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        微柱凝膠技術(shù)對于新生兒溶血病患兒輸血前的檢驗效果

        2020-05-18 11:15:54慧,張
        黑龍江醫(yī)藥 2020年3期
        關(guān)鍵詞:新生兒

        李 慧,張 田

        南陽市骨科醫(yī)院,河南 南陽 473000

        新生兒溶血病指的是母嬰之間血型不合,母親體內(nèi)產(chǎn)生與新生兒血型抗原不配的血型抗體,抗體經(jīng)胎盤進入到新生兒體內(nèi),發(fā)生同族免疫性溶血。溶血患兒的血清膽紅素水平會在短時間內(nèi)上升,伴隨不同程度的黃疸、貧血、水腫癥狀,若是得不到及時的輸血治療,患兒可能會發(fā)生心力衰竭、呼吸窘迫等嚴重病癥[1]。為了防止患兒輸血時因血型排斥加重溶血癥狀,在輸血前進行配血檢測十分重要。微柱凝膠技術(shù)是新發(fā)展起來的血型血清學檢查方法,為了探究其在新生兒溶血病患兒輸血前的價值,南陽市骨科醫(yī)院進行了對比研究,發(fā)生其檢驗價值高于試管法,現(xiàn)報告如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        選取南陽市骨科醫(yī)院2017年3月—2018年9月收治的60例新生兒溶血病患兒為研究對象,均采用輸血治療。其中,男 28 例,女 32 例;日齡 1~29(8.44±2.25)d;體重2.4~4.6(3.26±0.25)kg;患兒血型:A 型 14 例,B 型 13例,O型26例,AB型7例;母親血型:A型13例,B型13例,O型28例,AB型6例。本次研究在醫(yī)院倫理委員會的批準下進行。

        納入標準:(1)家屬知情本次研究并同意參與;(2)患兒無藥物過敏史;(3)患兒血液系統(tǒng)無其他疾病。

        排除標準:(1)有精神病家族史患兒或者意識障礙患兒;(2)先天性心臟病患兒;(3)心肝肺腎等器官功能不全患兒;(4)傳染性疾病患兒;(5)循環(huán)、免疫系統(tǒng)有嚴重疾病患兒。

        1.2 檢驗方法

        所有患兒血標本分別使用試管法、微柱凝膠技術(shù)進行血型鑒定;分別通過聚凝胺法、微柱凝膠技術(shù)進行交叉配血。儀器包括長春博訊生物技術(shù)有限責任公司的TD-A 型血清學用離心機(包括試劑)、長春博研科學儀器有限公司的FYQ型免疫微柱孵育器等。

        1.2.1 血型鑒定:(1)試管法。參考《全國臨床檢驗操作流程》,對所有患兒的血標本進行離心處理,觀察反定結(jié)果,做陰性對照管排除冷凝集。(2)微柱凝膠技術(shù)。離心處理所有的血標本,取6 支凝膠微管,分別記為A、B、C、D、E、F,在A、B、C、D 管中分別滴入0.5%紅細胞懸液,并在E、F管中分別將血清、已知A型及B型紅細胞0.5%懸液滴入,接著進行離心處理,轉(zhuǎn)速3 000 r/min,時間為5 min,結(jié)束后肉眼判定結(jié)果。

        1.2.2 交叉配血:(1)凝聚胺法。離心所有患兒及供血者的血清,取2 支凝膠微管,分別記為主側(cè)、次側(cè),配置3%~5%紅細胞懸液,將2滴輸血標本、1滴供血標本紅細胞懸液滴加入主側(cè),將2 滴供血標本、1 滴輸血標本紅細胞懸液滴加入次側(cè),接著分別滴入0.6 ml 低離子介質(zhì)溶液,混合均勻,靜置1 min,分別滴加2滴凝聚胺溶液,靜置15 s,再以3 000 r/min 進行離心處理,時間為1 min,取管底0.1 ml 凝集液體,向其中滴入2 滴重懸液,肉眼判定結(jié)果。(2)微柱凝膠技術(shù)。離心所有患兒及供血者的血清,取2支凝膠微管,分別記為主側(cè)、次側(cè),制作0.5%~1%紅細胞懸液,將50 μL供血者標本及50 μL輸血者標本紅細胞懸液加入至主側(cè),將50 μL供血者標本紅細胞懸液標本及50 μL輸血加入至次側(cè),在37 ℃下孵育15 min,以3 000 r/min 進行離心處理,時間為5 min,完畢后肉眼判定結(jié)果。

        1.3 觀察指標

        統(tǒng)計并比較微柱凝膠技術(shù)、試管法的正反定型不符率;微柱凝膠技術(shù)、聚凝胺法交叉配血不合率。微柱凝膠技術(shù)交叉配血不合判定標準:匹配為紅細胞沉積在凝膠管底部,不匹配為凝膠上或凝膠中有紅細胞聚集[2]。聚凝胺法交叉配血不合判定標準:匹配為1 min 內(nèi)散開的屬于凝聚胺引起的非免疫性凝集,不匹配為不散開的屬于異體抗體所引起的免疫性凝集,試驗結(jié)果需要在3 min 進行判讀[3]。

        1.4 統(tǒng)計學方法

        數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0 軟件進行統(tǒng)計分析,計量資料以均數(shù)±標準差()表示,組間比較采用t 檢驗;計數(shù)資料以例數(shù)和百分比(%)表示,組間比較采用χ2檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

        2 結(jié)果

        2.1 試管法、微柱凝膠技術(shù)的血型鑒定情況

        微柱凝膠技術(shù)、試管法的正反定型不符率均較低,相差不大,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表1。

        表1 試管法、微柱凝膠技術(shù)的血型鑒定情況比較 例(%)

        2.2 聚凝胺法、微柱凝膠技術(shù)交叉配血結(jié)果

        微柱凝膠技術(shù)、聚凝胺法交叉配血不合率分別為3.33%、13.33%,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表2。

        表2 聚凝胺法、微柱凝膠技術(shù)交叉配血結(jié)果比較 例(%)

        3 討論

        據(jù)相關(guān)統(tǒng)計,每140 例新生兒中就有1 例存在溶血病,此病的發(fā)病率極高。新生兒溶血病的發(fā)病原因是母親體內(nèi)的IgG抗體從胎盤進入胎兒血液,使胎兒的紅細胞破壞,使胎兒出現(xiàn)高膽紅素血癥、溶血、貧血等病癥[4]。輸血是治療ABO新生兒溶血病的主要方法,能快速幫助患兒補充血容量,糾正休克等癥狀,為患兒的機體維持正常的供養(yǎng)能力。輸血應用廣泛,若存在血型不合、血液制品質(zhì)量差等問題,容易使不良的輸血反應被誘發(fā),輸血治療的安全性被大大降低,因此,在新生兒溶血患兒接受輸血治療前,要加強檢驗工作。

        傳統(tǒng)的試管法因離心作用可以加速凝集反應,反應時間較短,可以有效測定紅細胞上是否有無A 抗原或B 抗原,利用紅細胞凝集試驗,通過正反定型對輸血者及供血者的血型進行鑒定。微柱凝膠技術(shù)即將紅細胞和血清加入充有凝膠的微柱內(nèi)腔中,如果血清中有該紅細胞的特異性抗體,會形成紅細胞免疫復合物,經(jīng)過離心處理后,復合物會懸于凝膠中或者浮于凝膠表面(陽性);如果血清中沒有該紅細胞的特異性抗體,不會形成紅細胞復合物,離心后分散的紅細胞會沉在微柱內(nèi)腔的尖底部(陰性)[5]。同時,微柱凝膠技術(shù)還可以防止抗體蛋白在蛋白質(zhì)中殘留,或者避免出現(xiàn)抗球蛋白被殘留鹽分稀釋的情況,導致結(jié)果呈現(xiàn)為假陰性,能降低漏診率。在本次研究中,微柱凝膠技術(shù)、試管法的正反定型不符率均較低,分別為1.67%、3.33%,相差不大,差異無統(tǒng)計學意義。與張瑜[6]的研究結(jié)果一致,在其研究報道中,微柱凝膠技術(shù)、試管法的正反定型不符率均分別為1.29%、1.07%。上述結(jié)果表明,在輸血前使用微柱凝膠技術(shù)進行血型鑒定檢驗,能有效鑒定出輸血者和供血者的血型。

        在交叉配血中,聚凝胺法中的聚凝胺被溶解后,會產(chǎn)生大量的正電荷,降低紅細胞電位,導致非特異凝集出現(xiàn)可逆性,要中和凝聚胺的凝集,可以在其中加入枸櫞酸鈉,因此臨床可以通過觀察凝集紅細胞的散開情況進行判定。但是,在藥物、肝素、低濃度抗體等的影響下,凝集的紅細胞也會散開,因此,使用聚凝胺法進行交叉配血,配血不合的概率較高。微柱凝膠技術(shù)進行交叉配血的原理是生物凝膠過濾,紅細胞表面有抗體球蛋白,其會與抗球蛋白試劑中的抗體產(chǎn)生特異性反應,當紅細胞凝集后,體積會增大,凝膠通道僅能通過單個紅細胞,已經(jīng)凝集的紅細胞即便分開,也無法通過通道,因此匹配血型的紅細胞會在凝膠的上部或中部凝集,不匹配血型的紅細胞會沉積在凝膠管的底部。因此,在本次研究中,微柱凝膠技術(shù)、聚凝胺法交叉配血不合率分別為3.33%、13.33%。這與劉金榮[7]的研究結(jié)果一致,其研究報道中,微柱凝膠技術(shù)、聚凝胺法交叉配血不合率分別為1.64%、2.93%。上述結(jié)果說明,相比于聚凝胺法,在交叉配血中使用微柱凝膠技術(shù),能提高交叉配血成功率。

        綜上所述,微柱凝膠技術(shù)在新生兒溶血病患兒輸血前檢驗中有良好的價值,能準確鑒定患兒及供血者的血型,降低交叉配血不合率,能提高臨床輸血的安全性,值得臨床廣泛推廣。

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