馮剛 李向陽
摘要: 目的 探討蝦青素油對小鼠免疫調(diào)節(jié)作用。方法 測定刀豆蛋白 A(ConA)誘導的小鼠脾淋巴細胞增殖能力,二硝基氟苯(DNFB)誘導的小鼠遲發(fā)性變態(tài)反應 (DTH),小鼠血清溶血素含量,小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞功能,小鼠碳廓清能力,抗體生成細胞能力,小鼠自然殺傷細胞(NK)活性指標。結(jié)果與空白對照組比較,蝦青素油中、高劑量組小鼠刀豆蛋白 A(ConA)誘導的脾淋巴細胞增殖能力(0D值)顯著增強(P<0.05) ,血清溶血素含量顯著升高(P<0.05),小鼠碳廓清吞噬指數(shù)顯著提高(P<0.01);高劑量組小鼠二硝基氟苯(DNFB)誘發(fā)的DTH顯著增強(P<0.05);蝦青素油各劑量組小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬率、吞噬指數(shù)未明顯變化(P<0.05),抗體生成細胞能力未明顯增強(P<0.05),自然殺傷(NK)細胞活性未明顯增強(P>0.05)。結(jié)論蝦青素油具有增強免疫功能的作用。
關(guān)鍵詞: 蝦青素油; 細胞免疫; 體液免疫;NK細胞
雨生紅球藻屬于綠藻門(Chlorophata)綠藻綱(hlorophyceae)團藻目(Volvocales)紅球藻科(Haematococcaccae)紅球藻屬(Haematococcus,Ag)。雨生紅球藻細胞內(nèi)天然蝦青素的含量相對較高,可達干重的2%~5%[1]。蝦青素是一種葉黃素類胡蘿卜素。是迄今為止人類發(fā)現(xiàn)的自然界最強的抗氧化劑之一,其清除自由基的能力是天然維生素E 的1000倍,是天然β-胡蘿卜素的10倍,是番茄紅素的7倍。
通過整體實驗觀察,發(fā)現(xiàn)蝦青素等類胡蘿素均顯著促進胸腺依賴抗原(TD-Ag)刺激時的抗體產(chǎn)生,分泌IgM和IgG的細胞數(shù)增加[2]。Jyonochi等[3]研究了蝦青素和β-胡蘿素2種類胡蘿素對小鼠淋巴細胞體外組織培養(yǎng)系統(tǒng)的免疫調(diào)節(jié)效應,結(jié)果表明類胡蘿素的免疫調(diào)節(jié)作用與有無VE活性無關(guān)。蝦青素的抗氧化作用能夠保持機體的自穩(wěn)態(tài),從而保證細胞間隙的連接通訊正常發(fā)揮作用,進而促進淋巴細胞間的相互作用并分泌有免疫活性的細胞因子,最終表現(xiàn)為機體免疫能力的增強[4]。今年來從雨生紅球藻中提取蝦青素得到蝦青素油,蝦青素油用于營養(yǎng)保健類產(chǎn)品開發(fā)研究逐漸增多。
本實驗研究蝦青素油對小鼠免疫調(diào)節(jié)作用。
1 材料與方法
1.1動物SPF級昆明種雌性小鼠160只,體質(zhì)量18~22g,湖北省實驗動物研究中心提供。
1.2受試物 蝦青素油 批號20180124J,由上海萊雀生物科技有限公司提供,蝦青素含量5.10%
1.3主要儀器 動物天平、分析天平、水浴鍋、酶標儀、96孔細胞培養(yǎng)板、離心機、游標卡尺等
1.4實驗分組及劑量 160只小鼠隨機分為四個大組,分別進行遲發(fā)型變態(tài)反應、抗體生成細胞、血清溶血素;小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞;小鼠碳廓清;小鼠脾淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗、NK細胞活性實驗。四個大組再分成4個小組,蝦青素油高、中、低劑量組和對照組。劑量組分別灌胃蝦青素油8.3mg/kg·BW、17mg/kg·BW和51mg/kg·BW,對照組灌胃等體積大豆油。每日1次,灌胃體積為0.1ml/10g,連續(xù)30天。
2 方法
動物適應環(huán)境5天后,三個劑量組分別灌胃蝦青素油8.3mg/kg·BW、17mg/kg·BW和51mg/kg·BW,對照組灌胃等體積大豆油。每日1次,灌胃體積為0.1ml/10g,連續(xù)30天后處死小鼠。按照中國衛(wèi)生部《保健食品審評與評價技術(shù)規(guī)范》2003版中“增強免疫功能實驗檢測方法”有關(guān)規(guī)定進行遲發(fā)型變態(tài)反應、抗體生成細胞、血清溶血素;小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞;小鼠碳廓清;小鼠脾淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗、NK細胞活性實驗。
數(shù)據(jù)處理 采用 SAS 軟件對數(shù)據(jù)進行分析,計量資料以均數(shù)±標準差表示,行t 檢驗。P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。
3實驗結(jié)果
結(jié)果見表1至表3。各組動物間體重增重、胸腺/體質(zhì)量比值和脾臟/體質(zhì)量比值無明顯差異(P>0.05)。與空白對照組比較,蝦青素油中、高劑量組小鼠刀豆蛋白 A(ConA)誘導的脾淋巴細胞增殖能力(0D值)顯著增強(P<0.05) ,血清溶血素含量顯著升高(P<0.05),小鼠碳廓清吞噬指數(shù)顯著提高(P<0.01),高劑量組小鼠二硝基氟苯(DNFB)誘發(fā)的DTH 顯著增強(P<0.05);蝦青素油各劑量組小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬率、吞噬指數(shù)未明顯變化(P<0.05) ,抗體生成細胞能力未明顯增強(P<0.05),自然殺傷(NK)細胞活性未明顯增強( P>0.05)。
3討論
本實驗顯示,各組動物間體重增重、胸腺/體質(zhì)量比值和脾臟/體質(zhì)量比值無明顯差異(P>0.05)。與空白對照組比較,蝦青素油中、高劑量組小鼠刀豆蛋白 A(ConA)誘導的脾淋巴細胞增殖能力(0D值)顯著增強(P<0.05) ,血清溶血素含量顯著升高(P<0.05),小鼠碳廓清吞噬指數(shù)顯著提高(P<0.01),高劑量組小鼠二硝基氟苯(DNFB)誘發(fā)的DTH 顯著增強(P<0.05);蝦青素油各劑量組小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬率、吞噬指數(shù)未明顯變化(P<0.05) ,抗體生成細胞能力未明顯增強(P<0.05),自然殺傷(NK)細胞活性未明顯增強( P>0.05)。表明蝦青素油對小鼠免疫調(diào)節(jié)具有正向作用,可提高小鼠免疫能力。
引用文獻
1. 曹平華,李曉霞,禹學禮,等.雨生紅球藻.飼料博覽.2004年第11期:42-43
2.JyonouchiH.Zhang I,Gross M eta1.Nutr.Cancer1994,21(1):47
3.JyonouchiH.Hill R J.Tomita Yeta1 Nutr.Cancer.1991,16(2):93~105
4.陳立武,曾維銓.蝦青素抗肝腫瘤生長的實驗研究.2012年2月,第9卷第4期:21-23