王亞芳,王 梅,宋愛鳳

(內蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院風濕免疫科，內蒙古呼和浩特 010017)

強直性脊柱炎(AS)是一種主要累及骶髂關節(jié)、脊柱附著點的慢性炎癥性疾病，以關節(jié)強直為病變特點，臨床表現(xiàn)不一、判斷其病情活動度的難度較大[1-2]。常規(guī)紅細胞沉降率檢測對AS病情評估的敏感性不足；巴斯AS病情活動指數(shù)在AS病情判斷中的應用十分廣泛，但其具體分值由患者主觀評價而得，且很大一部分沒有關節(jié)外表現(xiàn)的患者評分可存在明顯偏倚，尋找準確、客觀的AS病情評估指標是臨床研究的重點。AS也屬于自身免疫性疾病，較多研究證實在病情進展過程中伴隨著患者免疫功能的嚴重損傷，其中T淋巴細胞亞群分布失衡是重要表現(xiàn)之一，故推測檢測免疫細胞分布情況是判斷AS病情現(xiàn)狀的可靠手段之一[3-4]。Th17/Treg是近年備受關注的CD4+T淋巴細胞亞群，已有研究證實其與系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕關節(jié)炎等自身免疫性疾病的病情轉歸密切相關[5-6]。文中檢測AS患者的Th17/Treg平衡狀態(tài)，探討其對AS病情的評估價值，旨在為日后AS病情判斷尋找便捷、可靠的新指標，現(xiàn)將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年2月至2019年2月在本院確診為AS的患者90例作為AS組，其中男性50例，女性40例，年齡19～67歲，平均(43.27±8.91)歲，體質量指數(shù)22～26 kg/m2，平均(23.87±2.95)kg/m2。納入標準：(1)符合《強直性脊柱炎診斷及治療指南》[7]中對AS的定義；(2)首次確診疾病、未經(jīng)相關治療；(3)患者年齡小于80歲；(4)本人簽署知情同意書。排除標準：(1)合并其他自身免疫性疾??；(2)合并嚴重心、肝、腎功能不全；(3)妊娠或者哺乳期女性；(4)入組前6個月內糖皮質激素治療史；(5)認知功能異常、無法配合相關檢查。另取同期在本院進行治療的骶髂關節(jié)炎患者90例作為對照組，確診疾病且排除AS，其中男性46例，女性44例，年齡20～74歲，平均(43.55±8.60)歲，體質量指數(shù)22～27 kg/m2，平均(23.78±2.51)kg/m2，各項體檢結果均在正常范圍內，本人了解研究過程且簽署知情同意書。兩組研究對象的性別、年齡、體質量指數(shù)分布比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核、批準此次研究。

1.2外周血Th17/Treg平衡狀態(tài)檢測及2次分組 入組即刻留取兩組患者的空腹外周靜脈血標本約5 mL，采用艾森生物NovoCyte流式細胞儀測定其中Th17細胞、Treg細胞分布比例并計算Th17/Treg比值。根據(jù)Th17/Treg比值中位數(shù)將AS患者進一步分為高比值組、低比值組各45例。

1.3骶髂關節(jié)病變程度 采用核磁共振檢查AS患者的骶髂關節(jié)病變程度，具體可分為0～Ⅳ級，包括0級：無炎癥性改變；Ⅰ級：存在局限性骨髓脂肪堆積及軟骨下硬化，無融合的侵蝕≤2處；Ⅱ級：存在中度脂肪堆積以及軟骨下硬化，無融合的侵蝕>2處；Ⅲ級：關節(jié)間隙出現(xiàn)假性擴大，存在廣泛脂肪堆積及嚴重軟骨下硬化，合并輕度、部分強直；Ⅳ級：存在肯定、嚴重強直者。0～Ⅰ級定義為輕度，Ⅱ～Ⅲ為中度，Ⅳ為重度，計算中重度AS比例。

1.4人類白細胞抗原B27(HLA-B27)、炎癥因子水平檢測 留取AS患者的空腹外周靜脈血標本5 mL，分離血清后采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測其中HLA-B27及炎癥因子腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素(IL)-1β、IL-2、IL-33的水平。酶聯(lián)免疫試劑盒購自北京博奧森生物技術有限公司。

2 結 果

2.1外周血Th17/Treg平衡狀態(tài) AS組患者外周血Th17分布比例及Th17/Treg比值高于對照組，Treg分布比例低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 外周血Th17/Treg平衡狀態(tài)比較

2.2骶髂關節(jié)病變程度 不同Th17/Treg比值的AS患者MRI骶髂關節(jié)病變程度差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。高比值組患者的中重度比例高于低比值組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

2.3各組HLA-B27、炎癥因子水平比較 高比值組AS患者血清HLA-B27水平為(57.94±8.42)U/mL、低比值組AS患者血清HLA-B27水平為(30.28±4.11)U/mL。高比值組血清HLA-B27水平高于低比值組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。高比值組AS患者血清中TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-33的水平高于低比值組AS患者，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表2 不同Th17/Treg比值AS患者的骶髂關節(jié)病變程度比較[n(%)]

表3 不同Th17/Treg比值AS患者的炎癥因子水平比較

3 討 論

AS的發(fā)病機制尚未完全明確，但免疫系統(tǒng)功能變化在該病發(fā)生發(fā)展中的調節(jié)作用受到廣泛重視。CD4+T淋巴細胞主要參與適應性免疫應答，其亞群主要包括Th17細胞及Treg細胞，生理狀態(tài)下兩者處于動態(tài)平衡狀態(tài)，是維持機體多個組織臟器功能正常運轉的重要基礎。Th17細胞主要參與局部微環(huán)境炎性反應，在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中發(fā)現(xiàn)其表達異常并促進疾病病情演進[8]。Treg細胞是一種具有調控作用CD4+T淋巴細胞亞群，在機體特異性免疫抑制中發(fā)揮重要調節(jié)作用，多種自身免疫性疾病的動物模型中發(fā)現(xiàn)Treg細胞表達量下降，提示其表達紊亂與自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展具有一定關系[9-11]。較非系統(tǒng)免疫性疾病但與AS具有相似病癥的骶髂關節(jié)炎患者來說，文中結果顯示AS患者外周血中Th17細胞比例較高、Treg細胞比例較低，Th17/Treg比值也大幅下降，明確了AS患者的Th17/Treg失衡現(xiàn)狀。Th17/Treg比值可更為直觀、顯著地反映Th17/Treg平衡紊亂情況，關于AS患者具體Th17/Treg比值與病情嚴重程度的內在聯(lián)系，研究者具體從骶髂關節(jié)病變程度、HLA-B27、炎癥因子三方面展開。

AS主要累及的骨關節(jié)是骶髂關節(jié)及脊柱附著點，MRI可準確觀察到患者的病變嚴重程度[12-13]。文中不同Th17/Treg比值的AS患者MRI病情分級存在明顯差異，且高Th17/Treg比值者AS病情中重度比例較高，從影像學層面明確Th17/Treg比值與AS病情呈正相關。HLA-B27是人體白細胞抗原，屬于Ⅰ型MHC基因，其表達陽性率在健康人群及脊柱病患者中存在遺傳差別，且諸多研究證實,HLA-B27的表達與AS具有高度相關性，超過90%的AS患者存在HLA-B27陽性，而這一數(shù)據(jù)在健康人群中僅為5%～10%[14-15]。文中AS患者中Th17/Treg比值較高者血清HLA-B27水平也較高，直觀說明AS患者的Th17/Treg比值與HLA-B27水平呈正相關，推測Th17/Treg失衡是促進AS患者病情進展的直接因素之一、其具體比值可客觀反映AS病情嚴重程度。

AS是一種慢性炎癥性疾病，檢測血液中炎癥指標水平是評估該病活動性的常規(guī)手段[16-17]。Th17/Treg比值較高的AS患者TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-33的水平較高。TNF-α是典型的促炎因子，其過表達可導致全身毒性反應并加劇骨破壞，IL-1β、IL-2、IL-33與對應受體結合可激活肥大細胞并進一步導致其產生更多炎癥因子，擴大局部及全身炎性反應并加劇骨破壞[18-20]。上述結果說明Th17/Treg比值與AS患者的炎性反應程度呈正相關，從炎性反應角度間接明確其對AS病情評估的作用。

4 結 論

AS患者存在明顯Th17/Treg失衡，具體Th17/Treg比值與AS病情嚴重程度間存在直接相關關系，可能是日后AS病情評估的可靠指標之一。文中納入病例數(shù)有限，可能對數(shù)據(jù)產生一定偏倚，有待后續(xù)大樣本研究開展進一步夯實結論。