韓永平 韓 勇 劉玉潔

1.山東省日照市五蓮縣畜牧獸醫(yī)管理服務(wù)中心中至畜牧獸醫(yī)站，山東日照 262300；2.山東省日照市畜牧獸醫(yī)管理服務(wù)中心，山東日照 276800

豬偽狂犬病是由偽狂犬病毒所引起的豬的急性傳染病，該病流行特點(diǎn)是暴發(fā)性，且新生仔豬、斷奶仔豬、成年豬等不同階段、不同類型的豬都易感[1]。偽狂犬病毒是垂直傳播疫病，不僅引起母豬繁殖障礙，還能引起仔豬大量死亡，嚴(yán)重危害畜牧業(yè)。偽狂犬病是需要養(yǎng)殖場（戶）防控凈化的一種主要疫病，近年來越來越受到養(yǎng)殖場（戶）重視。為做好豬偽狂犬病的防控，山東省日照市畜牧獸醫(yī)管理服務(wù)中心結(jié)合春季防疫，抽檢養(yǎng)殖場（戶）8 個(gè)，了解豬群偽狂犬病抗體水平，為科學(xué)防控豬偽狂犬病提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)、方法

2019年5月10-20日，本試驗(yàn)在山東省日照市畜牧獸醫(yī)管理服務(wù)中心實(shí)驗(yàn)室開展，方法采用豬偽狂犬病抗體ELISA。

1.2 血清樣品

對全市8 家養(yǎng)豬場（戶）進(jìn)行抽樣檢測，共抽查280 份血清。每個(gè)豬場采集全血不少于5 mL，分離的血清不少于1 mL。按照群內(nèi)免疫合格率90%、置信水平95%、可接受誤差10%，每個(gè)場點(diǎn)采集樣品35 份。2019年5月抽檢8 家，共抽查280 份血清，具體抽樣情況見表1。

表1 日照市養(yǎng)豬場（戶）偽狂犬病監(jiān)測抽樣情況

1.3 檢測試劑

豬偽狂犬抗體ELISA 檢測試劑盒購自武漢科前生物公司，批號為190313。

1.4 儀器設(shè)備

酶標(biāo)儀為美國MD 生產(chǎn)，型號為SpectraMax 190；恒溫培養(yǎng)箱為上海迅播；移液器為百得公司生產(chǎn)。

1.5 豬偽狂犬抗體的檢測

每孔加入100 μL 樣品，貼上膜后37 ℃作用45 min，洗板機(jī)洗劑5 次；加入酶標(biāo)物，37 ℃作用20 min，洗板機(jī)洗劑5 次，加入底物反應(yīng)10 min；最后加入終止液，630 nm 測OD 值。

結(jié)果判定：陰性對照孔－陽性對照孔的OD 值＞0.3 結(jié)果成立。S 為樣品OD 值，N 為陽性對照孔的OD 值。樣品OD 值/陽性對照孔的OD 值≤0.3 為陽性，＞0.3 判為陰性。

2 結(jié)果與分析

檢測結(jié)果顯示（表2）：血清檢測280 份，其中免疫合格（判定結(jié)果為陽性）244 份，合格率87.1%，可以看出豬偽狂犬病抗體總體水平＞80%。

表2 日照市養(yǎng)豬場（戶）偽狂犬病抗體檢測

3 討 論

3.1 檢測總體情況

全市共抽檢場（戶）8 個(gè)，其中種豬場1 個(gè)，規(guī)模場5 個(gè)，養(yǎng)殖戶2 個(gè)，280 份樣品，244 份合格，合格率87.1%，檢測表明日照市豬偽狂犬病抗體總體水平較好。

3.2 豬偽狂犬病風(fēng)險(xiǎn)評估

根據(jù)檢測結(jié)果，日照市豬偽狂犬病抗體水平高達(dá)87.1%，發(fā)生豬偽狂犬病的風(fēng)險(xiǎn)較低。種豬場和規(guī)模場免疫效果較好，達(dá)到90%以上，能抵抗病毒的入侵。但一般散養(yǎng)戶由于免疫次數(shù)較少，合格率僅有72.9%，存在一定的疫情風(fēng)險(xiǎn)。

3.3 抽樣方法的選擇

本次試驗(yàn)抽樣方法為先抽取場點(diǎn)，在場點(diǎn)內(nèi)再抽取個(gè)體的抽樣方式開展監(jiān)測采樣。但是由于資金和人力的限制，養(yǎng)殖場抽樣數(shù)量較少，不能最大限度地反映全市豬偽狂犬病免疫抗體的水平。