武文平,佟 瑞*
(秦皇島市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科,河北 秦皇島 066000)
溶血是臨檢工作中常見的干擾因素。血常規(guī)檢測遇到乳糜血標(biāo)本,為降低其干擾,常用到血漿置換法[1]。受此啟示,本研究應(yīng)用血漿置換法,置換溶血標(biāo)本中產(chǎn)生的血紅蛋白(HGB),檢測得到真實(shí)的MCH,作為計(jì)算紅細(xì)胞其它參數(shù)的數(shù)據(jù),為臨檢醫(yī)生處理溶血標(biāo)本提供一種糾正方法。
隨機(jī)抽取本院2020年1月10日健康體檢者20例,平均年齡(36.31±12.20)歲,每例留取10ml K2EDTA抗凝血樣,平均血紅蛋白濃度(152.05±14.64)g/L。2020年1月15日K2EDTA抗凝血10例,平均血紅蛋白濃度(151.33±10.26)g/L。
1.2.1 不同溶血濃度標(biāo)本制備及血漿置換:(1)溶血標(biāo)本制備及檢測:對每例體檢者血樣分組 對照組1ml標(biāo)本1份,干擾組2ml標(biāo)本2份,溶血組1ml標(biāo)本5份;取2份干擾組樣本,1912g,5min離心分離血漿,備用,其中一份底部紅細(xì)胞反復(fù)凍融(-20℃,40min,37℃,20min)3次,另一份底部紅細(xì)胞棄去。用已分離的備用血漿配制血紅蛋白濃度為100g/L的溶血血漿,20000rpm 10min高速離心,吸取800ul上層溶血血漿備用;溶血組5份血樣1912g,5min離心,用各例制備好的100g/L的溶血血漿,分別配制濃度(相對于1ml的全血)為2g/L、5g/L、10g/L、20g/L、25g/L的溶血標(biāo)本,見表1。制備的溶血標(biāo)本及對照標(biāo)本用XT1800i進(jìn)行檢測。(2)溶血標(biāo)本血漿置換及檢測:制備的溶血標(biāo)本1912g,5min離心,用生理鹽水置換血漿,最終標(biāo)本定容到置換前體積,置換后標(biāo)本本上層生理鹽水HGB濃度檢測為零。置換后標(biāo)本用XT1800i進(jìn)行檢測,記錄紅細(xì)胞參數(shù)RBC、HGB、MCH。
表1 不同HGB濃度溶血標(biāo)本制備
1.2.2 溶血標(biāo)本制備及不同離心力血漿置換:(1)物理振蕩法制備溶血標(biāo)本:隨機(jī)選取2020年1月15日K2EDTA抗凝血10例,進(jìn)行血細(xì)胞分析;然后1912g,5min離心,分離血漿備用,底部紅細(xì)胞旋渦振蕩5min,用各自備用血漿重新混勻。(2)不同離心力進(jìn)行血漿置換:將制備的溶血標(biāo)本,平均分為兩份,一份212g,5min離心;另一份1912g,5min離心,上層血漿均為肉眼可見溶血,分別用生理鹽水置換3次,最后定容到2ml,進(jìn)行血細(xì)胞分析。
采用SPSS 17.0軟件分析處理數(shù)據(jù),服從正態(tài)分布的定量資料以±s表示,兩組間比較采用配對t檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
溶血標(biāo)本中MCH隨著溶血濃度的升高而升高,各溶血濃度組MCH與對照組相比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);溶血標(biāo)本經(jīng)生理鹽水置換后,各溶血濃度組MCH與對照組比較均差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
物理振蕩法制備的溶血標(biāo)本,置換后樣本MCH與對照組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);不同離心力之間MCH、MCV、MCHC比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;置換后樣本MCV、MCHC與對照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
在體內(nèi)溶血時(shí),相對增加的HGB或被破壞的紅細(xì)胞已失去其正常生理功能,血漿置換后的紅細(xì)胞參數(shù)更能真實(shí)反映機(jī)體狀態(tài),比較血漿置換前后紅細(xì)胞參數(shù)差異,可以估計(jì)溶血的嚴(yán)重程度,這些都為臨床診療活動(dòng)提供有意義的參考[2-3]。
綜合分析,本方法用時(shí)短,簡單易行,可以作為臨檢醫(yī)生處理溶血標(biāo)本的一種參考方法。