曾成龍 朱繼鋒 朱冠男 馮 婷 閆 丹 趙小東 王勝春

第四軍醫(yī)大學(xué)西京皮膚醫(yī)院，陜西西安，710032

人乳頭瘤病毒(human papilloma virus，HPV)是一種小分子雙鏈DNA病毒，對人皮膚和黏膜有高度親嗜性，根據(jù)編碼衣殼蛋白L1的基因序列不同確立HPV基因型別，目前已發(fā)現(xiàn)該病毒有200余種亞型[1]。不同型別的HPV感染可以導(dǎo)致不同的臨床病變[2]，其中42種基因型與生殖道疾病有關(guān)，HPV不僅是尖銳濕疣(condyloma acuminate，CA)的病原體，而且還與多種惡性腫瘤及癌前病變密切相關(guān)，研究顯示，女性HPV感染與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)[3]，明確HPV16，18，31，33，35及58型等高危亞型的感染是女性宮頸癌的主要病因[4]，男性作為HPV傳播的重要“載體”[5]，但男性HPV感染的相關(guān)研究目前較少。掌握男女HPV感染狀況和基因亞型的分布特征，對CA的流行病學(xué)研究及其防治均有重要的臨床意義，本文對此進(jìn)行回顧分析。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2010年9月至2019年9月就診于我院性病門診CA患者。入選標(biāo)準(zhǔn)：①參照中國疾病預(yù)防控制中心制定的《性傳播疾病臨床診療指南》 中CA的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②HPV基因分型檢測陽性。排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床基本資料缺失；②其它HPV相關(guān)感染疾?。虎巯到y(tǒng)免疫性疾病患者。

1.2 標(biāo)本采集 充分暴露疣體部位，隨機(jī)選取一處，先用生理鹽水清洗，在皮損處消毒，用消毒活檢鉗夾取疣體組織置于標(biāo)本保存液，-20℃冰箱保存。

1.3 試劑和儀器 HPV基因分型檢測試劑盒由深圳亞能生物技術(shù)有限公司提供，可檢測包括18種高危型(HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，53，56，58，59，66，68，73，82，83)及5種低危型(HPV6，11，42，43，81)共23種HPV基因型。TL988實時熒光定量PCR儀由西安天隆科技有限公司提供，F(xiàn)YY-3型分子雜交儀由江蘇興化市分析儀器廠提供。

1.4 實驗方法 本研究采用PCR反向分子雜交法進(jìn)行HPV基因分型檢測，實驗步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，實驗全程做好質(zhì)量控制。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 19.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)匯總與統(tǒng)計分析，計數(shù)資料以率表示，男性和女性患者間HPV多重感染率和高危型感染率的比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 年齡分布 共入選8876例，男5717例(64.41%)，女3159例(35.59%)，年齡8個月～84歲，平均(32.83±11.15)歲。男女患者年齡分布主要集中在20～49歲，以20～29歲最多，各占41.68%和43.40%，見表1。

2.2 HPV基因型別比較 8876例患者共檢測出23種基因型，以HPV6、11為主要感染的亞型，其比率分別為61.55%和32.92%。排名前十位的HPV基因型從高到低依次為：HPV6，11，16，43，42，52，59，58，51和18型(男性)；HPV6，11，16，52，43，51，58，56，53和59型(女性)。比較男女各種HPV基因型的檢出率，男性HPV11、45和73型這三種檢出率高于女性，其它二十種型別則相反，且除HPV6，42，43，45，73，82和83外均有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)， 見表2。

2.3 HPV基因型多重感染比較 CA患者感染以單一型別感染為主，共5282例(59.51%)，多重型別感染次之為3594例(40.49%)。其中，女性多重(二重及以上)型別的感染率顯著高于男性，具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.0001)， 見表3。

表1 5717例男性和3159例女性CA患者年齡分布情況

表2 5717例男性和3159例女性CA患者HPV基因型檢出情況

表3 5717例男性和3159例女性CA患者HPV基因型多重感染比較

表4 5717例男性和3159例女性CA患者HPV基因型致癌性比較

2.4 HPV基因型的致癌性比較 CA患者感染以低危型感染為主，共感染5434例(61.22%)，高危型感染次之為3442例(38.78%)。其中，女性高危型的感染率顯著高于男性，具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.0001)，見表4。

3 討論

CA患者感染的HPV亞型較多，且不同基因型可能會影響到CA的發(fā)病特點和預(yù)后轉(zhuǎn)歸[6]，目前大多數(shù)研究集中在女性HPV感染及其相關(guān)的宮頸病變問題上[7,8]，而對男性HPV感染的相關(guān)問題關(guān)注較少[9]，缺乏其大樣本的HPV感染研究資料，文獻(xiàn)顯示男性患病率高于女性患者[10]，臨床中男性CA患者多于女性，故有必要將男性和女性進(jìn)行比較分析研究其HPV感染特點。

本研究結(jié)果顯示男性和女性HPV感染特點不完全相同，主要表現(xiàn)在：①男性和女性均檢測出23種HPV基因型，但感染的HPV基因型頻數(shù)不同，從兩者排名前十位頻數(shù)分布表可以看出，除前三名(均為6、11和16)順序一致外，從第四名至十名，型別種類、頻數(shù)和檢出率則不相同，男性HPV11、45和73型的檢出率要高于女性，這與Komlos等[11]報道一致，其它型別則女性高于男性，且23種型別當(dāng)中除HPV6，42，43，45，73，82和83外均有統(tǒng)計學(xué)差異，此點提示HPV疫苗對男性和女性的覆蓋率可能不同[12]。②男性和女性感染的年齡段分布大致相同，均主要集中在20～49歲，以20～29歲最多。③男性和女性HPV基因型多重感染和致癌性不全相同，總體上兩者均以單一和低危型感染為主，以多重、低高混合型和高危型感染次之[13]，男女比較顯示男性單一和低危型的感染率高于女性，女性多重、高危型的感染率高于男性，這與其它研究的結(jié)果基本一致[14,15]。男性和女性HPV感染特點不完全相同的原因可能是由于男女性在HPV感染狀態(tài)、機(jī)體免疫系統(tǒng)等方面存在差異，這是否與女性生殖道特殊的生理結(jié)構(gòu)及生理環(huán)境有關(guān)尚待進(jìn)一步研究。

本研究女性多重、高危型的感染率高于男性，有文獻(xiàn)報道高危型HPV感染是尖銳濕疣患者復(fù)發(fā)重要原因[16]，臨床上要重視女性CA復(fù)發(fā)的問題和加強(qiáng)女性的隨訪管理，正常情況下所有CA患者治療后的最初3個月，至少每2周隨診1次，隨訪至末次治療后6個月[17]。鑒于本研究結(jié)果，筆者建議女性的隨訪期可延長至1～2年，必要時做HPV檢測和宮頸細(xì)胞學(xué)的檢查。