苗欣 程峰 李雪佳

摘要 目的：研究比較亞麻籽油與南瓜籽油對小鼠免疫功能的影響。方法：分別以250mg/kg、500mg/kg亞麻籽油、南瓜籽油給小鼠連續(xù)灌胃30天后，檢測各項免疫指標(biāo)。結(jié)果：亞麻籽油低、高劑量組、南瓜籽油低、高劑量組小鼠左右耳片重量差值、小鼠血清溶血素測定的抗體積數(shù)均高于陰性對照組，與陰性對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;亞麻酸籽油高劑量組小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力、單核-巨噬細(xì)胞碳廓清試驗的吞噬指數(shù)、NK細(xì)胞活性均高于陰性對照組，與陰性對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;亞麻籽油、南瓜籽油對小鼠生長、臟體重比值、抗體生成細(xì)胞數(shù)及單核-巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞率無明顯影響。結(jié)論：亞麻籽油、南瓜籽油具有增強(qiáng)小鼠免疫力的功能。

關(guān)鍵詞亞麻籽油;南瓜籽油;免疫;小鼠

亞麻籽油是從亞麻籽中提取的干性油，含有豐富的不飽和脂肪酸。亞麻籽油主要脂肪酸為亞麻酸（54.93% ）、油酸（19.92% ） 以及亞油酸（16.26%）[1-2]。南瓜籽（pumpkin seed）又稱白瓜籽、金瓜籽， 為葫蘆科植物南瓜 Cucurbita moschata （Duch.）Poiret.的成熟種子。南瓜籽中油脂量較高，其保健功效成分主要存在于南瓜籽油中，油脂成分占到干質(zhì)量的35%～50%，最高的可達(dá)到 64.4%[3]。南瓜籽油含有豐富的脂肪酸、植物甾醇、維生素及微量元素，其中不飽和脂肪酸可達(dá)28.35～80.84%，亞麻酸、亞油酸含量較高[4]。亞麻酸可促進(jìn)小鼠的單核-巨噬細(xì)胞的碳廓清和腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬能力，促進(jìn)小鼠的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng);并能提高小鼠NK細(xì)胞的活性[5]。

本實驗觀察亞麻酸籽、南瓜籽油對小鼠免疫的影響，比較兩種油對免疫的影響是否存在差異。

1 材料和方法

1.1受試樣品：亞麻籽油、南瓜籽油均由吉安市天源藥用油廠提供，批號分別為20171201C、20170506C。

1.2實驗動物：選用廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心繁殖的SPF級健康昆明種雄性小鼠 250只，體重18～22g。

1.3主要儀器：動物天平、分析天平、離心機(jī)、潔凈工作臺、二氧化碳培養(yǎng)箱、顯微鏡、 標(biāo)儀、振蕩器、恒溫水浴鍋、半自動生化分析儀等。

1.4方法

1.4.1 劑量與分組：分為五個大組，一組進(jìn)行ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實驗及NK細(xì)胞活性測定、二組進(jìn)行二硝基氟苯誘導(dǎo)的小鼠DTH實驗（耳腫脹法）、三組進(jìn)行血清溶血素的測定及抗體生成細(xì)胞檢測、四組進(jìn)行小鼠碳廓清實驗、五組進(jìn)行小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實驗。每組再分別設(shè)250mg/kg·BW、500mg/kg·BW亞麻籽油、南瓜籽油低、高2個劑量組和一個陰性對照組，每組50只動物。陰性對照組予大豆油，連續(xù)灌胃30天。

1.4.2實驗方法：參照《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》2003版“增強(qiáng)免疫力功能檢驗方法”中有關(guān)規(guī)定進(jìn)行，細(xì)胞免疫、體液免疫、單核-巨噬細(xì)胞功能和NK細(xì)胞活性實驗。

1.4.3 統(tǒng)計學(xué)方法：先對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗，若方差齊，采用單因素方差分析進(jìn)行總體比較，發(fā)現(xiàn)差異再用Dunnett-t法進(jìn)行多個劑量組與一個對照組均數(shù)間的兩兩比較。若方差不齊則對原始數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，滿足方差齊性檢驗后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計;若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到方差齊性，則改用秩和檢驗，發(fā)現(xiàn)總體比較有差異，則采用不要求方差齊性的Tamhanes T2檢驗進(jìn)行兩兩比較，P<0.05為具有顯著性。

2 結(jié)果

2.1樣品對小鼠體重和免疫器官臟器/體重比值的影響：實驗中各組小鼠的生長狀況良好，各劑量組小鼠體重及體重增長與陰性對照組間比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），生理體征、外觀、行為等均未見異常。實驗不同劑量實驗組的胸腺/

體重及脾臟/體重比值與陰性對照組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

2.2樣品對小鼠的細(xì)胞免疫的影響：表1顯示，亞麻籽油低劑量組（YM低劑量組）、亞麻籽油高劑量組（YM高劑量組）、南瓜籽油低劑量組（NG低劑量組）、南瓜籽油高劑量組（NG高劑量組）小鼠左右耳片重量差值均高于陰性對照組，與陰性對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。樣品各劑量組小鼠ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力均高于陰性對照組，其中亞麻籽油高劑量組（YM高劑量組）與陰性對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

2.3樣品對小鼠的體液免疫的影響：結(jié)果見表1。亞麻籽油、南瓜籽油各劑量小鼠的抗體生成細(xì)胞數(shù)均高于陰性對照組，但溶血空斑數(shù)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。亞麻籽油低劑量組（YM低劑量組）、亞麻籽油高劑量組（YM高劑量組）、南瓜籽油低劑量組（NG低劑量組）、南瓜籽油高劑量組（NG高劑量組）小鼠血清溶血素測定的抗體積數(shù)均高于陰性對照組，與陰性對照組相比差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

2.4樣品對小鼠的單核—巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響：結(jié)果見表2。樣品各劑量小鼠單核-巨噬細(xì)胞碳廓清試驗的吞噬指數(shù)均高于陰性對照組，其中亞麻籽油高劑量組（YM高劑量組）與陰性對照組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。樣品各劑量組小鼠的腹腔巨噬細(xì)胞對雞紅細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù)與陰性對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

2.5樣品對小鼠NK細(xì)胞活性的影響：結(jié)果見表2。樣品各劑量組小鼠的NK細(xì)胞活性均高于陰性對照組，其中亞麻籽油高劑量組（YM高劑量組）與陰性對照組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）

3討論

本實驗結(jié)果顯示，亞麻籽油低劑量組（YM低劑量組）、亞麻籽油高劑量組（YM高劑量組）、南瓜籽油低劑量組（NG低劑量組）、南瓜籽油高劑量組（NG高劑量組）小鼠左右耳片重量差值、小鼠血清溶血素測定的抗體積數(shù)均高于陰性對照組，與陰性對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;亞麻酸籽油高劑量組（YM高劑量組）小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力、單核-巨噬細(xì)胞碳廓清試驗的吞噬指數(shù)、NK細(xì)胞活性均高于陰性對照組，與陰性對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。根據(jù)《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》2003版“增強(qiáng)免疫力功能檢驗方法”的判斷標(biāo)準(zhǔn)，亞麻籽油和南瓜籽油均具有增強(qiáng)小鼠免疫功能的作用。

引用文獻(xiàn)：

1.鄧乾春，禹曉，黃慶德，等.亞麻籽油的營養(yǎng)特性研究進(jìn)展.天然產(chǎn)物研究與開發(fā).2010， 22：715-721

2.張東，薛雅琳，段章群，等.牡丹籽油和亞麻籽油化學(xué)組成分析與比較.2017年11月，42（10）：34-38

3.魏冰.南瓜籽油的開發(fā)和利用研究[J].糧油加工，2008（5）：60-62

4.吳曉磊， 潘勤.南瓜籽油的化學(xué)成分與藥理作用.現(xiàn)代藥物與臨床.2009年，24（6）：336-338

5.姚思宇，趙鵬，李彬，李風(fēng)文，等.α-亞麻酸對小鼠免疫功能影響的實驗研究.中國熱帶醫(yī)學(xué)2007年第7卷第3期：334-336轉(zhuǎn)349