王琳 賀獻(xiàn)林 張海新 李運(yùn)朝 李洪濤 及華

摘 要：為了探明不同產(chǎn)地和不同采收期連翹中藥用成分含量的差異，采集了河北、河南和山西連翹主產(chǎn)區(qū)的青翹和老翹樣品，檢測(cè)連翹苷和連翹酯苷A這2種藥用成分的含量，并在河北涉縣從5月下旬至9月下旬每隔10 d采集一次青翹樣品，檢測(cè)自然晾曬和汽蒸烘干的不同干燥處理方法下藥用成分的含量變化。結(jié)果表明：不同產(chǎn)地連翹藥用成分含量存在明顯的差異，連翹的藥用成分含量排序：河北>山西>河南;青翹中藥用成分含量高于老翹;采后汽蒸烘干處理較自然晾曬能夠更好地保存藥用成分。

關(guān)鍵詞：連翹;連翹苷;連翹酯苷;產(chǎn)地;采收期

中圖分類(lèi)號(hào)：S685.24 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1006-060X（2020）02-0076-03

Abstract： In order to find out the differences in the content of traditional Chinese medicine components of forsythia from different producing areas and different harvesting periods， the samples of green fructus forsythiae and grown fructus forsythiae from Hebei， Henan and Shanxi were harvested， and the contents of phillyrin and forsythiaside A were detected， and every 10 days from late May to late September in Shexian County， Hebei Province， the samples of green fructus forsythiae were harvested for one time， and the change of the content of medicinal components under two drying methods of natural drying and steam drying was detected. The results showed that there were obvious differences in the content of medicinal components of forsythia from different places. The order of the content of medicinal components of forsythia from high to low was Hebei， Shanxi， Henan; the content of medicinal components of green fructus forsythiae was higher than that of grown fructus forsythiae; the treatment of steaming and drying after harvest was better than that of natural drying， which can better preserve the medicinal ingredients.

Key words：forsythia; phillyrin; forsythiaside; producing area; harvesting period

藥用連翹為木犀科植物連翹（Forsythia suspense （Thunb.） Vahl）的干燥果實(shí)，秋季果實(shí)初熟尚帶綠色時(shí)采收，除去雜質(zhì)，蒸熟，曬干，習(xí)稱(chēng)“青翹”;果實(shí)熟透時(shí)采收，曬干，除去雜質(zhì)，習(xí)稱(chēng)“老翹”[1]。連翹臨床應(yīng)用廣泛，其主要化學(xué)成分是連翹苷和連翹酯苷A（2010版《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定連翹苷和連翹酯苷A的含量為連翹藥材的質(zhì)控指標(biāo)），具有清熱解毒、消腫散結(jié)、疏散風(fēng)熱的功效，主治瘡癰腫毒，瘰疬痰核，風(fēng)熱外感，溫病初起等病癥[2-3]。現(xiàn)代藥理研究表明，連翹具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗氧化、抗衰老、保護(hù)肝臟、調(diào)節(jié)免疫功能和增強(qiáng)抗應(yīng)激能力等作用[4-5] 。連翹主產(chǎn)于中國(guó)河北、河南、山西、陜西和山東等地，不同產(chǎn)區(qū)由于其生態(tài)條件不同，導(dǎo)致連翹中藥用成分的含量有著較為明顯的差異，此外采收標(biāo)準(zhǔn)、采收時(shí)間不同也會(huì)導(dǎo)致其藥用成分含量變化[6-8]。試驗(yàn)采用高效液相色譜的檢測(cè)方法對(duì)不同產(chǎn)地和不同時(shí)期連翹中連翹苷和連翹酯苷A的含量進(jìn)行了比較，以探究其含量變化及差異;并對(duì)同一產(chǎn)地的青翹進(jìn)行不同干燥處理方式，以確定適宜的干燥方法，更好地指導(dǎo)當(dāng)?shù)剡B翹產(chǎn)業(yè)的生產(chǎn)實(shí)踐。

1 材料與方法

1.1 材 料

1.1.1 試驗(yàn)材料與處理 不同地區(qū)連翹材料分別來(lái)源于河南盧氏縣、山西垣曲縣、山西聞喜縣、河北涉縣及正定縣。選擇成熟度一致的樣品自然晾干，粉碎，過(guò)5號(hào)篩，待用。不同時(shí)期連翹材料來(lái)源于河北涉縣以嶺藥業(yè)有限公司連翹基地，從2018年5月25日至9月25日每隔10 d取一次樣品，分成2等份，分別采用曬干和汽蒸15 min然后烘干這2種干燥方式進(jìn)行處理。

1.1.2 主要儀器與試劑 Waters e2695 高效液相色譜儀（廣東科曉科技有限公司）;超聲儀（KQ3200DE型數(shù)控超聲波清洗器）;FA1004N型電子分析天平（上海精密儀器儀表有限公司）;連翹苷標(biāo)準(zhǔn)品（批號(hào)wkq18012210，CAS號(hào)487-41-2）;連翹酯苷A標(biāo)準(zhǔn)品（批號(hào)wkq18012502，CAS號(hào)79916-77-1）;甲醇（色譜純，天津科密歐有限公司）;乙醇（分析純，北京慶凱華豐科技開(kāi)發(fā)有限公司）;乙腈（色譜純，F(xiàn)isher公司）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 色譜條件 色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱;柱溫：室溫;進(jìn)樣量10 μL;流速：1.0 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)：連翹苷的檢測(cè)波長(zhǎng)為277 nm，連翹酯苷A的檢測(cè)波長(zhǎng)為330 nm;流動(dòng)相及洗脫方式：連翹苷以及連翹酯苷A的流動(dòng)相為乙腈-0.4%冰醋酸溶液（體積比為15∶85）。

1.2.2 對(duì)照品的制備 連翹苷：取連翹苷對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇制成每1 mL含0.2 mg的溶液。連翹酯苷A：取連翹酯苷A對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇制成每1 mL含0.1 mg的溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

1.2.3 供試品的制備 （1）連翹苷供試品溶液的制備。精密稱(chēng)定該品粉末1 g，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇15 mL，稱(chēng)定重量，浸漬過(guò)夜，超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）25 min，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5 mL，蒸至近干，加中性氧化鋁0.5 g拌勻，加在中性氧化鋁柱（100～120目，1 g，內(nèi)徑為1～1.5 cm）上，用70%乙醇80 mL洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘?jiān)?0%甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至5 mL量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。（2）連翹酯苷A供試品溶液的制備。精密稱(chēng)定該品粉末0.5 g，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇15 mL，密塞，稱(chēng)定重量，超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）30 min，放冷，再稱(chēng)定重量，用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。每個(gè)樣品測(cè)定重復(fù)3次，以平均值為測(cè)定結(jié)果。

2 結(jié)果與分析

2.1 產(chǎn)地對(duì)連翹藥用成分含量的影響

檢測(cè)結(jié)果表明，不同地域采集的連翹樣本中藥用成分含量存在明顯的差異，河北產(chǎn)地的連翹藥用成分含量較高，以涉縣連翹藥用成分含量最高，連翹苷含量達(dá)0.793%，連翹酯苷A含量達(dá)17.57%，其次是山西產(chǎn)地，較差的是河南產(chǎn)地;同一省份不同縣域間也存在差異;青翹的總含量相差可達(dá)4.2倍，老翹的總含量相差可達(dá)7.4倍（表1）。

由表1可知，青翹樣品中連翹苷和連翹酯苷A含量均高于2015版《中華人民共和國(guó)藥典》標(biāo)準(zhǔn)（≥0.25%），老翹連翹苷含量均低于2015版《中華人民共和國(guó)藥典》標(biāo)準(zhǔn)（≥0.15%）。青翹中這2種藥用成分含量明顯高于老翹，同一批樣品中青翹的連翹苷含量比老翹最多高出12.4倍，青翹中連翹酯苷A含量比老翹最多高出41.7倍（山西垣曲縣）。

2.2 采收期對(duì)連翹藥用成分含量的影響

整個(gè)生長(zhǎng)期內(nèi)（5月25日—9月25日）連翹苷和連翹酯苷A含量均呈現(xiàn)波浪式下降趨勢(shì)（圖1和圖2），連翹酯苷A含量在整個(gè)采摘期內(nèi)均超過(guò)藥典標(biāo)準(zhǔn)（≥0.25%），含量最高值出現(xiàn)在6月上中旬，是藥典規(guī)定含量的55倍。連翹苷含量在生長(zhǎng)后期低于藥典規(guī)定含量（≥0.15%）。

2.3 干燥方式對(duì)連翹藥用成分含量的影響

自然晾曬和汽蒸后烘干的干燥處理方法相比較，汽蒸處理的樣品中連翹苷和連翹酯苷A的含量明顯高于自然晾曬的處理方法（圖1和圖2），6月中旬采用汽蒸處理的樣品中連翹苷含量是自然晾曬方式的13.8倍，連翹酯苷A含量是自然晾曬方式的5.9倍。說(shuō)明連翹采后汽蒸烘干處理較自然晾曬處理能夠更好的保存藥用成分。

3 結(jié)論與討論

（1）試驗(yàn)結(jié)果表明，不同產(chǎn)地連翹中連翹苷和連翹酯苷A含量差異較大，其含量的排序?yàn)椋汉颖?山西>河南，分析其可能原因與地理位置、生態(tài)環(huán)境、采收時(shí)間、產(chǎn)地加工等條件有關(guān)[9-10]?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》（2015年）中規(guī)定連翹干燥品連翹酯苷A含量不得少于0.25%、連翹苷含量不得少于0.15%，研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，青翹中連翹苷和連翹酯苷A含量均高于《中華人民共和國(guó)藥典》標(biāo)準(zhǔn)，老翹中連翹酯苷A含量均達(dá)到藥典規(guī)定，但連翹苷含量在采集時(shí)間范圍內(nèi)均低于藥典標(biāo)準(zhǔn)，該試驗(yàn)結(jié)果與已有的報(bào)道[10-11]相一致，表明連翹苷含量不能單獨(dú)作為連翹的一個(gè)質(zhì)控指標(biāo)，需要結(jié)合其他成分含量如連翹酯苷等綜合評(píng)價(jià)，建立多指標(biāo)成分協(xié)同效益評(píng)價(jià)體系。

（2）試驗(yàn)結(jié)果顯示，青翹中的連翹酯苷A和連翹苷的含量明顯高于老翹，該研究結(jié)果與曹冉冉等[11]、閆瑞等[12]多個(gè)文獻(xiàn)結(jié)果均相似，這與傳統(tǒng)意義上老翹的藥用價(jià)值更高、臨床醫(yī)學(xué)應(yīng)用更為廣泛有所不符。因此，筆者認(rèn)為有必要開(kāi)展不同采收期青翹的藥理學(xué)試驗(yàn)，探求這些活性物質(zhì)所發(fā)揮的藥理作用。目前連翹成分和功效之間的關(guān)系尚不很明確，僅憑藥用成分含量的高低尚不能判定青翹與老翹的藥用價(jià)值，還需結(jié)合相應(yīng)的藥效學(xué)試驗(yàn)進(jìn)行更深入的研究，才能更科學(xué)地評(píng)價(jià)青翹的質(zhì)量。

（3）試驗(yàn)比較了不同干燥方式對(duì)連翹中藥用成分含量的影響，結(jié)果表明汽蒸烘干處理優(yōu)于自然晾曬，該結(jié)果與馬梅芳等[13]的研究結(jié)果一致，采后汽蒸處理具有殺酶保苷的作用[14]，能夠更好的保存藥用成分，同時(shí)更好地保存連翹的色澤和外觀;自然晾曬由于所需時(shí)間較長(zhǎng)，內(nèi)含酶活性較強(qiáng)，降解了連翹中的有效成分，使得連翹苷和連翹酯苷A的含量低于汽蒸烘干處理，從而影響了連翹質(zhì)量。

參考文獻(xiàn)：

[1] 張 宇，梁 軍，夏永剛，等. HPLC同時(shí)測(cè)定連翹藥材中5種特征性成分[J]. 中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2015，43（1）：47-49.

[2] Cui Y，Wang Q，Shi X W，et al. Simultaneous quantification of 14 bioactive constituents in Forsythia Suspensa by liquid chromatography-electrospray ionisation-mass spectrometry[J]. Phytochemical Analysis，2010，21（3）：253-260.

[3] Jiao J，Gai Q Y，Luo M，et al. Comparison of main bioactive compounds in tea infusions with different seasonal Forsythia suspensa leaves by liquid chromatography-tandem mass spectrometry and evaluation of antioxidant activity[J]. Food Research International，2013，53（2）：857-863.

[4] 劉 微，王玉龍，關(guān)扎根，等. 不同采收期及干燥處理老翹中化學(xué)成分含量比較[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2016（2）：96，99.

[5] 付云飛，李 清，畢開(kāi)順. RP-HPLC法同時(shí)測(cè)定不同產(chǎn)地連翹中的7種成分[J]. 中草藥，2013，44（8）：1043-1046.

[6] 鄭曉珂，魏 悅，馮衛(wèi)生. 不同采收期連翹的HPLC指紋圖譜研究[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2007，13（3）：1-4.

[7] 張淑蓉，裴香萍，閆 艷，等. 不同采收期青翹和連翹葉中活性成分的含量比較[J]. 中國(guó)藥房，2011（31）：2940-2942.

[8] 白吉慶，王小平，曹林林，等. 不同采收期青翹中4種活性成分的含量分析[J]. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2012，40（7）：193-198.

[9] 劉 瑞，張振秋，李偉銘，等. 連翹不同產(chǎn)地與不同炮制品中4種成分的含量測(cè)定[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17（14）：83-86.

[10] 王進(jìn)明，范圣此，趙 艷，等. 不同采收期老翹中化學(xué)成分含量測(cè)定[J]. 園藝與種苗，2014（4）：44-47.

[11] 曹冉冉，李海平，黃艷杰，等. HPLC-ESI/MS法測(cè)定不同連翹有效成分的含量[J]. 河南科技大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2015，36（1）：101-104.

[12] 閆 瑞，楊印軍，劉紅衛(wèi)，等. “搶青”采摘對(duì)青翹中連翹酯苷A和連翹苷含量的影響[J]. 中國(guó)現(xiàn)代中藥，2016（5）：579-582.

[13] 馬梅芳，楊曉日，高 慧，等. 不同加工方式連翹葉中連翹酯苷A和連翹苷的含量測(cè)定[J]. 食品與藥品，2015，17（6）：417-422.

[14] 白吉慶，王小平，曹林林，等. 產(chǎn)地加工方法對(duì)青翹中連翹苷、連翹酯苷A的影響[J]. 中國(guó)中藥雜志，2011，36（23）：3258-3261.

（責(zé)任編輯：肖彥資）