宋文芳

摘 要：本文建立了一種同時測定辣椒中氯蟲苯甲酰胺和溴氰蟲酰胺殘留的高效液相色譜方法。辣椒樣本采用丙酮提取，鹽析后取上清液，用GCB/PSA復合固相萃取柱進行凈化，經濃縮后用甲醇復溶，待測。結果表明，這2種被測物在0.60～14.40 mg·mL-1范圍內線性關系良好，相關系數(shù)r（均）>0.999;這2種被測物在3個加標水平下的平均回收率為62.2%～95.1%，日內和日間精密度均≤14.9%。該法靈敏度高、準確性好、成本較低，可用于辣椒中這2種農藥殘留的同時檢測。

關鍵詞：氯蟲苯甲酰胺;溴氰蟲酰胺;高效液相色譜法;殘留

Abstract：A method was developed for the simultaneous determination of chlorantraniliprole and cyantraniliprole residues in capsicum by high performance liquid chromatography.The sample was extracted with acetone. The supernatant was purified by GCB/PSA solid phase extraction column after salting out. After concentration， it was reconstituted with methanol， waiting for the test. The calibration curves of the two compounds were linear in the range of 0.60～14.40 mg·mL-1（correlation coefficient （r） >0.999）. The recoveries were 62.2%～95.1% in the three spiked levels，and the intra-day and inter-day precisions were no more than 14.9%. The method is high sensitivity， good accuracy and low cost， and can be used for the simultaneous determination of chlorantraniliprole and cyantraniliprole residues in capsicum.

Key words：Chlorantraniliprole; Cyantraniliprole; Residue; HPLC

氯蟲苯甲酰胺是杜邦公司研發(fā)的第一代魚尼丁受體抑制劑類農藥殺蟲劑，于2000年開發(fā)，2007年正式投放市場，對鱗翅目的夜蛾科、螟蛾科、蛀果蛾科等均有很好的控制效果[1]。溴氰蟲酰是由科研人員對氯蟲苯甲酰胺苯環(huán)上的各種極性基團進行改變調整，用氰基替代了氯基，活性和內吸性都有所提高，除了能防治鱗翅目害蟲外，還可用于防治半翅目和鞘翅目害蟲，更具有殺蟲廣譜性[2]。

國內有關氯蟲苯甲酰胺果蔬殘留量測定主要采用QuEChERS[3]或固相萃取法[4]這2種前處理技術聯(lián)用色譜-質譜檢測技術[5]來進行測定，而有關溴氰蟲酰胺果蔬殘留量測定大多是田間防效作用的研究[6-7]，對在農作物中殘留量測定的報道較少。色譜-質譜聯(lián)用儀價格和維護費用高，方法較難推廣。本文擬采用固相萃取法聯(lián)用高效液相色譜法實現(xiàn)對辣椒中氯蟲苯甲酰胺和溴氰蟲酰胺這2種殺蟲劑的殘留進行測定。

1 材料與方法

1.1 儀器與設備

P230高效液相色譜儀（依利特）;RE-2000A旋轉蒸發(fā)器（上海亞榮）;HP-5011氮吹儀（上海濟成）;HX-12A固相萃取裝置（恒信科技）;AB204-S分析天平（美國梅特勒）。

1.2 標準溶液的配制

精密稱取氯蟲苯甲酰胺和溴氰蟲酰胺這2種標準品，用DMF溶解并稀釋成0.6 mg·mL-1的標準儲備液。將上述儲備液用甲醇稀釋，配制成氯蟲苯甲酰胺濃度為12.00 mg·mL-1、溴氰蟲酰胺濃度為3.00 mg·mL-1的混合標準溶液，置于0～4 ℃冰箱避光保存。

1.3 樣品前處理

辣椒10個，切成小片，放入搗碎機中搗碎，再用組織勻漿機打漿，稱取6 g勻漿樣品于50 mL塑料離心管中，加入20 mL丙酮溶液，于振蕩器上振蕩提取3 min。加入2 g氯化鈉，再振蕩提取1 min，取全部上清液于50 ℃水浴旋轉蒸發(fā)濃縮至近干，用2 mL甲醇-水（體積比70∶30）復溶。

將上述樣品提取液加入事先活化的小柱，用8 mL甲醇-水（體積比70∶30）溶液進行洗脫，收集流出液，再用4 mL甲醇-水（體積比70∶30）溶液分2次洗滌燒瓶，將洗滌液注入萃取小柱，收集并合并流出液，于50 ℃水浴旋轉蒸發(fā)濃縮近干，用氮氣吹干。用甲醇溶液定容至1 mL，過0.45 mm濾膜，待測。

1.4 分析條件

色譜柱：ODS-BP（4.6 mm×200 mm，5 mm）;柱溫：25 ℃;流動相：甲醇-水（體積比60∶40）;檢測波長：268 nm;流速：1.2 mL·min-1。

2 結果與分析

2.1 樣品前處理的優(yōu)化

2.1.1 固相萃取柱的選擇

本研究考察4種不同固相萃取柱，分別為500 mg/6 mL規(guī)格的C18、NH2、GCB和500 mg/500 mg/6 mL GCB/PSA固相復合萃取柱。結果表明，GCB/PSA復合固相萃取柱凈化效果最好，處理后基體中干擾組分明顯減少。因此，本文選用GCB/PSA復合固相萃取柱作為最終的SPE柱。

2.1.2 洗脫劑種類的選擇

本研究選取了丙酮-水、乙腈-水、甲醇-水和二甲基甲酰胺-水作為洗脫劑。通過對凈化后的加標樣品溶液按1.4項下色譜條件進行測定，考察這4種洗脫劑對SPE萃取效果的影響。結果表明，用甲醇-水作為洗脫劑時，這2種殺蟲劑的回收率較好。二甲基甲酰胺-水作為洗脫劑時，較多基體雜質也被洗脫下來，凈化效果較差。因此，本研究采用甲醇-水（體積比70∶30）作為最終洗脫溶劑。

2.2 方法學考察

2.2.1 線性范圍、檢出限和定量限

在1.4項條件下，對氯蟲苯甲酰胺和溴氰蟲酰胺質量濃度分別為0.72、3.60、6.00、12.00 mg·mL-1和14.40 mg·mL-1和0.60、3.00、4.80、6.00 mg·mL-1和7.20 mg·mL-1的標準溶液進行測定（見表1）。結果表明，這2種化合物線性關系良好，相關系數(shù)（r）均>0.999，氯蟲苯甲酰胺和溴氰蟲酰胺的儀器檢出限（LOD）分別為4.2 mg·kg-1和2.8 mg·kg-1，定量限（LOQ）分別為13.3 mg·kg-1和7.7 mg·kg-1。

2.2.2 回收率

氯蟲苯甲酰胺在0.03、0.30、0.60 mg·kg-1這3個質量濃度添加水平下，回收率為62.2%～92.5%（見表2），溴氰蟲酰胺在0.05、0.50、1.00 mg·kg-1這3個質量濃度添加水平下，回收率為62.9%～95.1%（見表3）。表明本法在樣品前處理及測定中有較好的回收率，適用于辣椒樣本中這2種農藥殘留量的測定。

2.2.3 日內和日間精密度

在低、中、高3個濃度水平進行加標試驗，每個濃度分別設定5個平行樣，連續(xù)測定3 d。氯蟲苯甲酰胺日內精密度為4.1%～10.9%（n=5），日間精密度為3.9%～11.2%（n=3）。溴氰蟲酰胺日內精密度為7.6%～12.4%（n=5），日間精密度為7.4%～14.9%（n=3）（見表4）。

2.2.4 實際樣品測定

在本地菜場購買了8份辣椒，對其進行測定，結果均未檢出。可見，目前市場上銷售的辣椒，這2種農藥的殘留量均控制的比較好。

3 結論

本文建立了一種同時測定氯蟲苯甲酰胺和溴氰蟲酰胺這2種鄰甲酰胺基苯甲酰胺類農藥在辣椒中殘留的高效液相色譜法。該法靈敏度高、準確性好、成本較低，可用于辣椒中這2種農藥殘留的同時檢測。

參考文獻：

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[2]周 操，楊 航，楊 洪，等.溴氰蟲酰胺對白背飛虱室內敏感種群的亞致死效應[J].農藥學學報，2016，18（5）：651-655.

[3]楊文迪.改進QuEChERS技術結合LC-MS/MS測定果蔬中農藥多殘留[D].泰安：山東農業(yè)大學，2017.

[4]馬 琳，陳建波，趙 莉.固相萃取-超高效液相色譜-串聯(lián)質譜法同時測定果蔬中6種酰胺類農藥殘留量[J].色譜，2015，33（10）：1019-1025.

[5]朱建華，趙 莉.用液相色譜串聯(lián)質譜法測定果蔬中的唑蟲酰胺、氟啶蟲酰胺、氯蟲苯甲酰胺及氟蟲雙酰胺殘留[J].分析測試學報，2011，30（6）：646-650.

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[7]丁金鳳，徐春梅，張 薇，等.QuEChERS-超高效液相色譜-串聯(lián)質譜法測定玉米植株和土壤中溴氰蟲酰胺及其代謝物殘留[J].農藥學學報2018，20（1）：83-89.