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        HS-SPME-GC-MS分析青皮揮發(fā)性成分

        2020-05-09 10:09:25韓蔓江漢美馬銀宇
        湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2020年1期
        關(guān)鍵詞:揮發(fā)性成分青皮

        韓蔓 江漢美 馬銀宇

        摘要:采用頂空固相微萃取法(HS-SPME)和氣質(zhì)聯(lián)用法(GC-MS)對(duì)青皮的揮發(fā)性成分進(jìn)行分析。結(jié)果表明,從青皮中分離出68個(gè)峰,鑒定出56種成分,占總揮發(fā)性成分的87.98%,分別有右旋萜二烯(15.06%)、芳樟醇(10.88%)、順式香芹醇(7.88%)、反式香芹醇(6.49%)、(E,Z)-α-法尼烯(6.26%)、α-松油醇(3.59%)等。首次采用HS-SPME-GC-MS聯(lián)用技術(shù)分析青皮揮發(fā)性成分,旨在為其進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

        關(guān)鍵詞:青皮;頂空固相微萃取;氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù);揮發(fā)性成分

        中圖分類號(hào):S666.2;O657.63 ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

        文章編號(hào):0439-8114(2020)01-0142-03

        DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2020.01.032 ? ? ? ? ? 開(kāi)放科學(xué)(資源服務(wù))標(biāo)識(shí)碼(OSID):

        Abstract: Using HS-SPME and GC-MS to extract and analyze the volatile constituents in Citri reticulatae pericarpium viride. The results showed that 68 peaks were detected from Mori folium, 56 components were identified, accounting for 87.98% of volatile components, including (+)-p-Mentha-1,8-diene(15.06%), Linalool(10.88%), cis-Carveol(7.88%), trans-Carveol(6.49%), α-Farnesene(6.26%), α-Terpineol(3.59%). HS-SPME-GC-MS combined technique was used to analyze the volatile components of Citri reticulatae pericarpium viride for the first time, providing reference for its further development and utilization.

        Key words: Citri reticulatae pericarpium viride; HS-SPME; GC-MS; volatile component

        青皮為蕓香科植物橘(Citrus reticulata Blanco)及其栽培變種的干燥幼果或未成熟果實(shí)的果皮,包括個(gè)青皮、四花青皮。青皮之名始載于《珍珠囊》,且《本草品匯精要》將其以“青橘皮”之名列于果部上品。2015版《中華人民共和國(guó)藥典》中收載有青皮,性味苦辛,微溫,歸肝、膽、胃經(jīng),有疏肝破氣,消積化滯之功效,主要用于胸脅脹痛、疝氣疼痛、乳癖、乳癰、食積氣滯、脘腹脹痛[1]。青皮主要含有揮發(fā)油、黃酮類化合物、氨基酸類等化學(xué)成分,并對(duì)心血管、消化和呼吸系統(tǒng)有廣泛的藥理作用[2],為臨床常用理氣藥。其中,揮發(fā)油是青皮主要活性成分之一,多采用傳統(tǒng)水蒸氣蒸餾法提取,相較而言頂空固相微萃取更為快速、高效和簡(jiǎn)便。故本試驗(yàn)首次采用HS-SPME-GC-MS對(duì)青皮的揮發(fā)性成分進(jìn)行提取和比較分析,旨在為青皮資源的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供參考依據(jù)。

        1 ?材料與方法

        1.1 ?儀器

        手動(dòng)固相微萃取裝置(德國(guó)IKA公司);氣相-質(zhì)譜-計(jì)算機(jī)聯(lián)用儀(美國(guó)Hewlett-Packard公司,6890/5973型);65 μm聚二甲基硅氧烷-二乙烯基苯(PDMS/DVB)萃取纖維頭(美國(guó)Supelco公司);頂空瓶(15 mL);JY1002型電子天平(上海浦春計(jì)量?jī)x器有限公司)。

        1.2 ?試劑

        青皮藥材購(gòu)于湖北強(qiáng)康中藥飲片有限公司,產(chǎn)地為廣州新會(huì),經(jīng)湖北中醫(yī)藥大學(xué)生藥教研室張秀橋教授鑒定為蕓香科植物橘的干燥幼果。將青皮藥材打成粉末,并過(guò)16目篩得青皮粉末。

        1.3 ?方法

        1.3.1 ?頂空固相微萃取條件 ?經(jīng)過(guò)綜合考察得出最佳固相微萃取條件:取青皮粉末0.5 g,置于15 mL頂空瓶中,插入裝有65 μm PDMS/DVB萃取纖維頭的手動(dòng)進(jìn)樣器,110 ℃下預(yù)平衡15 min,再伸出萃取頭頂空萃取25 min,取出立即插入色譜儀進(jìn)樣口(溫度230 ℃)中,解吸6 min。

        1.3.2 ?氣相色譜-質(zhì)譜條件

        1)色譜條件。色譜柱HP-5MS(30 m×0.25 mm,0.25 μm);載氣He(99.999%);流速0.8 mL/min;進(jìn)樣口溫度230 ℃;采用程序升溫,初始溫度為50 ℃,以10 ℃/min升溫至230 ℃。

        2)質(zhì)譜條件。離子源為EI源;離子源溫度230 ℃;四級(jí)桿溫度150 ℃;電子能量70 eV;倍增管電壓1.2 kV;接口溫度230 ℃;質(zhì)荷比(m/z)35~550。

        2 ?結(jié)果與分析

        通過(guò)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)和面積歸一化法對(duì)各總離子流中的各組分相對(duì)百分含量進(jìn)行計(jì)算,然后通過(guò)NIST 08質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)各峰的質(zhì)譜圖進(jìn)行檢索,并結(jié)合其相對(duì)保留時(shí)間,確定各個(gè)組分。從青皮中分離出68個(gè)峰,鑒定出56種成分,占總揮發(fā)性成分的87.98%。其中,青皮中揮發(fā)性成分含量最高的為右旋萜二烯,占總揮發(fā)性成分的15.06%,其次為芳樟醇,占總揮發(fā)性成分的10.88%,順式香芹醇(7.88%)、反式香芹醇(6.49%)、(E,Z)-α-法尼烯(6.26%)、α-松油醇(3.59%)、(E)-β-金合歡烯(2.94%)等含量也較高。具體結(jié)果見(jiàn)圖1和表1。

        3 ?討論

        青皮中的揮發(fā)性成分主要包括脂肪烴類、烯類、醇類、單萜類、倍半萜等。其中,含量最高的右旋萜二烯可以抑制膽固醇的合成并有抗癌作用[3]。諸多體內(nèi)外試驗(yàn)表明,芳樟醇具有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜催眠、抗焦慮、抗腫瘤、抗炎等藥理活性[4];香芹醇(葛縷醇)可抑制大鼠被動(dòng)皮膚過(guò)敏反應(yīng)和5-羥色胺引起的皮膚血管滲透性增強(qiáng)[5];松油醇具有平喘、抑菌作用[6];金合歡烯、大根香葉烯D、蓽澄茄烯等多種倍半萜均有抑菌解熱作用[7];(-)-4-萜品醇有鎮(zhèn)咳平喘和抗過(guò)敏作用[8];β-欖香烯具有較高的抗腫瘤活性,應(yīng)用前景廣闊[9];百里香酚具有較強(qiáng)的止痛、抗炎和抑菌作用[10]等,這些具有藥理作用的揮發(fā)性成分為青皮在臨床上用于胸脅脹痛、疝氣疼痛提供物質(zhì)基礎(chǔ)。同時(shí),首次采用頂空固相微萃取-氣相-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)青皮的揮發(fā)性化學(xué)成分進(jìn)行分析,也為青皮資源的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供了參考依據(jù)。

        參考文獻(xiàn):

        [1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典:一部[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2015.197.

        [2] 陳 ?紅,劉傳玉,李承晏.青皮的化學(xué)及藥理作用研究進(jìn)展[J]. 中草藥,2001(11):93-95.

        [3] JAYAPRAKASHA G K,MURTHY K N,DEMARAIS R,et al. Inhibition of prostate cancer(LNCaP) cell proliferation by volatile components from Nagami Kumquats.[J].Planta Med,2012,78(10):974-980.

        [4] 姜冬梅,朱 ?源,余江南,等.芳樟醇藥理作用及制劑研究進(jìn)展[J].中國(guó)中藥雜志,2015,40(18):3530-3533.

        [5] 王新芳,董 ?巖,孔春燕.艾蒿的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2006(2):174-175.

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        [7] 周 ?剛,王 ?停,何燕萍.中藥新藥研發(fā)中藥材研究需關(guān)注的問(wèn)題[J].中國(guó)中藥雜志,2014,39(16):3192-3195.

        [8] 蔡進(jìn)章,林崇良,周子曄,等.山橿根、莖、葉揮發(fā)油化學(xué)成分的研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2011,29(8):1893-1895.

        [9] 麻 ?杰,陳 ?娟,趙冰潔,等.抗癌藥物β-欖香烯及其衍生物的研究進(jìn)展[J].中草藥,2018,49(5):1184-1191.

        [10] 胡薏冰,柳克鈴,李若存.GC法測(cè)定云威靈軟膠囊中百里香酚和異丁酸百里香酯的含量研究[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2007(7):98-99,115.

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