戴俊華，韓 月，唐 浩，彭輝勇

江蘇省鎮(zhèn)江市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇鎮(zhèn)江 212002

強(qiáng)生VITROS 4600全自動(dòng)干式生化儀(以下簡稱“VITROS 4600”)由美國強(qiáng)生公司生產(chǎn)，目前被廣泛應(yīng)用于國內(nèi)大、中型醫(yī)院急診生化、常規(guī)生化檢驗(yàn)。其原理是將分析試劑全部固化在多層復(fù)合干片上，分析時(shí)只需少量待檢標(biāo)本滴在干片上進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，具有方便、快速、準(zhǔn)確、省時(shí)、環(huán)保、穩(wěn)定及試劑有效期長等特點(diǎn)[1-2]。根據(jù)《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則(ISO15189：2012)》[3]《臨床檢驗(yàn)方法確認(rèn)與性能評(píng)價(jià)》[4]《臨床檢驗(yàn)方法評(píng)價(jià)》[5]中的相關(guān)要求，本研究對(duì)急診檢驗(yàn)室使用的VITROS 4600開展的12個(gè)生化項(xiàng)目進(jìn)行精密度、準(zhǔn)確度、攜帶污染率、線性范圍及參考區(qū)間性能驗(yàn)證。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院體檢中心20例健康志愿者為研究對(duì)象，年齡20～60歲。20例志愿者中男7例，其中20～<30歲2例，30～<40歲2例，40～<50歲1例，50～<60歲2例；女13例，其中20～<30歲3例，30～<40歲7例，40～<50歲2例，50～<60歲1例。收集20例健康志愿者的血液標(biāo)本，標(biāo)本無明顯溶血、脂血、黃疸等。

1.2儀器與試劑 VITROS 4600及原裝配套試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品。

1.3檢測項(xiàng)目 尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)、血糖(GLU)、尿酸(UA)、鉀(K)、鈉(Na)、氯(Cl)、鈣(Ca)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、淀粉酶(AMY)。

1.4方法

1.4.1精密度驗(yàn)證 參照美國臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)修正案1988(CLIA′88)制定的能力比對(duì)檢驗(yàn)分析質(zhì)量要求[6]及廠家要求，選取兩個(gè)水平質(zhì)控品(高水平和低水平質(zhì)控品)，連續(xù)重復(fù)測定20次，計(jì)算批內(nèi)精密度(CV批內(nèi))和精密度指數(shù)，CV批內(nèi)≤1/4允許總誤差(TEa)或精密度指數(shù)≤1為合格；同樣使用兩個(gè)水平質(zhì)控品，每天檢測1次，連續(xù)檢測20 d，在此過程中不能更換試劑批號(hào)及質(zhì)控品批號(hào)，計(jì)算批間精密度(CV批間)，CV批間≤1/3TEa為合格。

1.4.2準(zhǔn)確度驗(yàn)證 在設(shè)備上檢測高水平和低水平質(zhì)控品的相關(guān)檢測項(xiàng)目，每個(gè)水平重復(fù)2次，記錄實(shí)測均值并與定標(biāo)品的定值比較，計(jì)算偏倚，準(zhǔn)確度偏倚≤1/2TEa為合格。

1.4.4線性范圍驗(yàn)證 選取1份H(接近線性范圍上限)，1份L(接近線性范圍下限)，將H和L按體積比例5L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、1L+4H、5H關(guān)系進(jìn)行混合，將實(shí)測值(Y)與理論值(X)進(jìn)行比較，計(jì)算公式Y(jié)=bX+a，驗(yàn)證線性范圍。斜率b值在1.00±0.03內(nèi)，r2≥0.95為合格。

1.4.5參考區(qū)間驗(yàn)證 項(xiàng)目參考區(qū)間的評(píng)價(jià)：如果20例研究對(duì)象中不超過2例(或10%的結(jié)果)的觀察值在驗(yàn)證的參考區(qū)間之外，廠商或提供參考區(qū)間實(shí)驗(yàn)室報(bào)告的95%參考區(qū)間可以接受。若2例以上研究對(duì)象的觀察值超出參考區(qū)間，再選20例研究對(duì)象進(jìn)行驗(yàn)證，若≤2例觀察值超過驗(yàn)證的參考區(qū)間，則可以接受。若又有2例以上觀察值超過驗(yàn)證的參考區(qū)間，應(yīng)重新檢查分析條件，決定實(shí)驗(yàn)室是否需要自行建立參考區(qū)間。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件和Excel進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析和數(shù)據(jù)處理。

2 結(jié) 果

2.1精密度CV批間和CV批內(nèi)結(jié)果及精密度指數(shù)見表1，均符合CLIA′88質(zhì)量分析及廠家聲明的要求，通過驗(yàn)證。

表1 VITROS 4600精密度驗(yàn)證結(jié)果

表2 VITROS 4600準(zhǔn)確度驗(yàn)證結(jié)果

2.2準(zhǔn)確度 結(jié)果顯示，12個(gè)檢測項(xiàng)目均通過驗(yàn)證，見表2。

2.3攜帶污染率 結(jié)果顯示，K1和K2均為-10%～10%，通過驗(yàn)證，見表3。

表3 VITROS 4600攜帶污染率結(jié)果(%)

2.4線性范圍 12個(gè)檢測項(xiàng)目的斜率b均在1.00±0.03內(nèi)，r2≥0.95，表明檢測的12個(gè)生化項(xiàng)目實(shí)測值和理論值具有良好的線性關(guān)系，通過驗(yàn)證，見表4。

2.5參考區(qū)間驗(yàn)證 本研究驗(yàn)證的12個(gè)項(xiàng)目廠家提供的參考區(qū)間：BUN為1.7～7.5 mmol/L；CREA為35～135 μmol/L；GLU為3.8～6.1 mmol/L；UA為145～428 μmol/L；K為3.5～5.1 μmol/L；Na為135～145 mmol/L；Cl為95～106 mmol/L；Ca為2.20～2.75 mmol/L；AST為0～40 U/L；LDH為110～220 U/L；CK為10～110 U/L；AMY為20～220 U/L。本研究驗(yàn)證的參考區(qū)間結(jié)果均合格，見表5。

表4 VITROS 4600線性范圍驗(yàn)證結(jié)果

表5 12個(gè)檢測項(xiàng)目參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果

續(xù)表5 12個(gè)檢測項(xiàng)目參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果

注：R值>90%為合格,R值=測定結(jié)果在參考范圍內(nèi)的例數(shù)/總測定例數(shù)×100%。

3 討 論

臨床檢驗(yàn)工作量大，內(nèi)容豐富多樣，而實(shí)驗(yàn)室儀器自動(dòng)化程度高，可檢測多種指標(biāo)，打破了傳統(tǒng)檢驗(yàn)人工完成為主，效率低、成本高的局限。與此同時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化的實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制也越來越受到重視。雖然廠家已提供儀器的性能參數(shù)，但由于各實(shí)驗(yàn)室、地區(qū)、環(huán)境及操作人員等之間存在差異，實(shí)驗(yàn)室在儀器使用前必須進(jìn)行性能驗(yàn)證，以確定設(shè)備能達(dá)到所要求的性能指標(biāo)，這對(duì)保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要[7-10]。VITROS 4600采用干片試劑進(jìn)行檢測，避免了液體試劑保存時(shí)間短、復(fù)融時(shí)間長等缺點(diǎn)。該儀器能夠快速檢測生化項(xiàng)目，平均檢測時(shí)間為6 min左右，能夠滿足急診檢驗(yàn)的需求。

本研究依據(jù)EP5-A2[11]、EP6-A2[12]、EP15-A2[13]、C28-A2[14]對(duì)VITROS 4600的精密度、準(zhǔn)確度、攜帶污染率、線性范圍、參考區(qū)間進(jìn)行性能驗(yàn)證。結(jié)果顯示，各檢測項(xiàng)目CV批間<1/3TEa，CV批內(nèi)<1/4TEa，精密度指數(shù)≤1，表明該儀器檢測隨機(jī)誤差小，具有良好的重復(fù)性。準(zhǔn)確度驗(yàn)證試驗(yàn)顯示，結(jié)果偏倚均小于1/2TEa，表明該儀器檢測準(zhǔn)確度好。攜帶污染率是指標(biāo)本間的污染程度，本研究結(jié)果顯示，攜帶污染率均為-10%～10%，表明該儀器具有較好的加樣系統(tǒng)和自潔系統(tǒng)，避免了交叉污染，可以連續(xù)測量樣品。線性范圍即分析測量范圍，是由檢測系統(tǒng)直接測量得到的可靠結(jié)果范圍，在此范圍內(nèi)檢測不同樣品分析物的測量值和其真實(shí)值呈線性比例關(guān)系。本研究中12個(gè)項(xiàng)目回歸方程斜率b值均在1.00±0.03內(nèi)，r2≥0.95，表明該儀器線性范圍良好。參考區(qū)間驗(yàn)證試驗(yàn)顯示，R值均≥95%，表明可以引用此參考區(qū)間。

綜上所述，VITROS 4600是一種精密度較高，準(zhǔn)確度較好，攜帶污染較低，線性范圍較好及檢測速度較快的分析儀，其性能能夠滿足臨床工作的需求。通過對(duì)該檢測系統(tǒng)的性能驗(yàn)證，不僅可保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，而且符合臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理要求。