苑志軍，王大中

（上海生農(nóng)生化制品股份有限公司，上海201619）

噻蟲啉是煙堿類廣譜、內(nèi)吸性殺蟲劑，對(duì)刺吸式口器害蟲和一些咀嚼式口器害蟲高效、速效和持效，對(duì)哺乳動(dòng)物低毒，對(duì)環(huán)境安全，能夠防治水稻、蔬菜、果樹、棉花和馬鈴薯等作物上的大多數(shù)害蟲，是目前有廣泛應(yīng)用前景的優(yōu)良?xì)⑾x劑品種之一。聯(lián)苯菊酯是擬除蟲菊酯類殺蟲殺螨劑，具有胃毒和觸殺作用，防治譜廣，持效期較長，在土壤中不移動(dòng)，對(duì)環(huán)境較為安全。為了有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，滿足用戶需要，找到適合的分析方法，經(jīng)過多次條件篩選，采用高效液相色譜法對(duì)聯(lián)苯菊酯和噻蟲啉混劑同時(shí)進(jìn)行分離測(cè)定，方法簡便可行，適用于產(chǎn)品質(zhì)量控制。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

高效液相色譜儀：Agilent 1260 具有紫外檢測(cè)器和自動(dòng)進(jìn)樣器，Agilent 1260 色譜工作站，色譜柱Agilent Eclipse XDB C18，250 mm×4.6 mm(id)不銹鋼柱，內(nèi)裝C18 填充物，粒徑5 μm；過濾器，濾孔膜徑約0.45 μm；超聲波清洗器。

甲醇，色譜純；水，新蒸二次蒸餾水；聯(lián)苯菊酯標(biāo)樣，已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.2%；噻蟲啉標(biāo)樣，已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)97.0%；試樣，40%噻蟲啉·聯(lián)苯菊酯懸浮劑（自制）；空白制劑：將除原藥外的所有助劑混勻（自制）。

1.2 色譜條件（表1）

表1 色譜條件

流動(dòng)相：梯度淋洗；柱溫：30℃；流速：1.5 mL/min；檢測(cè)波長：230 nm；進(jìn)樣體積：5 μL。保留時(shí)間：聯(lián)苯菊酯17.5 min，噻蟲啉5.0 min；以上操作參數(shù)是典型的，可根據(jù)不同儀器特點(diǎn)對(duì)給定操作參數(shù)作適當(dāng)調(diào)整，以期獲得最佳效果。在上述條件下，聯(lián)苯菊酯和噻蟲啉典型高效液相色譜圖如圖1所示。

圖1 40%噻蟲啉·聯(lián)苯菊酯懸浮劑高效液相色譜圖

1.3 測(cè)定步驟

1.3.1 標(biāo)樣溶液的配制

稱取聯(lián)苯菊酯和噻蟲啉標(biāo)樣各0.05 g（精確至0.000 2 g）于100 mL 容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，置于超聲水浴中振蕩15 min，取出冷卻至室溫備用。

1.3.2 試樣溶液的配制

稱取約0.25 g的試樣（精確至0.000 2 g）于100 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，置于超聲水浴中振蕩15 min，取出冷卻至室溫后用0.45 μm 微孔濾膜過濾后備用。

1.3.3 測(cè)定

在上述色譜條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰兩針聯(lián)苯菊酯和噻蟲啉的相對(duì)響應(yīng)值變化小于1.5%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)樣測(cè)定。

1.3.4 計(jì)算

將測(cè)得的兩針試樣溶液以及試樣溶液前后兩針標(biāo)樣溶液中聯(lián)苯菊酯（噻蟲啉）峰面積分別進(jìn)行平均。聯(lián)苯菊酯（噻蟲啉）質(zhì)量分?jǐn)?shù)X（%）按式（1）計(jì)算：

式中：A1—前后兩次進(jìn)樣測(cè)得的同一標(biāo)樣溶液中聯(lián)苯菊酯（噻蟲啉）峰面積的平均值；A2—前后兩次進(jìn)樣測(cè)得的同一試樣溶液中聯(lián)苯菊酯（噻蟲啉）峰面積的平均值；m1—聯(lián)苯菊酯（噻蟲啉）標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2—試樣的質(zhì)量，g；P—聯(lián)苯菊酯（噻蟲啉）標(biāo)樣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的選擇

分離柱采用常用的C18 柱，從分離時(shí)間和效果考慮，選定250 mm×4.6 mm(id)C18不銹鋼柱。分別用甲醇和水配成不同的流動(dòng)相，反復(fù)篩選進(jìn)樣，得到不同的分離效果圖。經(jīng)過多種分離情況對(duì)比，選定流動(dòng)相為甲醇+水（梯度淋洗），流速：1.5 mL/min 時(shí)，有效成分與雜質(zhì)互不干擾分離，峰形對(duì)稱，基線平穩(wěn)，保留時(shí)間適宜。

2.2 方法線性相關(guān)性

準(zhǔn)確稱取噻蟲啉標(biāo)樣（含量為97.0%）1.248 8 g、聯(lián)苯菊酯標(biāo)樣（含量為98.2%）1.249 1 g于250 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。準(zhǔn)確吸取2 mL、5 mL 、10 mL、15 mL、20 mL樣品于5只100 mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻后進(jìn)樣分析，得其響應(yīng)值。以標(biāo)準(zhǔn)液質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)液峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得聯(lián)苯菊酯標(biāo)準(zhǔn)曲線為：Y=10 831X-19.009，相關(guān)系數(shù)r=1，表明聯(lián)苯菊酯在質(zhì)量濃度0.098 1 g/L～0.981 3 g/L范圍內(nèi)，峰面積與質(zhì)量濃度間線性關(guān)系良好；得噻蟲啉標(biāo)準(zhǔn)曲線為：Y=19 275X+75.753，相關(guān)系數(shù)r=0.999 9，表明噻蟲啉在質(zhì)量濃度0.096 9 g/L～0.969 1 g/L 范圍內(nèi)，峰面積與質(zhì)量濃度間線性關(guān)系良好。線性相關(guān)性測(cè)定結(jié)果見表2、圖2、圖3。

表2 聯(lián)苯菊酯和噻蟲啉線性相關(guān)性

圖2 聯(lián)苯菊酯液相色譜線性關(guān)系圖

圖3 噻蟲啉液相色譜線性關(guān)系圖

2.3 方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn)

稱取0.176 9 g（精確至0.000 2 g）的40%噻蟲啉·聯(lián)苯菊酯懸浮劑基質(zhì)樣品于5 只100 mL 容量瓶中，分別添加0.077 3 g（精確至0.000 2 g）含量為97.0%的噻蟲啉和0.045 8 g 含量為98.2%的聯(lián)苯菊酯標(biāo)準(zhǔn)品，得到5個(gè)實(shí)驗(yàn)室合成樣品，然后按上述色譜條件測(cè)定其含量，計(jì)算回收率，聯(lián)苯菊酯平均回收率為99.6%，噻蟲啉平均回收率為99.46%（見表3）。

2.4 方法的精密度試驗(yàn)

分別稱取40%噻蟲啉·聯(lián)苯菊酯懸浮劑樣品6 份，按上述方法進(jìn)行6 次平行測(cè)定，噻蟲啉含量平均值為25.04%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.027，變異系數(shù)為0.11%；聯(lián)苯菊酯含量平均值為15.06%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.016，變異系數(shù)為0.11%，說明該方法精密度較高（見表4）。

表3 回收率結(jié)果

表4 精密度結(jié)果

3 結(jié)論

綜上所述，該分析方法準(zhǔn)確度、精密度高，線性關(guān)系良好，是分析40%噻蟲啉·聯(lián)苯菊酯懸浮劑中有效成分聯(lián)苯菊酯和噻蟲啉的一種準(zhǔn)確、可靠的方法。