吳秋花 蔡云祥

自上個(gè)世紀(jì)90年代，幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，Hp）在胃組織里被發(fā)現(xiàn)以來(lái)，大量的研究證實(shí)了Hp感染與慢性萎縮性胃炎、胃淋巴瘤、胃癌等疾病密切相關(guān)［1］。分離培養(yǎng)的方法作為Hp檢測(cè)的“金標(biāo)準(zhǔn)”，因其培養(yǎng)要求高，所以臨床上基本不用，目前常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)胃Hp感染的方法主要分為兩類［2-3］，其中一類為侵入性檢測(cè)：胃鏡下取胃組織進(jìn)行脲酶試驗(yàn)；另一類為非侵入性檢測(cè)：檢測(cè)患者血清中Hp抗體和糞便中的Hp抗原。本文擬通過(guò)比較體檢人群糞便Hp抗原、血清Hp檢測(cè)與14C-尿素呼氣試驗(yàn)（14C-UBT）檢測(cè)結(jié)果，觀察三者檢查結(jié)果的一致性及調(diào)查浙江地區(qū)體檢人群中Hp的感染率；調(diào)查體檢人群中糞便Hp抗原、血清Hp結(jié)果存在的不同模式的流行病學(xué)意義；描述體檢者血清Hp抗體陽(yáng)性患者血清中Hp抗體譜特征；為進(jìn)一步積累體檢人群中Hp感染的流行病學(xué)資料和揭示Hp在體檢人群中的感染機(jī)制研究奠定基礎(chǔ)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2017年1月至12月浙江省湖州市第一人民醫(yī)院健康體檢人員596例。其中男347例（12～80歲），女249例（14～83歲），按照年齡各分6組（＜21 歲，21～30 歲，31～40 歲，41～50 歲，51～60歲，＞60歲）。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）未進(jìn)行Hp治療或近期未服用與幽門螺桿菌治療有關(guān)的藥物者；（2）剔除體檢過(guò)程中已經(jīng)明確有消化道疾病癥狀（胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍及胃癌等）、相關(guān)病史和家族史者；（3）患者雖沒(méi)有消化道癥狀，但明確有其他疾?。ㄈ缪翰?、自身免疫性疾病等系統(tǒng)性疾?。┛赡苡绊憴z測(cè)結(jié)果的同樣剔除。

1.2 試劑盒儀器14C放射性液閃儀及0.75μCi/粒（14C-UBT）尿素膠囊（深圳市中核海得威生物科技有限公司），幽門螺桿菌糞便抗原、血清抗體檢測(cè)試劑盒（均來(lái)自杭州艾康生物有限公司），Hp免疫印跡試驗(yàn)試劑盒（深圳市伯勞特生物制品有限公司）。

1.3 方法 （1）14C-UBT：受檢者清晨空腹或餐后2h口服1粒14C尿素膠囊，靜坐25min后開啟CO2吸收劑一瓶，向瓶?jī)?nèi)平靜吹氣約1～3min，然后向瓶?jī)?nèi)加入稀釋閃爍液4.5ml，加蓋密封，于閃爍儀上作14C放射性測(cè)試2min，結(jié)果判斷：14C-UBT≥100dpm/mmol CO2可判斷為Hp陽(yáng)性。（2）膠體金糞便Hp抗原與血清Hp抗體檢測(cè)：同時(shí)收集受檢者的糞便與血清標(biāo)本，按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作和結(jié)果判斷。（3）免疫印跡試驗(yàn)血清抗體譜檢測(cè)及血清分型：當(dāng)血清Hp抗體檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性時(shí)，進(jìn)行Hp血清抗體譜分析，操作按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作；區(qū)帶結(jié)果判斷：細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白（CagA-116KD）、空泡毒素（VacA-95KD，VacA-91KD）、尿素酶亞單位（UreA-66KD，UreB-30KD）區(qū)帶相關(guān)抗體顯色深淺低于質(zhì)控帶判斷為陰性結(jié)果，反之則為陽(yáng)性結(jié)果；嚴(yán)格按照實(shí)際說(shuō)明書進(jìn)行分型結(jié)果判斷：根據(jù)文獻(xiàn)［4-5］標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分型，CagA-116KD、VacA-95KD、VacA-91KD區(qū)帶相關(guān)抗體中有任一陽(yáng)性結(jié)果判為血清Ⅰ型，三者均為陰性則為Ⅱ型。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件包。計(jì)數(shù)資料以%表示，不同Hp感染檢測(cè)方法之間陽(yáng)性結(jié)果（率）差異的比較采用配對(duì)χ2檢驗(yàn)，不同年齡組之間Hp感染率采用有序2×C表線性趨勢(shì)χ2檢驗(yàn)，不同性別Hp感染率采用χ2檢驗(yàn)，不同年齡組血清Hp抗體譜分布采用R×C表χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Hp感染不同檢測(cè)方法比較 見表1。

表1 三種檢測(cè)幽門螺桿菌感染的方法比較（n）

2.2 健康人群中糞便Hp抗原和血清Hp抗體聯(lián)合檢測(cè)不同結(jié)果模式分析 見表2。

表2 體檢人群Hp感染不同結(jié)果模式分布

2.3 不同性別及年齡段Hp感染率調(diào)查 見表3。

表3 不同性別及年齡段Hp感染調(diào)查

2.4 不同年齡段血清Hp抗體譜及血清型 見表4。

表4 不同年齡組血清抗體譜與血清型差異性比較

3 討論

本資料中采用14C-UBT、糞便Hp抗原和血清Hp抗體同時(shí)用于體檢人群的篩查，比較三者之間在檢測(cè)結(jié)果上的區(qū)別，發(fā)現(xiàn)體檢人群中Hp總感染率39.09%，且三者方法之間的感染率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），另外，糞便Hp抗原與血清Hp檢測(cè)兩者在體檢人群篩查中起到了相輔相成的作用，糞便Hp與血清Hp抗體陽(yáng)性分布的不同階段，與Hp感染的發(fā)生、發(fā)展以及治療預(yù)后的判斷緊密相關(guān)。因此，對(duì)于一般體檢人群Hp篩查選擇糞便Hp抗原和血清Hp抗體聯(lián)合檢測(cè)，不僅有助于判斷Hp是否感染，同時(shí)有助于了解疾病的感染階段和實(shí)施不同的治療措施。

作者將體檢Hp篩查病例按照性別和年齡進(jìn)行分組統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)：Hp感染在男女之間，感染率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），Hp感染與性別無(wú)關(guān)聯(lián)性；Hp感染在不同年齡段、感染率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），Hp感染率與年齡組成正相關(guān)，隨著年齡的增長(zhǎng)Hp感染率增加（30.23%～43.49%）。文獻(xiàn)報(bào)道，Hp不同抗原蛋白刺激產(chǎn)生的抗體和其致病特點(diǎn)、預(yù)后及耐藥密切相關(guān)［6］，依據(jù)此特性臨床上將Hp感染分為2個(gè)血清型，即分泌CagA/VacA（CagA或VacA抗體檢測(cè)任一陽(yáng)性）為血清Ⅰ型，無(wú)分泌 Cag A/VacA（CagA或VacA抗體檢測(cè)均為陰性）為血清Ⅱ型［4-5］。兩者在胃和十二指腸疾病中致病性和造成的結(jié)局不完全一樣，血清Ⅱ型Hp一般不產(chǎn)生細(xì)胞毒素，其雖然能覆蓋在部分胃黏膜上，并使人體產(chǎn)生相應(yīng)的免疫應(yīng)答（產(chǎn)生Hp抗體），但不能侵入胃上皮細(xì)胞，可長(zhǎng)期無(wú)臨床癥狀。相反，感染血清Ⅰ型Hp后，由于細(xì)胞毒素（CagA/VacA）的作用造成胃上皮細(xì)胞空泡、損傷、壞死及潰瘍，更易誘發(fā)胃、十二指腸潰瘍及胃部腫瘤。為此本文調(diào)查了一般體檢人群中Hp血清型的分布。由表4可知：在一般體檢人群中Hp血清Ⅰ型的感染率大約為70.39%，明顯高于血清Ⅱ型；另外Hp血清Ⅰ型在不同年齡組中的分布差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），＜50歲Hp血清Ⅰ型的感染率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢(shì)，而＞50歲Hp血清Ⅰ型的感染率出現(xiàn)下降，這種現(xiàn)象符合疾病發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸的一般規(guī)律。