楊春媛，吳 迪，高 蘭

（吉林省白城市食品藥品檢驗(yàn)所，吉林 白城 137000）

洛伐他汀分散片為他汀類(lèi)調(diào)脂藥，系發(fā)酵產(chǎn)品，其發(fā)酵液含有其結(jié)構(gòu)、功能類(lèi)似的同類(lèi)化合物，現(xiàn)有提取、生產(chǎn)工藝下，洛伐他汀中時(shí)常含有一定雜質(zhì)[1-2]。本次研究主要探討HPLC測(cè)定制劑中有關(guān)物質(zhì)的方法，報(bào)道如下。

1 材 料

1.1 藥品與試劑

對(duì)照品來(lái)源于中國(guó)食品藥品檢定研究院、洛伐他汀原料藥、洛伐他汀分散片、水（超純水）、乙腈（色譜純）、磷酸（優(yōu)級(jí)純）。

1.2 儀器

LC-20AT型HPLC儀、X105型電子天平、BP211D型電子天平。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱Waters XTerra MS C18，參數(shù)為：250 mm×4.6 mm，5 μm，流動(dòng)相A、流動(dòng)相B分別為0.01%磷酸溶液、乙腈，梯度洗脫，柱溫、流速、檢測(cè)波長(zhǎng)、進(jìn)樣量分別為40℃、1.0 ml/min、238 nm、10 μl。洗脫程序?yàn)椋?min：流動(dòng)相A為40%，流動(dòng)相B為60%；24 min：流動(dòng)相A為5%，流動(dòng)相B為95%；34 min為流動(dòng)相A5%，流動(dòng)相B95%；40 min為流動(dòng)相A40%，流動(dòng)相B60%；50 min為流動(dòng)相A40%，流動(dòng)相B60%。

2.2 制備溶液

①供試品溶液：精密稱(chēng)取適量樣品，加入乙腈溶液，稀釋為1 ml：0.4 mg洛伐他汀的溶液，濾過(guò)，取續(xù)濾液得到。

②對(duì)照溶液：精密量?、僦兄苽涞? ml供試品溶液放置于100 ml容量瓶，乙腈稀釋至刻度，搖勻得到。

③空白輔料溶液：精密稱(chēng)取輔料適量，根據(jù)①中的方法制備空白輔料溶液。

2.3 輔料干擾

稱(chēng)取2.2中制備的①、③、⑤，根據(jù)2.1色譜條件測(cè)定并記錄色譜。結(jié)果顯示，供試品色譜與對(duì)照品色譜對(duì)應(yīng)位置的色譜峰相同，主成分、其它成分分離良好。

2.4 線性關(guān)系考察

依次精密量取0.05、0.1、0.5、1.0、1.5、2.0 ml對(duì)照品貯備液，放置于10ml量瓶，加入乙腈稀釋至刻度后搖勻，分別精密量取10 μL，色譜條件下檢測(cè)并記錄峰面積。橫坐標(biāo)質(zhì)量濃度（x，μg/ml），縱坐標(biāo)峰面積（y）線性回歸，得到回歸方程y=3.3×104x+8.0×10-9（r=0.9999）。質(zhì)量濃度線性范圍17.5～700 μg/ml。

2.5 精密度

精密量取對(duì)照品溶液，色譜條件下進(jìn)樣6次并記錄峰面積。洛伐他汀峰面積RSD=0.3%，儀器精密度良好。

2.6 穩(wěn)定性

分別精密量取2.2中①、⑤適量，室溫下放置0、2、4、6、8、12 h時(shí)分別根據(jù)色譜條件檢測(cè)并記錄峰面積。結(jié)果顯示，供試品溶液RSD=0.9，12 h內(nèi)供試品溶液質(zhì)量穩(wěn)定；對(duì)照品溶液的峰面積RSD=0.3，12h內(nèi)對(duì)照品溶液質(zhì)量穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性

取樣品細(xì)粉適量，共6份，根據(jù)2.2中①的方法制備供試品溶液，色譜條件下檢測(cè)，記錄峰面積。峰面積RSD=0.6%，該方法重復(fù)性良好。

2.8 回收率

根據(jù)處方量量取9份空白輔料，分別放置于50 mL量瓶，每3份加入4、5、6 mL對(duì)照品貯備液，乙腈稀釋搖勻，濾過(guò)，色譜條件下檢測(cè)續(xù)濾液，記錄峰面積，計(jì)算回收率。

2.9 測(cè)定樣品有關(guān)物質(zhì)

分別量取3批樣品適量，制備對(duì)照品溶液與供試品溶液，色譜條件下測(cè)定，采用自身對(duì)照法測(cè)定有關(guān)物質(zhì)，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 樣品有關(guān)物質(zhì)測(cè)定結(jié)果（n=3）

3 討 論

采取乙腈、0.01%磷酸溶液作為流動(dòng)相能夠避免緩沖鹽沉積引起的儀器損耗，同時(shí)，流動(dòng)相配置方便，這對(duì)提高檢驗(yàn)效率有利。

綜上所述，HPLC具有較好的準(zhǔn)確度、耐用性以及重復(fù)性，可用于洛伐他汀分散片質(zhì)量控制。