),162.43(C10),157.65(C14),143.47(C4),141.11(C8),135.80(C4′),135.32(C1′),133.09(C2′),131.18(C3′),129.80(C6′),128.88(C5),127.37(C5′),126.81(C6),124.00(C11),123.47(C9),120.21(C2),120.16(C1),110.51(C3),30.99(C17),26.41(C12);HR-MS(ESI)m/z:Calcd for C20H14N4Cl2{[M+H]+}381.22,found 382.40。

6e:淡黃色固體，產(chǎn)率56%,m.p.225～229 ℃;1H NMR(600 MHz,DMSO-d6)δ:8.01～7.96(m,2H,3′,5′-H),7.71(dt,J=8.0 Hz,1.0 Hz,1H,6-H),7.53～7.49(m,2H,2′,6′-H),7.44(d,J=8.3 Hz,1H,3-H),7.38～7.33(m,1H,2-H),7.23～7.19(m,1H,1-H),5.08(s,2H,NH2-H),4.18(s,3H,17-H),3.87 (s,2H,12-H);13C NMR(151 MHz,DMSO-d6)δ:163.98(C16),162.57(C10),157.51(C14),143.42(C4),141.32(C8),136.64(C4′),135.64(C1′),129.72(2C,C2′,C4′),128.79(2C,C2′,C6′),128.41(C5),124.66(C6),123.84(C11),123.41(C9),120.14(2C,1,2-C),110.51(C3),30.94(C17),28.00(C12);HR-MS(ESI)m/z:Calcd for C20H15N4Cl{[M+H]+}346.82,found 347.22。

6f:淡黃色固體，產(chǎn)率45%,m.p.236～240 ℃;1H NMR(600 MHz,CDCl3)δ:7.83～ 7.80(m,1H,2′-H),7.74(dd,J=7.8 Hz,1.9 Hz,1H,6-H),7.71(dt,J=8.0 Hz,0.9 Hz,1H,6′-H),7.44(dt,J=8.4 Hz,0.9 Hz,1H,5′-H),7.37～ 7.32(m,1H,2-H),7.30(d,J=7.9 Hz,1H,3-H),7.23～ 7.17(m,1H,1-H),5.07(s,2H,NH2-H),4.18(s,3H,17-H),3.88(s,2H,12-H),2.41(s,3H,CH3-H),2.37(s,3H,CH3-H);13C NMR(151 MHz,CDCl3)δ:163.62(C16),162.55(C10),159.13(C14),143.31(C4),141.54(C8),138.39(C3′),136.90(C4′),135.77(C1′),129.78(C2′),129.49(C5′),128.27(C5),125.84(C6′),124.73(C6),123.59(C11),123.50(C9),120.10(C2),120.00(C1),110.45(C3),30.94(C17),28.06(C12),20.01(OCH3),19.75(OCH3);HR-MS(ESI)m/z:Calcd for C22H20N4{[M+H]+}340.43,found 341.29。

6g:淡黃色固體，產(chǎn)率68%,m.p.255～258 ℃;1H NMR(600 MHz,DMSO-d6)δ:8.66(d,J=1.7 Hz,1H,8′-H),8.22(dd,J=8.5 Hz,1.8 Hz,1H,5′-H),8.13(dt,J=8.8 Hz,3.1 Hz,1H,3′-H),8.07(d,J=8.6 Hz,1H,6-H),8.03～7.98(m,1H,1′-H),7.73(d,J=7.9 Hz,1H,3-H),7.63～7.59(m,2H,6′,7′-H),7.58(d,J=8.4 Hz,1H,4′-H),7.33～7.27(m,1H,2-H),7.16(t,J=7.5 Hz,1H,1-H),6.65(s,2H,NH2-H),4.15(s,3H,17-H),4.05(s,2H,12-H);13C NMR(151 MHz,DMSO-d6)δ:163.53(C16),163.48(C10),158.28(C14),143.38(C4),141.46(C8),135.86(C2′),133.80(C10′),133.19(C5′),129.22(C8′),128.51(C5),128.30(C6′),128.01(C7′),127.50(C4′),126.92(C1′),126.21,123.89(C8′),123.53(C6),123.44(C11),120.50(C2),120.35(C1),116.92(C9),111.44(C3),31.21(C17),28.13(C12);HR-MS(ESI)m/z:Calcd for C24H18N4{[M+H]+}362.44,found 363.29。

6h:淡黃色固體，產(chǎn)率56%,m.p.247～250 ℃;1H NMR(600 MHz,CDCl3)δ:8.76(d,J=5.3 Hz,2H,3′,5′-H),8.06～7.95(m,2H,2′,6′-H),7.70(dt,J=8.0 Hz,1.0 Hz,1H,6-H),7.55(dt,J=8.4 Hz,0.9 Hz,1H,3-H),7.36～7.24(m,1H,2-H),7.19～7.10(m,1H,1-H),6.72(s,2H,NH2-H),4.11(s,3H,17-H),3.94 (s,2H,12-H)；13C NMR(151 MHz,CDCl3)δ:163.86(C16),163.58(C10),155.77(C14),150.50(2C,C3′,C5′),145.57(C1′),143.48(C4),141.10(C8),128.52(C5),124.11(C6),123.85(C11),123.40(C9),122.92(2C,C2′,C6′),120.54(C2),120.40(C1),111.46(C3),31.19(C17),27.69(C12);HR-MS(ESI)m/z:Calcd for C19H15N5{[M+H]+}313.36,found 314.27。

6i:淡黃色固體，產(chǎn)率67%,m.p.231～235 ℃;1H NMR(600 MHz,CDCl3)δ:8.07～8.00(m,2H,2′,6′-H),7.71(d,J=7.8 Hz,1H,6-H),7.53～7.48(m,2H,3′,5′-H),7.46～7.41(m,3H,9′,13′-H),7.40～7.32(m,2H,10′,12′-H),7.23～7.18(m,1H,2-H),7.16～7.12(m,2H,1-H),5.19(s,2H,7′-H),5.03(s,2H,NH2-H),4.19(s,3H,17-H),3.91(s,2H,12-H);13C NMR(151 MHz,CDCl3)δ:163.70(C16),162.51(C10),159.97(C14),158.34(C4′),143.31(C4),141.57(C8),136.73(C1′),130.95(C8′),129.91(2C,C10′,C1′2),128.66(2C,C2′,C6′),128.10(C5),128.08(C11′),127.49(2C,C9′,C13′),124.26(C6),123.57(C11),123.50(C9),120.06(C2),120.02(C1),114.91(2C,C3′,C5′),110.46(C3),70.09(C7′),30.93(C17),28.24(C12);HR-MS(ESI)m/z:Calcd for C27H22N4O{[M+H]+}418.50,found 419.13。

6j:淡黃色固體，產(chǎn)率54%,m.p.245～247 ℃;1H NMR(600 MHz,CDCl3)δ:8.29(dd,J=2.9 Hz,1.3 Hz,1H,4′-H),7.84(dd,J=5.0 Hz,1.2 Hz,1H,6-H),7.74～7.68(m,2H,3,4′-H),7.57(d,J=8.3 Hz,1H,5′-H),7.30(t,J=7.7 Hz,1H,2-H),7.16(t,J=7.5 Hz,1H,1-H),6.51(s,2H,NH2-H),4.12(s,3H,17-H),3.94(s,2H,12-H);13C NMR(151 MHz,DMSO-d6)δ:163.47(C16),163.32(C10),153.86(C14),143.31(C4),141.51(C8),140.73(C1′),127.91(C5),127.69(C4′),127.61(C5′),126.84(C2′),123.78(C6),123.54(C11),122.12(C9),120.35(C2),120.34(C1),111.44(C3),31.19(C17),28.06(C12);HR-MS(ESI)m/z:Calcd for C18H14N4S{[M+H]+}318.40,found 319.17。

1.3 體外抗腫瘤活性測試

將待測化合物用DMSO溶解后，稀釋成五個(gè)濃度梯度。取對數(shù)生長期的細(xì)胞以5000個(gè)/孔的細(xì)胞密度接種于96孔板中，并設(shè)空白組、對照組及給藥組(100 μL)，每組設(shè)3個(gè)平行孔，于37 ℃培養(yǎng)24 h后棄去舊培養(yǎng)基，加入含不同濃度待測化合物的完全培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)48 h后每孔加入5 mg/mL MTT培養(yǎng)液20 μL，于37 ℃孵育4 h。取出96孔板，棄去培養(yǎng)液，加入DMSO 150 μL，置于水平搖床上振搖10 min，使用酶標(biāo)儀測定490 nm處吸光度OD值，計(jì)算細(xì)胞增殖抑制率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為至少兩次以上獨(dú)立重復(fù)實(shí)驗(yàn)所得的平均值。使用IBM SPSS Statistics 19軟件對細(xì)胞生長率進(jìn)行非線性回歸擬合，并用Blies法計(jì)算出IC50值，P<0.05為具有顯著性差異。

2 結(jié)果與討論

2.1 合成

3-吲哚丙酸用PPA或者TFAA處理可以得到相應(yīng)的環(huán)戊酮并[b]吲哚，以NaH為催化劑的反應(yīng)條件下，吲哚環(huán)戊酮能夠輕易地進(jìn)行N-甲基化反應(yīng)，后處理簡易；使用K2CO3為催化劑，反應(yīng)在常溫下即可進(jìn)行，不足是反應(yīng)時(shí)間長，產(chǎn)率低。如文獻(xiàn)中報(bào)道[24]，環(huán)戊并[b]吲哚與芳香醛發(fā)生Claisen-Schmidt縮合反應(yīng)只得到了E-異構(gòu)體產(chǎn)物，這是由于C=O引起的去屏蔽效應(yīng)，導(dǎo)致COC=CH中的乙烯基trans構(gòu)型比cis構(gòu)型更有利于結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定，因此只有E-異構(gòu)體。

文獻(xiàn)報(bào)道中最后一步反應(yīng)是以乙醇為溶劑，甲醇鈉為催化劑[25]，但是甲醇鈉比較活潑，加熱回流比較危險(xiǎn)，所以選用NaH替代甲醇鈉；乙醇為溶劑加熱回流反應(yīng)，反應(yīng)產(chǎn)率很低，期間篩選了其他溶劑，最終確定甲苯作為反應(yīng)溶劑，雖然產(chǎn)率相比苯稍低，但由于苯的毒性較高，故而將其排除在外。此外合成化合物6的反應(yīng)步驟增加，時(shí)間延長，反應(yīng)產(chǎn)率也略有提高。

2.2 體外抗腫瘤活性

采用MTT法測定了6a～6j化合物對人肝癌(HepG-2)、人子宮頸癌(Hela)和人鼻咽癌(CNE-1)瘤株的體外抑制活性并計(jì)算抑制率，以順鉑作為陽性對照，結(jié)果見表1。

表1 化合物的體外抗腫瘤活性Table 1 In vitro antitumor activities of the compounds

由表1可知，化合物6b對Hela和CNE-1細(xì)胞顯示了較強(qiáng)的抑制作用，但是對HepG-2細(xì)胞的IC50大于50 μmol/L，說明化合物6b對某些腫瘤細(xì)胞具有選擇抑制性。從表1的體外抗腫瘤活性也可得知，化合物6c、6d對Hela腫瘤細(xì)胞(6cIC50=22.4 μmol/L、6dIC50=20.1 μmol/L)和CNE-1腫瘤細(xì)胞(6cIC50=24.1 μmol/L、6dIC50=44.1 μmol/L)也具有選擇性抑制活性，化合物6f對CNE-1細(xì)胞(IC50=37.6 μmol/L)具有選擇性抗腫瘤活性，化合物6e對HepG-2細(xì)胞(IC50=35.9 μmol/L)具有選擇性抗腫瘤活性。比較化合物6b和6g可以得出，當(dāng)R為萘取代基時(shí)，4-甲氧基-1-萘取代基相比于2-萘取代基對化合物的抗腫瘤活性更強(qiáng)。從表1的體外抗腫瘤活性可進(jìn)行初步的構(gòu)效關(guān)系分析，苯環(huán)上的取代基的位置和種類，均可影響化合物的抗腫瘤活性。此外，將目標(biāo)化合物中的苯環(huán)變成雜環(huán)(噻吩、吡啶)后，化合物的抗腫瘤細(xì)胞活性消失。

合成了10個(gè)新型的氨基嘧啶環(huán)戊并[b]吲哚衍生物，選用人肝癌(HepG-2)、人子宮頸癌(Hela)和人鼻咽癌(CNE-1)瘤株考察其體外抗腫瘤活性，其中化合物6b對這些腫瘤細(xì)胞的抑制活性最好，且對部分腫瘤細(xì)胞具有選擇性。