楊小燕， 文麗， 張桂麗

（深圳市龍華區(qū)人民醫(yī)院 婦產(chǎn)科， 廣東 深圳518109）

妊娠期糖尿病 （GDM） 是指孕婦孕前糖代謝正常， 孕期發(fā)生糖耐量異常的綜合性疾?。?］。 GDM 一般無顯著的臨床癥狀，血糖升高程度也較低， 但子宮內(nèi)的高血糖環(huán)境會(huì)使孕婦發(fā)生產(chǎn)后出血、 子癇等并發(fā)癥［2］， 還會(huì)導(dǎo)致胎兒發(fā)育過度、 體重增加。 導(dǎo)致GDM 的主要因素是產(chǎn)婦年齡過高、 孕前身體質(zhì)量過高、 不良孕育史及糖尿病家族史［3］， 但與此有關(guān)的機(jī)制研究卻很少。 本研究探討GDM 孕婦胎盤組織Akt 和GLUT-1 的表達(dá)與新生兒體重的相關(guān)性， 現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取我院2017 年9 月至2018 年2 月收治的40例GDM 孕婦為研究組， 平均年齡 （30.16 ± 4.36） 歲， 體重56.5 ～78.0 kg， 平均體重 （69.8 ± 5.3） kg。 另選取40 例同期分娩的健康孕婦作為對(duì)照組， 平均年齡 （28.36 ± 4.12） 歲， 體重54.5 ～75.0 kg， 平均體重 （67.7 ± 5.6） kg。 兩組的一般資料比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 （P ＞0.05）。 兩組孕婦均知情同意， 孕24 ～28 周行OGTT 實(shí)驗(yàn)。

1.2入選標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)： ①符合國際妊娠糖尿病研究協(xié)會(huì)（IADPSG） 推薦的GDM 診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］； ②單胎； ③待產(chǎn)天數(shù)正常。 排除標(biāo)準(zhǔn)： ①孕前心、 肺、 腎等功能不全； ②死胎或巨大兒病史； ③備孕或懷孕期間服用過干擾糖代謝藥物， 代謝性疾??； ④子癇等并發(fā)癥。

1.3 方法①孕期基本體征： 以邁瑞Mindray BS-220 全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)兩組孕婦的空腹血糖 （FPG）、 空腹胰島素（FINS）； 檢測(cè)糖化血紅蛋白 （HbA1c）， 記錄孕期增重， 計(jì)算其身體質(zhì)量指數(shù) （BMI）， BMI ＝體重 （kg） ／身高的平方 （m2）。②檢測(cè)兩組胎盤組織中Akt、 GLUT-1 的表達(dá)： 采用免疫組化法檢測(cè)胎盤組織中的Akt、 GLUT-1 的表達(dá)水平， 取分娩后1.0 cm × 1.0 cm × 1.0 cm 母體胎盤組織進(jìn)行固定、 包埋、 切片、 切片脫蠟水化、 抗原修復(fù)、 脫水等操作， 透明后進(jìn)行封片， 鏡檢。 以Image J 分析免疫組化結(jié)果， 計(jì)算平均光密度值。 ③Western blot 檢測(cè)Akt 磷酸化水平及GLUT-1 蛋白的表達(dá)： 取胎盤組織60 mg， 通過Western 細(xì)胞裂解液離心獲得上清液， 按照BCA 試劑盒所示步驟進(jìn)行， 檢測(cè)Akt 和GLUT-1 蛋白表達(dá)，然后采用BandScan 5.0 分析獲得的目的蛋白條帶。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 24.0 統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)， 計(jì)量資料以±s 表示， 比較采用t 檢驗(yàn)， 以Pearson 法進(jìn)行相關(guān)性分析，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組孕婦的基本資料比較研究組的孕期BMI、 孕期增重、FPG、 FINS、 HbA1c 水平均高于對(duì)照組 （P＜0.05）。 見表1。

表1 兩組孕婦的基本資料比較 （±s）

表1 兩組孕婦的基本資料比較 （±s）

注： 與對(duì)照組比較， *P ＜0.05。

HbA1c（%）研究組 40 24.59±4.23* 8.71±1.08* 4.49±0.71* 22.45±1.58* 7.23±2.16*對(duì)照組 40 22.49±4.72 7.01±0.99 3.54±0.62 10.31±1.06 5.19±1.58組別 n 孕期BMI（kg／m2）孕期增重（kg）FPG（mmol／L）FINS（μIU／mL）

2.2 兩組孕婦胎盤組織中Akt 和GLUT-1的表達(dá)情況與新生兒出生體重比較兩組孕婦胎盤組織中Akt 和GLUT-1 均有呈棕黃色顆粒的陽性細(xì)胞。 研究組陽性顆粒著色較淺且顆粒小， 平均光密度值均顯著低于對(duì)照組 （P＜0.05）。 研究組的新生兒出生體重高于對(duì)照組 （P＜0.05）。 見表2。

表2 兩組孕婦胎盤組織中Akt 和GLUT-1 的表達(dá)情況與新生兒出生體重比較 （±s）

表2 兩組孕婦胎盤組織中Akt 和GLUT-1 的表達(dá)情況與新生兒出生體重比較 （±s）

注： 與對(duì)照組比較， *P ＜0.05。

組別 n Akt 平均光密度值 GLUT-1 平均光密度值 新生兒出生體重（kg）研究組 40 79.65±3.15* 112.16±2.64* 3.89±0.42*對(duì)照組 40 94.86±2.49 135.47±3.26 2.79±0.61

2.3 兩組孕婦胎盤組織中Akt、 GLUT-1與新生兒體重的相關(guān)性Pearson 相關(guān)性分析顯示， Akt 表達(dá)與新生兒體重呈負(fù)相關(guān)（r ＝-0.697， P ＝0.035）， GLUT-1 表達(dá)與新生兒體重也呈負(fù)相關(guān)性 （r ＝-0.768， P ＝0.029）。 見表3。

表3 兩組孕婦胎盤組織中Akt、 GLUT-1 與新生兒體重的相關(guān)性

3 討論

胰島素抵抗是GDM 的標(biāo)志性特征， 胰島素信號(hào)通路改變及葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)異常是胰島素抵抗的原因［5］。 研究［6］表明，GLUT 異常表達(dá)與GDM 的發(fā)生具有緊密的聯(lián)系， miR-518d 可能通過抑制GLUT1、 GLUT4 表達(dá)使葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)發(fā)生變化， 從而產(chǎn)生胰島素敏感性。 張莉等［7］的研究表明， AKT-mTOR 信號(hào)通路可影響蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)功能， 從而影響胎兒生長發(fā)育， 宮內(nèi)高血糖環(huán)境可能通過抑制AKT-mTOR 信號(hào)通路改變胎兒發(fā)育軌跡。 胎盤是母親和嬰兒之間進(jìn)行物質(zhì)傳遞的主要通道， 而葡萄糖是胎兒發(fā)育過程中不可或缺的一類營養(yǎng)物質(zhì)［8］。 作為胰島素信號(hào)通路中的關(guān)鍵因子， Akt 和GLUT-1 在機(jī)體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)方面發(fā)揮極大的作用［9］。 Akt 又稱為PKB， 是機(jī)體內(nèi)一種極其重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑， 其能在胰島素刺激下磷酸化，并在一系列生化反應(yīng)下激活GLUT， 進(jìn)行葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)［10］。 作為參與葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)的GLUT-1， 在GLUT 中具有最豐富的表達(dá)量且分布最為廣泛， 主要存在于微絨毛側(cè)的細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞、 合體滋養(yǎng)細(xì)胞［11］， 是胎盤中最主要的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)載體， 在葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)中發(fā)揮最主要的作用［12］。 GDM 孕婦血糖升高會(huì)影響這兩種信號(hào)因子的合成， 造成表達(dá)水平降低， 從而導(dǎo)致其對(duì)胰島素敏感性降低， 引發(fā)胰島素抵抗。 本研究結(jié)果顯示， 與對(duì)照組比較， 研究組的孕期BMI、 孕期增重、 FPG、 FINS、 HbA1c、 新生兒體重較高， Akt、 GLUT-1 表達(dá)較低， 且Akt 和GLUT-1 表達(dá)均與新生兒體重呈負(fù)相關(guān)， 表明Akt 和GLUT-1 表達(dá)水平的下降可能是新生兒體重上升的原因。

綜上所述， 妊娠期孕婦胎盤組織中Akt 和GLUT-1 表達(dá)水平的下降可能是造成新生兒體重上升的原因， 其機(jī)制可能是GDM 孕婦出現(xiàn)胰島素抵抗， 從而影響Akt 和GLUT-1 的表達(dá)，使胎兒蛋白質(zhì)及脂肪的合成過量， 體重上升。