黃 娟,王云娟,白 華,宋育聰,呂奕文,潘 挺,潘 芳
(1.常熟理工學(xué)院生物與食品工程學(xué)院,常熟215500;2.浙江大學(xué)生物系統(tǒng)工程與食品科學(xué)學(xué)院,杭州310058;3.東南大學(xué)成賢學(xué)院,南京210088)
亞麻籽油富含人體所必須的不飽和脂肪酸α-亞麻酸,其在體內(nèi)可以轉(zhuǎn)化成二十碳五烯酸 (eicosapentaenoic acid,EPA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA),它們?yōu)轸~油中的有效活性成分。α-亞麻酸對(duì)人類的健康具有重要作用,例如α-亞麻酸能夠降低血脂和血壓,抑制血栓和炎癥等[1-3]。但是人體并不能合成這些多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFA),因此,需要人為地在膳食中添加PUFA。在功能型膳食補(bǔ)充劑中添加PUFA是極具挑戰(zhàn)的。由于PUFA分子中存在雙鍵,這些脂肪酸易受氧化,導(dǎo)致產(chǎn)生不愉快的氣味和潛在的毒性物質(zhì)[4-5]。CoQ10是一種脂溶性醌類化合物,是生物體中線粒體重要組成成分之一,被美國FDA批準(zhǔn)可用于治療各種線粒體疾病,如糖尿病、充血性心力衰竭、癌癥、帕金森病、牙周病和其他疾病等[6-11]。此外,CoQ10作為一種天然的抗氧化劑,亦可以清除自由基和抑制脂質(zhì)過氧化[12-13]。CoQ10同樣也存在著不溶于水,易于氧化,生物利用度低等問題[14]。
近年來,2種或2種以上的營養(yǎng)成分組合已成為一種潛在的營養(yǎng)補(bǔ)充策略。這些組合可以改善生物活性物質(zhì)的溶解度和穩(wěn)定性,引發(fā)協(xié)同作用,并使治療效果最大化。乳液是目前應(yīng)用最廣泛的脂溶性成分共同傳遞的膠體分散系統(tǒng)之一。它是一種非均相體系,其中一種不互溶液體以液滴的形式分散在另一種表面活性劑穩(wěn)定的液體中[15]。乳液能有效改善脂溶性活性成分的水分散性和口服生物利用度[16-18]。然而,乳液由于其乳化劑界面厚度薄、比表面積大、光穿透性高而不能有效抑制PUFA的氧化,通過在油相中加入合適的抗氧化劑,可以延緩PUFA在乳液中的氧化。沒食子酸丙酯、二丁基羥基甲苯和丁基羥基茴香醚是食品工業(yè)中常用的合成抗氧化劑,能有效地抑制油脂氧化[19-20]。與這些合成的相比,使用天然抗氧化劑是一種更具前景的策略,因?yàn)樗鼈兛梢詾橄M(fèi)者提供綠色和健康的產(chǎn)品。CoQ10作為一種天然的抗氧化劑,已有報(bào)道可以清除自由基和抑制脂質(zhì)過氧化[21]。因此,非常有必要采用乳液載體技術(shù)來傳遞亞麻籽油和CoQ10。本文創(chuàng)新性地使用一種天然抗氧化劑(輔酶Q10)來保護(hù)亞麻籽油,并將兩者共同負(fù)載于乳液中,提高亞麻籽油和輔酶Q10在水性基質(zhì)中的溶解度,從而提高兩者的生物利用度。本文的研究有助于解決亞麻籽油和CoQ10的相關(guān)問題,更好地將其應(yīng)用于功能性食品中,為消費(fèi)者提供綠色健康的功能食品。
冷榨亞麻籽油(ɑ-亞麻酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)約57%),加拿大Ta Foods有限公司;辛酸癸酸甘油三酯(octyl and decyl glycerate,ODO),食品級(jí),上海上德化工有限公司;輔酶Q10(純度≥99%),西安皓天生物科技有限公司;甘油,食品級(jí),濟(jì)南世紀(jì)通達(dá)化工有限公司;阿拉伯膠,食品級(jí),鄭州凱盈化工有限公司;羧甲基纖維素鈉(carboxymethyl cellulose sodium,CMCNa),天津市大茂化學(xué)試劑廠;胃蛋白酶、胰酶,美國Sigma公司;膽酸鹽,德國Ruibio公司;過氧化氫異丙苯(純度80%),上海Adamas公司;2-硫代巴比妥酸,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;1,1,3,3-四乙氧基丙烷(純度97%),上海Adamas公司;其它試劑均為分析純。
電子天平,梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司;磁力攪拌水浴鍋,常州朗月儀器制造有限公司;RW20型數(shù)顯懸臂攪拌器,德國IKA公司;高壓均質(zhì)機(jī),ATS工業(yè)系統(tǒng)有限公司;高速離心機(jī),長沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司;高速剪切乳化機(jī),上海弗魯克機(jī)電設(shè)備有限公司;ZS90粒度儀,英國馬爾文儀器有限公司;a-1900PC紫外可見分光光度計(jì),上海浦元儀器有限公司;JEM-2100透射電子顯微鏡,日本電子株式會(huì)社。
1.3.1 復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液的制備
準(zhǔn)確稱取6 g亞麻籽油、3 g ODO、5 g甘油和0.4 g的CoQ10置于50℃水浴條件中,300 r/min攪拌直至CoQ10完全溶解,得油相;稱取10 g阿拉伯膠溶解于75.6 g去離子水中,50℃水浴,300 r/min攪拌至阿拉伯膠完全分散,得水相。在300 r/min攪拌條件下,將水相緩慢加入到油相中,繼續(xù)攪拌30 min。隨后3 000 r/min剪切10 min,得初乳。最后初乳在均質(zhì)壓力6×104kPa、循環(huán)次數(shù)3次的條件下均質(zhì)得復(fù)配亞麻籽油和CoQ10的乳液。
1.3.2 平均粒徑和Zeta電位
采用動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)(dynamic light scattering,DLS)測定乳液的平均粒徑和PDI。為防止多重散射現(xiàn)象,乳液測定前需用去離子水稀釋100倍。檢測波長633 nm,溫度25℃,角度90o。
采用動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)測定電泳遷移率,來測定乳液的Zeta電位。
1.3.3 形貌的表征
透射電子顯微鏡(transmission electron microscopy,TEM)來觀察乳液的形貌。測試前乳液需用去離子水稀釋50倍,然后取一滴滴到碳涂覆的銅柵上。用1%磷鎢酸對(duì)樣品進(jìn)行負(fù)染色,并用濾紙吸去溢出的液體。待樣品完全干燥后,在TEM下捕獲圖像。
1.3.4 CoQ10的負(fù)載量和包封率
采用乙醇提取法萃取乳液中的總CoQ10,于275 nm處紫外分光光度法測定吸光度值。采用高速離心法測定乳液中CoQ10的包封率。乳液在3 000×g的條件下離心15 min,由于CoQ10在水中的溶解度較低,離心后,未被包載的CoQ10將以結(jié)晶形式沉淀在離心管底部。乙醇提取離心后上層液體中的CoQ10,作為被包載的CoQ10。根據(jù)CoQ10紫外標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算總CoQ10和被包載CoQ10的含量。使用公式(1)和(2)計(jì)算CoQ10的負(fù)載量和包封率。
1.3.5 體外模擬消化
根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,采用兩步法來進(jìn)行復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液的體外模擬消化試驗(yàn)[22]。根據(jù)Minekus等[22]報(bào)道的方法來制備模擬胃和小腸消化液。試驗(yàn)中所用到的所有溶液需在37℃溫度下預(yù)熱。
1)胃消化階段
準(zhǔn)確量取10 mL乳液,10 mL亞麻籽油CMCNa混懸液(亞麻籽油的濃度和乳液相等)和10 mL CoQ10 CMCNa混懸液(CoQ10的濃度和乳液相等)為對(duì)照,并加入7.5 mL的模擬胃消化液。隨后加入5 μL 0.3 mol/L CaCl2溶液和1.6 mL的胃蛋白酶溶液(25 000 U/mL)。1 mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)溶液的pH值為1.2。最后加入模擬胃消化液保持總體積為20 mL,并在37℃條件下以100 r/min的轉(zhuǎn)速孵育2 h。
2)腸消化階段
向上一步胃消化后的溶液中加入11 mL的模擬腸消化液。隨后,加入40 μL 0.3 mol/L CaCl2溶液和2.5 mL的膽酸鹽溶液(69 mg/mL)。1 mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)溶液的pH值為7.0。然后加入5 mL胰酶溶液(800 U/mL),同時(shí)用0.04 mol/L NaOH溶液滴定,保持溶液的pH值為7.0,記錄消耗的NaOH體積,滴定過程為2 h。NaOH消耗體積需扣除不含亞麻籽油的空白乳液消耗的NaOH體積。
每一步消化結(jié)束后,分別測定上清液中乳液的平均粒徑和Zeta電位。
1.3.6 CoQ10的生物可給率
CoQ10的體外生物可給率可定義為腸消化結(jié)束后CoQ10進(jìn)入磷脂和膽酸鹽形成的混合膠束中的百分比[23]。腸消化后的溶液在3 000×g的離心力作用下離心15 min。隨后,上層液體用乙醇稀釋定容后于275 nm處測定吸光度值,并計(jì)算CoQ10的濃度。按以下公式計(jì)算CoQ10的體外生物可給率:
1.3.7 體外釋放
采用透析袋法進(jìn)行體外釋放研究。透析袋截留分子量為12 000~14 000(Viskase,美國)。為保證漏槽條件,釋放介質(zhì)為無水乙醇和蒸餾水(體積比90:10)。將復(fù)配亞麻籽油和CoQ10的乳液及CoQ10乙醇溶液裝入透析袋中,置于400 mL的釋放介質(zhì)中,攪拌速度100 r/min,溫度37℃。釋放過程中定期取3 mL的樣品用于分析檢測,同時(shí)補(bǔ)充等體積新鮮的釋放介質(zhì)。樣品用紫外分光光度計(jì)于275 nm處測定吸光度值。
1.3.8 穩(wěn)定性考察
1)稀釋穩(wěn)定性
將制備得到的復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液用去離子水稀釋成不同倍數(shù)(100~250倍),通過粒徑測試的方式進(jìn)行稀釋穩(wěn)定性的評(píng)價(jià)。
2)凍融穩(wěn)定性
將制備得到的復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液,平均分成6份,將這6份放入-20℃冰箱中冷凍0、60、120、180、240、300 min,取出室溫自然解凍,去離子水稀釋100倍后進(jìn)行平均粒徑和PDI的考察。
3)離子強(qiáng)度穩(wěn)定性
考察不同的Na+、Ca2+離子濃度(食品中常見的離子)對(duì)乳液的平均粒徑、PDI和Zeta電位的影響。分別向復(fù)配亞麻籽油和CoQ10的乳液中加入不同濃度的NaCl和CaCl2,Na+濃度為分別0.1、0.2、0.3、0.4和0.5 mol/L,Ca2+濃度為0.01、0.02、0.03、0.04 和0.05 mol/L,室溫避光放置24 h后,取待測物測量其平均粒徑、PDI和Zeta電位值。
4)光穩(wěn)定性考察
室溫條件下,取一定量的復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液及CoQ10-ODO溶液于西林瓶中,放置于自然光條件下存貯30 d,分別于7、15、22和30 d,取樣測定樣品中CoQ10的保留率,并觀察乳液的外觀。
5)加速氧化穩(wěn)定性
加速氧化穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)來考察復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液(不含CoQ10的亞麻籽油乳液為對(duì)照)中亞麻籽油的氧化穩(wěn)定性。上述乳液分別放置于20 mL的玻璃瓶中。隨后,所有樣品置于55℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)15 d。分別測定油脂氧化的初級(jí)產(chǎn)物(過氧化值,PV)和次級(jí)產(chǎn)物(硫代巴比妥酸反應(yīng)物,TBARs),并觀察乳液的外觀。
①PV
根據(jù)Uluata等[24]報(bào)道的方法測定PV值。0.2 mL的樣品加入到1.6 mL異辛烷/2-丙醇(體積比3:1)的混合溶劑中,并劇烈震蕩。上述混合物在3 400×g的條件下離心10 min,然后取上層溶劑0.2 mL與2.8 mL的1-丁醇/甲醇(體積比1:2)混合均勻。隨后加入30μL Fe2+/3.94 mol/L硫氰酸銨溶液(體積比1:1)。0.132 mol/L BaCl2溶液和0.144 mol/L FeSO4溶液反應(yīng)得到Fe2+溶液,F(xiàn)e2+溶液需現(xiàn)配現(xiàn)用。迅速混勻上述混合溶液,置于避光處反應(yīng)20 min。于510 nm處使用紫外可見分光光度法測定吸光度值,根據(jù)過氧化氫異丙苯標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算PV值。
②TBARs
根據(jù)Qiu等[25]報(bào)道的方法測定油脂的TBARs值。0.2 mL樣品加入到3.8 mL的TBA反應(yīng)液中,然后劇烈震搖試管,并將其置于沸水浴中加熱15 min。室溫完全冷卻后,上述混合物在3 000×g的條件下離心10 min。上清液于532 nm處紫外可見分光光度法測定吸光度值,根據(jù)1,1,3,3-四乙氧基丙烷標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算TBARs值。
1.3.9 數(shù)據(jù)分析
所有結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)表示,除已說明外,其他所有試驗(yàn)均平行操作3次。2組之間相同參數(shù)采用方差分析(ANOVA)及t檢驗(yàn)(Student"s t-test)進(jìn)行分析,以P<0.01或P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
本試驗(yàn)選用的甘油是無色、無臭、味甜,外觀呈澄明黏稠液態(tài),其具備較好的助乳化效果,還具備增溶作用,阿拉伯膠為古老的天然膠,具有良好的親水親油性,可作為主乳化劑,這些都有助于亞麻籽油和CoQ10在水性基質(zhì)中的溶解,且符合天然、營養(yǎng)、多功能的方向。動(dòng)態(tài)光散射測得的復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液的平均粒徑和PDI分別為(284±5.6)nm和0.112±0.025,PDI小于0.3表明乳液中的亞麻籽油可以均勻地在分散在水性基質(zhì)中(圖1)。乳液的Zeta電位為(-31.0±0.4)mV。
TEM分析復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液的形貌特征(圖2)。由于負(fù)染色,乳液的TEM照片顯示為亮球形核和黑色背景,乳液的平均粒徑和動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)測試的結(jié)果一致。
復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液中CoQ10的負(fù)載量和包封率分別為0.392%±0.008%和97.08%±1.45%,同時(shí),未見有任何亞麻籽油漂浮在液面上,以上結(jié)果表明亞麻籽油和CoQ10能很好地被包封于乳液中。
圖1 復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液的粒度分布圖Fig.1 Particle size distribution of linseed oil and CoQ10 coloaded emulsions
圖2 復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液的TEM照片F(xiàn)ig.2 TEM photograph of linseed oil and CoQ10 co-loaded emulsions
復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液體外模擬消化后的平均粒徑和Zeta電位如圖3a和3b所示,從圖中可以看出,在模擬胃消化階段,乳液的平均粒徑變化不明顯,這就表明乳液的結(jié)構(gòu)沒有被破壞,乳液的油滴能夠抵抗胃消化液低pH的環(huán)境。Zeta電位由-31變?yōu)?16 mV,低pH值條件及消化酶在乳滴表面的吸附都可能引起這種變化。在模擬腸消化階段,乳液的平均粒徑顯著增大,這說明乳液在腸消化液中消化劇烈。腸消化階段,油脂在油水界面脂肪酶的作用下水解,脂解產(chǎn)物(游離脂肪酸、表面活性劑和溶解的生物活性物質(zhì))、膽鹽和磷脂被組裝成混合膠束和囊泡,然后運(yùn)輸?shù)侥c道并被腸道細(xì)胞吸收[26-27]。腸消化后,乳液的Zeta電位由胃消化液中的-16變?yōu)?23.8 mV,這可能是由于膽酸鹽、磷脂等陰離子覆蓋在乳滴的表面,造成電位絕對(duì)值的增大。
圖3c是復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液及亞麻籽油CMCNa混懸液在模擬腸消化過程中NaOH溶液的體積消耗量。在脂肪酶的催化下,油脂在小腸消化液中被水解成游離脂肪酸,而NaOH能和游離脂肪酸發(fā)生中和反應(yīng),因此可以用消耗的NaOH溶液的體積來間接表示亞麻籽油被消化的量[28]。從圖中可以看出,亞麻籽油CMCNa混懸液中亞麻籽油脂解的量比較少,這說明未載體化的亞麻籽油在水中的溶解度低限制了消化,而經(jīng)過載體化后的亞麻籽油的消化速率和消化的量明顯增大。這是由于載體化后的亞麻籽油具有更大的比表面積,脂肪酶和亞麻籽油之間的相互接觸也就更多,導(dǎo)致更多的亞麻籽油被水解。復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液中脂肪的快速消化對(duì)提高亞麻籽油的生物利用度有很大的意義。
圖3d是腸消化后復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液及CoQ10混懸液中CoQ10的生物可給率。復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液中CoQ10的生物可給率明顯高于CMCNa混懸液,這是由于載體化后體系中的亞麻籽油被水解,亞麻籽油中的長鏈脂肪酸能夠形成具有高增溶能力的膠束,溶解大量親脂性生物活性物質(zhì),使得CoQ10的生物可給率提高。
圖3 體外模擬消化過程中復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液的平均粒徑、Zeta電位、油脂的消化和CoQ10的生物可給率Fig.3 Average particle size,Zeta potential,digestion of oil and CoQ10 bio-accessibility of linseed oil and CoQ10 co-loaded emulsions during in vitro simulated digestion
復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液及CoQ10乙醇溶液的體外釋放曲線如圖4所示。釋放初始2 h,復(fù)配乳液和乙醇溶液中CoQ10快速釋放,釋放曲線幾乎重合。乳液中CoQ10初始階段快速釋放的現(xiàn)象可能是由于少量吸附在乳液液滴表面的CoQ10快速釋放造成的。釋放2 h后,CoQ10乙醇溶液的釋放仍然較快,24 h CoQ10釋放達(dá)到94.0%±3.03%,幾乎完全釋放。而CoQ10乳液釋放速度明顯變緩,24 h CoQ10釋放僅達(dá)到60.0%±3.59%。以上結(jié)果表明CoQ10包裹于乳液的液滴中能減緩CoQ10的釋放速率,達(dá)到緩釋效果,最終有望提高CoQ10的口服生物利用度。
圖4 復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液及CoQ10乙醇溶液的體外釋放曲線Fig.4 In vitro release profiles of prepared emulsions and CoQ10 ethanol solution
乳液應(yīng)用于功能性食品中通常需要稀釋。稀釋穩(wěn)定性對(duì)于乳液在功能食品中的應(yīng)用具有重大意義。復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液稀釋100~250倍的穩(wěn)定性如圖5a所示。稀釋后乳液的粒徑和PDI保持在相同水平內(nèi),沒有顯著變化(P<0.05)。同時(shí),稀釋后未觀察到乳液的分層或絮凝等不穩(wěn)定現(xiàn)象。因此,可以得出結(jié)論,復(fù)配亞麻籽油和CoQ10的乳液稀釋100~250倍后是穩(wěn)定的。
在食品的儲(chǔ)藏和運(yùn)輸過程中,經(jīng)常需要處在一個(gè)比較低溫的環(huán)境下,待使用時(shí)再取出恢復(fù)常溫。凍融穩(wěn)定性的考察對(duì)乳液的穩(wěn)定性具有一定的應(yīng)用價(jià)值,從圖5b可以看出,凍融2 h內(nèi)乳液的粒徑和PDI隨冷凍時(shí)間的增加并沒有太大變化,總體是在同一水平上,說明制備的乳液可以承受一定范圍內(nèi)溫度的變化。當(dāng)凍融時(shí)間超過2 h后,乳液的粒徑和PDI呈現(xiàn)輕微增長趨勢,這是由于冷凍3 h后,乳液完全冷凍,快速復(fù)蘇后因?yàn)榄h(huán)境劇烈變化造成小部分乳液膜破裂導(dǎo)致粒徑增大。但乳液依然是比較穩(wěn)定的,沒有觀察到分層、絮凝等不穩(wěn)定現(xiàn)象。
圖5 復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液的稀釋穩(wěn)定性和凍融穩(wěn)定性Fig.5 Dilution and freeze-thaw stabilities of linseed oil and CoQ10 co-loaded emulsions
Na+是常見的食品添加劑,也存在于人類的胃腸道中,因此,Na+可能影響載體在食品中或攝入到人體后的功能。本節(jié)研究了不同濃度的Na+(0~0.5 mol/L)對(duì)乳液性能的影響。如圖6所示,添加NaCl并沒有引起乳液粒徑和PDI的明顯變化,當(dāng)Na+濃度從0.1 mol/L增加至0.5 mol/L時(shí),Zeta電位絕對(duì)值出現(xiàn)了下降,該現(xiàn)象可能是由于氯化鈉的靜電屏蔽作用,抑制乳滴表面電荷電離,表面電荷的絕對(duì)值減小。
O/W乳液主要是通過靜電相互作用和分子吸附來保持穩(wěn)定,因此,水相的離子強(qiáng)度對(duì)控制靜電斥力的Zeta電位有很強(qiáng)的影響,從而影響乳液的穩(wěn)定性[29]。為了改善營養(yǎng)狀況,食品工業(yè)常向食品中添加一些微量元素,Ca2+是常用的元素之一。因此,本節(jié)選擇使用CaCl2(0.01~0.05 mol/L)研究Ca2+強(qiáng)度對(duì)乳液載體穩(wěn)定性的影響。結(jié)果如圖7所示,添加Ca2+對(duì)乳液載體的粒徑和PDI影響不大,但是會(huì)減小載體的Zeta電位絕對(duì)值,當(dāng)離子濃度為0.05 mol/L時(shí),載體的Zeta電位絕對(duì)值降到最低,這說明高濃度氯化鈣加入到乳液中,由于靜電屏蔽作用,抑制乳滴表面電荷電離,導(dǎo)致其表面電荷的絕對(duì)值下降不能形成足夠的靜電斥力。
由圖6b和圖7b可知,在實(shí)際應(yīng)用過程中要注意Na+和Ca2+的添加,高Na+和Ca2+的濃度會(huì)引起乳液體系的不穩(wěn)定。Ca2+Zeta電位絕對(duì)值下降幅度較Na+大,表明Ca2+對(duì)乳液穩(wěn)定性的影響較Na+大。
圖6 不同Na+濃度對(duì)復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液粒度分布和Zeta電位的影響Fig.6 Influences of different Na+concentrations on size distribution and Zeta potential of linseed oil and CoQ10 co-loaded emulsions
圖7 不同Ca2+濃度對(duì)復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液粒度分布和Zeta電位的影響Fig.7 Influences of different Ca2+concentrations on size distribution and Zeta potential of linseed oil and CoQ10 co-loaded emulsions
復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液及CoQ10-ODO溶液的光穩(wěn)定性結(jié)果如圖8所示。儲(chǔ)存1個(gè)月后,乳液的外觀并未觀察到分層、絮凝等不穩(wěn)定現(xiàn)象。CoQ10乳液中CoQ10的保留率為63.2%±1.8%,而作為對(duì)照的CoQ10-ODO溶液CoQ10保留率僅為47.8%±1.9%,這說明當(dāng)CoQ10被包裹于乳液中,CoQ10受光降解的影響減弱,光穩(wěn)定性較好,CoQ10乳液形式明顯可以提高CoQ10的光穩(wěn)定性。
圖8 復(fù)配亞麻籽油和CoQ10的乳液及CoQ10-ODO溶液的光穩(wěn)定性Fig.8 Photostability of prepared emulsions and CoQ10-ODO solution
復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液中亞麻籽油的氧化穩(wěn)定性結(jié)果如圖9所示。加速氧化15 d的過程中,乳液的外觀并未觀察到分層、絮凝等不穩(wěn)定現(xiàn)象。此外,亞麻籽油乳液的初級(jí)和次級(jí)氧化產(chǎn)物迅速上升,表明乳液中的亞麻籽油氧化穩(wěn)定性較差,這是由于乳化后乳滴粒徑較大,乳滴中的亞麻籽油和水中氧氣的接觸面積較大,導(dǎo)致乳液中的亞麻籽油容易被氧化,亞麻籽油乳液產(chǎn)品貨架期較短[30]。向亞麻籽油乳液中復(fù)配上CoQ10,復(fù)配后乳液的氧化產(chǎn)物在儲(chǔ)存過程中基本不變,表明復(fù)配乳液中亞麻籽油的氧化穩(wěn)定性較好,CoQ10強(qiáng)烈的抗氧化作用能夠較好的保護(hù)亞麻籽油。以上結(jié)果表明制備的復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液具有良好的氧化穩(wěn)定性。圖9 亞麻籽油乳液、復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液55℃儲(chǔ)存15 d的氧化穩(wěn)定性
圖9 亞麻籽油乳液、復(fù)配亞麻籽油和CoQ10乳液55℃儲(chǔ)存15 d的氧化穩(wěn)定性Fig.9 Oxidation stability of linseed oil emulsions and linseed oil and CoQ10 co-loaded emulsions stored at 55℃for 15 days
本文采用高壓均質(zhì)法制備復(fù)配亞麻籽油和CoQ10的乳液。結(jié)果表明,制備得到的乳液粒徑約280 nm左右,PDI小于0.3表示乳液能在水中均勻分散。CoQ10的負(fù)載量為0.392%±0.008%,和未載體化的原料相比,乳液能提高其在水中的溶解度。體外模擬消化試驗(yàn)表明乳液主要在小腸中消化降解,和混懸液相比,乳液中亞麻籽油的消化率和CoQ10的生物可給率得到了很大的提高。乳液中CoQ10的釋放表現(xiàn)出明顯的緩釋效果。制備的乳液具有良好的稀釋和冷凍穩(wěn)定性。離子穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)表明Na+和Ca2+對(duì)乳液的物理穩(wěn)定性具有一定的影響,Ca2+的影響要大于Na+,應(yīng)用過程中要注意陽離子的添加使用量。加速氧化穩(wěn)定性試驗(yàn)表明乳液中的亞麻籽油較容易氧化變質(zhì),CoQ10對(duì)于亞麻籽油有較好的保護(hù)作用,制備的復(fù)配乳液具有較好的氧化穩(wěn)定性。本研究為亞麻籽油和CoQ10的載體化提供了一種新穎而有效的策略,為今后在功能性食品開發(fā)中的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。