王雙珠，王 敏

常規(guī)細(xì)胞涂片檢測(cè)胸腔積液病敏感度相對(duì)較低(50%～78%)，不能清晰鑒別漿膜腔原發(fā)性間皮性腫瘤與轉(zhuǎn)移性癌，可能與兩者細(xì)胞形態(tài)十分相似有關(guān)[1]。準(zhǔn)確區(qū)分轉(zhuǎn)移性癌與間皮性腫瘤可有助于臨床醫(yī)師選擇精準(zhǔn)、有效的治療方式[2]，近年細(xì)胞塊切片免疫組化染色法越來(lái)越受到重視，其在鑒別間皮性腫瘤與轉(zhuǎn)移性癌的敏感度較高，獲得臨床醫(yī)師的青睞[3]。本文著重探討胸腔積液病的細(xì)胞塊切片與常規(guī)細(xì)胞涂片免疫組化染色的臨床運(yùn)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 收集2017年1月～2018年5月浙江省臺(tái)州醫(yī)院診治患有胸腔積液病的患者72例，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(36例)與對(duì)照組(36例)，其中實(shí)驗(yàn)組男性18例，女性18例，患者年齡15～75歲，平均(41.38±4.29)歲；對(duì)照組男性19例，女性17例，年齡16～77歲，平均(42.07±5.22)歲。入選患者均已簽署知情同意書，比較實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組患者的臨床資料(性別、年齡等)，差異無(wú)顯著性。

1.2 方法

1.2.1 制作 對(duì)照組在治療過(guò)程中采用常規(guī)細(xì)胞涂片法進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)組則采用細(xì)胞塊切片免疫組化染色法進(jìn)行檢測(cè)，患者均于早上空腹?fàn)顟B(tài)下取50 mL胸腔積液，將其分裝于5個(gè)試管中，對(duì)其展開(kāi)離心處理，離心轉(zhuǎn)速為3 000 r/min，時(shí)間為15 min。離心工作完成后，采用移液槍吸出上清液，從沉渣取部分液體給予細(xì)胞涂片學(xué)檢查，剩下的沉渣則加入戊二醛(2.5 mL)，使其固定后再以3 000 r/min離心5 min，二次離心后運(yùn)用移液槍吸出上清液，取出沉渣，包于濾紙中，在給予常規(guī)脫水后實(shí)施石蠟包埋切片，所有細(xì)胞塊切片與細(xì)胞涂片分別給予免疫組化染色和HE染色。

1.2.2 HE染色 由兩位經(jīng)驗(yàn)豐富的高級(jí)職稱病理醫(yī)師進(jìn)行觀察，依照標(biāo)本中細(xì)胞的黏除性、形態(tài)、核不典型性進(jìn)行判斷，若有反應(yīng)性增生間皮細(xì)胞出現(xiàn)，無(wú)不典型性且細(xì)胞彌散性佳判斷為良性，其細(xì)胞呈團(tuán)狀，核有強(qiáng)烈的不典型性以及細(xì)胞形態(tài)極為不溫和評(píng)定為惡性，若細(xì)胞呈彌散狀，核為中度或重度不典型判斷為不確定[4]。

1.2.3 免疫組化染色 采用免疫組化SP法染色，抗體CK5/6、desmin、CK7、CEA、MOC-31、CD15、Calretinin、BerEP、TTF-1、WT-1與DAB顯色試劑，均購(gòu)自福州邁新公司；具體操作步驟嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn) TTF-1、WT-1陽(yáng)性為細(xì)胞核呈棕黃色，CD15陽(yáng)性為細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞膜呈棕黃色，CK5/6、desmin、CK7、CEA、MOC-31、BerEP陽(yáng)性為細(xì)胞質(zhì)呈棕黃色，Calretinin陽(yáng)性為細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核均呈棕黃色[5]。

2 結(jié)果

比較兩組陽(yáng)性檢測(cè)率，實(shí)驗(yàn)組陽(yáng)性檢測(cè)率為100.00%(36/36)；對(duì)照組陽(yáng)性檢測(cè)率為75.00%(27/36)，兩組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

對(duì)比實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組病理診斷，結(jié)果顯示：分型診斷惡性胸腔積液采用細(xì)胞塊切片免疫組化染色檢測(cè)的符合率較高，經(jīng)組合性抗體檢測(cè)轉(zhuǎn)移性肺腺癌中CEA、CK7、TTF-1、CD15、BerEP、MOC-31均呈高表達(dá)，惡性間皮瘤中desmin、Calretinin、CK5/6及WT-1均呈高表達(dá)，常規(guī)細(xì)胞涂片檢測(cè)明顯低于細(xì)胞塊切片免疫組化染色，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，表1)。

表1 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組病理診斷結(jié)果分析

3 討論

臨床治療中，醫(yī)師要想精準(zhǔn)的為患者制定治療方案，必須清晰的區(qū)分轉(zhuǎn)移性癌與間皮性腫瘤的性質(zhì)[6]。免疫組化染色法操作簡(jiǎn)單可行，定位陽(yáng)性物質(zhì)較準(zhǔn)確，有較強(qiáng)的特異性。此外，細(xì)胞塊的運(yùn)用還能有效填補(bǔ)細(xì)胞涂片檢測(cè)法的單一性缺點(diǎn)，其可以讓細(xì)胞標(biāo)本得到較好保存，并可連續(xù)切片展開(kāi)多項(xiàng)檢查[7]。

本實(shí)驗(yàn)中對(duì)照組患者在治療過(guò)程中采用常規(guī)細(xì)胞涂片法進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)組患者則采用細(xì)胞塊切片免疫組化染色法進(jìn)行檢測(cè)，抗體包括CK5/6、desmin、CK7、CEA、MOC-31、CD15、Calretinin、BerEP、TTF-1、WT-1等，鑒別胰腺癌與間皮性腫瘤。結(jié)果表明，細(xì)胞塊切片免疫組化染色法具有特異性，同時(shí)敏感性也優(yōu)于常規(guī)細(xì)胞涂片法。這是因?yàn)榧?xì)胞塊能夠均勻分布，可以將脫落細(xì)胞的具體形態(tài)結(jié)構(gòu)完整保存下來(lái)，在鑒別診斷中可以明顯分辨出細(xì)胞的形態(tài)特征。然而，常規(guī)細(xì)胞涂片由于細(xì)胞分布不均勻，易使細(xì)胞產(chǎn)生重疊，使細(xì)胞整體結(jié)構(gòu)顯現(xiàn)不清晰，不利于鑒別胸腔積液病[8]。細(xì)胞涂片易產(chǎn)生數(shù)據(jù)差異以及厚薄不勻的現(xiàn)象，產(chǎn)生高背景著色形成假陽(yáng)性，易導(dǎo)致誤診。此外，細(xì)胞涂片因陽(yáng)性細(xì)胞未有具體化的對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)，在判斷時(shí)也會(huì)相應(yīng)的增加其難度。與細(xì)胞涂片檢測(cè)法相比，細(xì)胞切片免疫組化染色法的優(yōu)點(diǎn)很明顯，如防止假陽(yáng)性出現(xiàn)、細(xì)胞分布十分均勻、陽(yáng)性表達(dá)觀察度較高等[9]。

綜上所述，運(yùn)用細(xì)胞塊切片免疫組化染色法能夠有效預(yù)防誤、漏診，對(duì)判斷漿膜腔積液的細(xì)胞性質(zhì)與類型效果顯著?？傊?，在適當(dāng)?shù)目贵w組合下，細(xì)胞塊切片聯(lián)合免疫組化染色檢測(cè)胸腔積液對(duì)診斷間皮瘤以及肺腺癌等腫瘤的效果值得肯定，具有臨床推廣價(jià)值。