張棋麟 江宇航
摘 要:云南松毛蟲是枯草夜蛾科中的一種危害松類針葉的害蟲總稱。云南松毛蟲幼蟲以啃食針葉為害,輕者導致針葉成片枯黃,重者形似火燒,嚴重影響森林樹木的生長,并對周圍群眾的生產(chǎn)、生活造成了不良的影響。云南松毛蟲雖為大多數(shù)人所厭惡,但其腸道內存在著豐富的菌群資源。因此,本文以云南松毛蟲生物學特性為立著點,進一步闡述云南松毛蟲腸道菌群資源及其生物防治策略。為云南松毛蟲的防治和進一步開發(fā)腸道菌群資源提供參考。
關鍵詞:云南松毛蟲;生物學特性;腸道菌群資源;生物防治
云南松毛蟲(Dendrolimushoui Lajonquiere),屬鱗翅目(Lepidoptera),松毛蟲屬(Dendrolimus)中的最大個體松毛蟲,齡期較長,主要分布于我國海拔高于1600~3000m的云南、四川、廣東、福建、貴州等省份。在我國境內云南松毛蟲主要危害云南松、思茅松、馬尾松、海南松等松林針葉類植被。因此,研究如何有效防止云南松毛蟲幼蟲啃食針葉、嫩枝,影響樹木生長的防治措施顯得尤為重要。再者,云南松毛蟲蘊含著豐富的自然資源,自身蛋白質含量占總干重的50%以上,擁有豐富的蛋白質資源。且許多研究表明:云南松毛蟲腸道菌群能夠產(chǎn)生多種水解酶(纖維素酶、蛋白酶、脂肪酶)[1]。這些有益腸道菌群在云南松毛蟲整個生長周期中發(fā)揮著重要作用。因此,或許可以通過研究云南松毛蟲自身及其腸道菌群資源,進一步推動云南松毛蟲的生物防治。這也對于挖掘云南松毛蟲腸道菌群資源奠定理論基礎,也為安全、有效防治云南松毛蟲、成害害提供一種新思路。
1 云南松毛蟲的生物學特性
云南松毛蟲一生需要經(jīng)歷從卵-蛹-幼蟲-成蟲四個發(fā)展階段,不同生長周期其體長、體表顏色、外觀形狀等形特征也在發(fā)生許多改變。例如,在蛹時期,體長大約為29~49mm,呈紡錘形,蛹體顏色由初蛹時的翠綠色可逐漸發(fā)展為紅褐色,最后變成灰白色,在此階段幼蟲僅腹部能夠自由活動且形成的繭上有毒毛;在卵時期,體長直徑約為1.8mm,呈圓形,表面有3條白色細絲環(huán)形花紋;在幼蟲時期,體長直徑約為6.0~9.0mm,在此生長階段,體表顏色由剛孵出時的淺黑色,隨日齡變化顏色不斷加深直至6-7日齡時可發(fā)展成為黑褐色[2]。與此同時,不同階段的云南松毛蟲生活史不同,在卵時期,主要以該狀態(tài)越冬可持續(xù)長達半年之久;在蛹時期,首先在繭內化蛹,但并非所有頂蛹均能化蛹,化蛹率一般為60%,且此時期可持續(xù)43~49d;在幼蟲時期,幼蟲可取食嫩葉和嫩梢,據(jù)統(tǒng)計,一頭云南松毛蟲幼蟲從初孵到成熟,采食新鮮針葉可達125g左右,同時,幼蟲表現(xiàn)出一定的群居性,整個時期歷時約為100~155d;在成蟲時期,多在夜間羽化,羽化得到的雌雄占比約為1.4∶1,羽化10d后便可進行交尾,交尾成功后可進行產(chǎn)卵,每次最多為50多粒。產(chǎn)卵后的成蟲當天死亡,因此,成蟲的整個周期僅為1-18d[1]。
2 云南松毛毛蟲的腸道菌群資源
2.1 云南松毛蟲腸道產(chǎn)蛋白酶菌群資源
云南松毛蟲在成蟲階段自身蘊含著豐富的蛋白質、脂肪、總糖等物質,含量分別依次可達到68%、30%、17.83%,特別是在蛹時期,其體內蛋白質含量最高大于45%。云南松毛蟲擁有如此高的蛋白酶含量,在其整個生命周期中蛋白質可分解轉換供給生長發(fā)育。因此,云南松毛蟲體內必然存在著直接或間接分解蛋白類物質的蛋白酶。蛋白酶是一類作為催化蛋白質分解為蛋白胨、多肽以及游離氨基酸的重要水解酶,可廣泛應用于醫(yī)藥、造紙、清潔劑、食品、釀造、化妝品等領域。隨著人們對微生物所蘊含的酶資源展開深層次的研究,發(fā)現(xiàn)其產(chǎn)生的蛋白酶酶學性質穩(wěn)定、產(chǎn)量高、成本低廉,特別是某些昆蟲腸道菌群所產(chǎn)生的蛋白酶。云南松毛蟲雖作為我國的一種歷史性害蟲,其腸道中或蘊含著豐富的蛋白酶資源。例如,孫佑赫等人[3]曾采用酪蛋白平板法從松毛蟲腸道中分離獲得16株產(chǎn)蛋白酶的菌株。通過比較透明圈大小和測定酶活力,篩選出了一株高產(chǎn)蛋白酶的菌株2N01,經(jīng)進一步比對分析將這株菌為霍氏腸桿菌。同時該菌株的產(chǎn)酶的最適培養(yǎng)溫度、pH分別為40℃和8.0,且培養(yǎng)72h后達到最大酶活力,為50.07U/mL。雖然,目前尚未有有研究直接報道云南松毛蟲腸道產(chǎn)蛋白酶的腸道微生物菌群,但已在其松毛蟲屬昆蟲腸道中挖掘得到蛋白酶資源。因此,或許云南松毛蟲腸道中也存在類似于霍氏腸桿菌等腸道產(chǎn)高活性蛋白酶細菌,其具有極為重要的產(chǎn)蛋白酶來源研究價值。
2.2 云南松毛蟲腸道產(chǎn)纖維素酶菌群資源
纖維素是自然界中分布最廣、含量最多的可再生資源,是植物光合作用產(chǎn)生的初級代謝產(chǎn)物??蓮V泛應用于食品、紡織品、清潔劑和紙張制造等多個行業(yè)。同時由于云南松毛幼蟲主要是以蠶食云南松、柳杉等樹木的針葉、嫩枝來影響重要林木的生長,其腸道中擁有豐富的產(chǎn)纖維素酶微生物資源。相比云南松毛蟲腸道產(chǎn)蛋白酶微生物資源的研究較為匱乏而言,云南松毛蟲腸道內產(chǎn)纖維素酶菌群研究較為成熟。孫天佑等人[4]就云南松毛蟲腸道內產(chǎn)纖維素酶細菌進行研究,篩選獲得了28株產(chǎn)纖維素酶細菌。這些產(chǎn)纖維素酶菌株分別屬于約克氏菌屬細菌、腸桿菌屬、克雷伯氏桿菌屬和芽孢桿菌屬。同時篩選獲得一株高活性的產(chǎn)蠟狀芽孢桿菌,經(jīng)進一步研究,發(fā)現(xiàn)其最適溫度為35℃,最適pH值為7.0,在連續(xù)發(fā)酵70h左右時纖維素酶活達到最高為19.24U/mL。與此同時,江宇航等人也從云南松毛蟲腸道中發(fā)現(xiàn)兩株產(chǎn)纖維素酶真菌,他們利用采剛果紅染色法篩選出的2株降解纖維素真菌,產(chǎn)生的纖維素酶在pH5.0~9.0時均有較高活性,且酶活性在pH=7.0時顯著高于其他酸堿度條件。因此,不難發(fā)現(xiàn)云南松毛蟲腸道內菌群具有豐富的降解纖維素酶資源,為工業(yè)生產(chǎn)提供了一種新的產(chǎn)纖維素酶后備開發(fā)資源。
2.3 云南松毛蟲腸道產(chǎn)脂肪酶菌群資源
肪肪酶是一種能催化天然油脂水解的天然活性酶類物質。廣泛應用于食品、醫(yī)藥、洗滌劑和皮革中。脂肪酶可在油水界面上催化甘油三酯降解為甘油和游離脂肪酸,同時還能夠催化脂化作用、酸解等一系列反應。隨著脂肪酶的應用領域日漸拓寬、市場規(guī)模逐步擴大,顯示出了廣闊的應用前景。由于松毛蟲長期采食多種松類樹木的針葉,對于松油脂有著特殊的消化系統(tǒng)。因此,云南松毛蟲腸道內可能存在著特殊的產(chǎn)脂肪酶微生物菌群。安曼云等人[5]就曾對云南松毛蟲腸道細菌產(chǎn)脂肪酶進行過初步研究,它們利用常規(guī)細菌培養(yǎng)和酶學方法,研究云南松毛蟲腸道內產(chǎn)脂肪酶的細菌及產(chǎn)酶特性,為云南松毛蟲腸道菌群資源開發(fā)產(chǎn)脂肪酶提供了理論依據(jù)。研究結果表明,云南松毛蟲幼蟲腸道有193株產(chǎn)脂肪酶的菌株,涉及到了3個菌屬,分別為假單胞菌屬、克雷伯氏菌屬和芽孢桿菌屬,同時發(fā)現(xiàn)菌株P-50為一株高活性的產(chǎn)脂肪酶菌株,其最適作用溫度、pH分別為35℃和8.0,為一類中溫產(chǎn)堿性脂肪酶菌。因此,云南松毛蟲腸道內的微生物也具有豐富的產(chǎn)脂肪酶資源。目前,雖已有學者挖掘獲得了產(chǎn)脂肪酶等腸道微生物菌株,但其尚未開展對厭氧或除pH溫度等因素以外的酶學特性展開更為深入地研究。因此,云南松毛蟲腸道微生物菌群資源中仍可能蘊含著一些尚未發(fā)掘的產(chǎn)脂肪酶微生物菌群資源,有待人類進一步發(fā)掘。
3 云南松毛蟲的生物防治策略
云南松毛蟲作為我國的一種具有極其危害樹木生長的重大害蟲,其不僅影響云南松,而且還對其他類型的馬尾松、黑松、楊樹等樹種也有極大地危害。初齡期的云南松毛蟲主要以幼蟲的方式生存,隨著日齡見長,逐漸危害樹木生長,嚴重時可導致樹木枯死。不僅如此,云南松毛蟲如不進行有效防治,會致使生活在林區(qū)的人群由云南松毛蟲引起的相關癥狀疾病,這些疾病常見的臨床表現(xiàn)為,手足奇癢,嚴重者可引起出現(xiàn)四肢腫痛等現(xiàn)象的出現(xiàn),對人體健康影響極大。因此,如何有效防止云南松毛蟲成災成害已成為許物昆蟲學家的研究熱點[6]。目前,主要采用防治策略為人工防治、物理機械防治、化學防治、生物防治等,但生物防治措施相比其他防治措施而言,具有高效低毒、綠色安全、不殺傷天敵等諸多優(yōu)點。現(xiàn)在,采用的生物防治措施主要是利用白僵菌、蘇金桿菌、信息素引導、招引益鳥、中藥材提取物苦參堿等多種方法對云南松毛蟲進行防治。有研究表明,白僵菌、蘇云金桿菌配制成不同濃度的懸浮液,飼喂感染3齡云南松毛蟲幼蟲,可在2~3d內便可有效殺滅云南松毛蟲幼蟲[7]。同時,有學者提出結合云南松毛蟲腸道有益腸道菌群,例如芽孢桿菌屬、假單胞菌屬、和克雷伯氏菌屬等多腸道有益菌群可作為生物防的新治思路。
4 結語
云南松毛蟲雖作為我國的一大森林害蟲,但從營養(yǎng)學和資源學的角度來看,它具有極大的開發(fā)利用價值。同時,云南松毛蟲腸道菌群資源豐富,具有多種產(chǎn)水解酶(纖維素酶、蛋白酶、脂肪酶等)的菌群資源。這些資源應用于實際工業(yè)生產(chǎn)中,將為飼料生產(chǎn)、食品加工、化學能源等提供有價值的微生物菌種資源。同時,腸道有益菌群有望為成云南松毛蟲新的防治作用靶標,進一步推動有效防治云南松毛蟲的防治策略蓬勃發(fā)展。
參考文獻
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