蔡 昱，駱 峰，韋宇翔，黃 飛，鄧 燕（通訊作者）

（1 廣西醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院超聲科 廣西 南寧 530007）

(2 廣西醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院普通外科 廣西 南寧 530007）

（3 廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科 廣西 南寧 530021）

肝細(xì)胞癌是威脅人類健康的最常見和最致命的癌癥之一。我國肝癌發(fā)病率及死亡率均較高，成為中國癌癥死亡的第三大疾病[1]。手術(shù)是肝癌治療的首選方法，但僅約有20 ～30%患者有手術(shù)的機(jī)會(huì)。近年來，局部消融治療已廣泛應(yīng)用于臨床治療，其中微波消融是我國常用的熱消融的方法，在局部療效、并發(fā)癥發(fā)生率以及遠(yuǎn)期生存率方面與射頻消融相比都無顯著差異[2]。但目前對(duì)于。本研究采用微波消融治療原發(fā)性肝癌患者，觀察肝癌患者術(shù)前術(shù)后外周血淋巴細(xì)胞亞群的變化以期評(píng)估機(jī)體的免疫功能。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2017 年10 月至2018 年10 月在我院進(jìn)行治療的肝癌患者100 例。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合原發(fā)性肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn)；②首次診斷，且無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移；③肝功能Child-Pugh 分級(jí)為A 級(jí)或B 級(jí)；④手術(shù)前未進(jìn)行過任何治療；⑤無其他嚴(yán)重的自身惡性疾病。根據(jù)治療方式分為手術(shù)組和微波消融組，每組各50 例，其中手術(shù)組男42 例，女8例，年齡（50.7±11.1）歲，微波消融組男45 例，女5 例，年齡（52.9±12.1）歲，兩組一般資料對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。所有患者對(duì)本研究均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 手術(shù)切除 按照徹底性和安全性的肝切除術(shù)原則，在全麻下開腹切除腫瘤，確保腫瘤邊界與切緣有1cm的正常肝組織。

1.2.2 微波消融 在高檔彩色超聲儀（佳能Aplio500，探頭頻率3MHz）引導(dǎo)下，用一次性醫(yī)用保護(hù)薄膜包裹探頭經(jīng)皮肝穿刺行肝癌MWA 治療，儀器采用南京康友醫(yī)療科技有限公司生產(chǎn)的微波消融儀，輸出功率0 ～100W，微波穿刺針型號(hào)KY-2450A，配水循環(huán)系統(tǒng)。根據(jù)腫瘤體積大小、位置及與重要組織關(guān)系確定消融方案。利用超聲造影對(duì)肝癌進(jìn)行診斷、輔助微波消融術(shù)前方案的制定，并對(duì)術(shù)后消融范圍進(jìn)行評(píng)估，確保消融達(dá)到安全邊界。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)室檢查 手術(shù)前1 天，手術(shù)后1 天，手術(shù)后一周以及手術(shù)后一個(gè)月采集患者的空腹靜脈血，2mL 全血用于細(xì)胞免疫功能的檢測(cè)。按照試劑操作說明加入抗體進(jìn)行染色，溶血處理后在Canto Ⅱ流式細(xì)胞儀上檢測(cè)CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4/CD8、γδT、NK 及B 細(xì)胞的變化情況。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS18.0 軟件分析，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料用均值±標(biāo)準(zhǔn)差描述，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用率（%），采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 表示具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組并發(fā)癥對(duì)比

所有病人均未發(fā)生皮膚燒傷及與治療相關(guān)的死亡，術(shù)后出現(xiàn)的具體并發(fā)癥情況見表1。實(shí)驗(yàn)所觀察的并發(fā)癥在兩組間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 手術(shù)組和微波消融組并發(fā)癥情況（例數(shù)）

表2 手術(shù)和微波消融治療前后細(xì)胞免疫功能評(píng)估

2.2 兩組治療前后細(xì)胞免疫功能評(píng)估

對(duì)于手術(shù)組，CD3+T 細(xì)胞和和CD3+CD4+T 細(xì)胞在術(shù)后第一天顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）,術(shù)后一個(gè)月基本恢復(fù)至術(shù)前水平。CD3+CD8+T 細(xì)胞和B 細(xì)胞術(shù)前和術(shù)后變化不大，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。γδT細(xì)胞呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì)，在術(shù)后一個(gè)月后顯著高于術(shù)前水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。對(duì)于微波消融組，微波消融后的各項(xiàng)指標(biāo)與術(shù)前差異不大，僅發(fā)現(xiàn)γδT 細(xì)胞呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì)，術(shù)后第七天和術(shù)后一個(gè)月顯著高于術(shù)前水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

3 討論

微波消融具有熱效率高、升溫速度快、高溫?zé)釄?chǎng)較均勻、凝固區(qū)壞死徹底、受血流影響小、安全、微創(chuàng)、療效確切等優(yōu)勢(shì)，在腫瘤治療領(lǐng)域的應(yīng)用和發(fā)展具有不錯(cuò)的前景。在此次研究中，我們發(fā)現(xiàn)對(duì)于接受傳統(tǒng)手術(shù)的肝癌患者，其術(shù)后CD3+T 細(xì)胞和CD3+CD4+T 細(xì)胞在術(shù)后第一天顯著下降，術(shù)后一個(gè)月基本恢復(fù)至術(shù)前水平。而那些接受微波消融的患者，微波消融后的各項(xiàng)指標(biāo)與術(shù)前差異不大，僅發(fā)現(xiàn)γδT 細(xì)胞呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì)。從這些結(jié)果我們不難看出，由于手術(shù)是一個(gè)開創(chuàng)性的操作，機(jī)體對(duì)于這種操作出現(xiàn)強(qiáng)烈的應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致細(xì)胞免疫功能水平出現(xiàn)較大的波動(dòng)。而微波消融只是在腫瘤的局部，先凝固阻斷腫瘤的主要滋養(yǎng)血管，再滅活腫瘤，且微波消融的時(shí)間一般較短，不易引起機(jī)體的強(qiáng)烈應(yīng)激反應(yīng)，所以微波消融前后，機(jī)體的細(xì)胞免疫功能水平變化不大[3]。且術(shù)后1 個(gè)月后CD4+/CD8+比值顯著高于術(shù)前水平。CD4+/CD8+的比值的升高說明機(jī)體的免疫功能得到了恢復(fù)，有利于腫瘤的清除。本研究還發(fā)現(xiàn)無論是在手術(shù)組還是微波消融組，γδT 細(xì)胞均呈現(xiàn)出逐漸升高的趨勢(shì)。我們推測(cè)，肝癌患者腫瘤負(fù)荷時(shí)，γδT 細(xì)胞可能聚集到肝癌組織中有利于機(jī)體的抗腫瘤作用。當(dāng)機(jī)體腫瘤消除后，原本腫瘤組織周圍的γδT 細(xì)胞又釋放進(jìn)入外周血中，說明γδT 具有一定的抗腫瘤作用[4-5]。本研究中微波消融術(shù)后有13 例患者出現(xiàn)發(fā)熱，原因可能為消融治療后凝固性壞死的組織形成的內(nèi)源性致熱物質(zhì)被吸收，此外也與微波消融持續(xù)時(shí)間較長以及多個(gè)腫瘤同時(shí)消融有關(guān)。

綜上所述，微波消融是一種安全有效的肝癌治療方法，其對(duì)肝癌患者的免疫功能影響不大，有利于患者術(shù)后的恢復(fù)。