何廣營 林曉玲 李馮堅

超敏C反應蛋白（hs-CRP）是一種常見的急性時相反應蛋白（acute phase proteins，APR），因其能與肺炎鏈球菌的莢膜C多糖發(fā)生沉淀反應而得名，在組織損傷、炎癥或感染時，由肝受細胞素產(chǎn)生物刺激產(chǎn)生，臨床上主要作為一種非特異性炎癥指標。hs-CRP不僅用于一般感染性疾病的監(jiān)測，還用于心肌梗死、急性胰腺炎、多發(fā)創(chuàng)傷、腫瘤、類風濕關(guān)節(jié)炎等多種疾病引起的全身炎癥綜合征的評估[1]。因此，及早、反復監(jiān)測hs-CRP對疾病的診斷、療效判斷及監(jiān)測具有重要意義。隨著疾病越來越復雜化、種類多化且來勢兇猛，為了及時、準確地提供hs-CRP結(jié)果，目前很多實驗室購置了多臺檢測hs-CRP儀器。根據(jù)ISO15189的規(guī)定，同一實驗室中不同儀器檢測相同項目時，需要對檢測結(jié)果的一致性進行評估，確保結(jié)果的一致性。本研究對3種不同儀器檢驗hs-CRP結(jié)果的一致性進行了比較分析，現(xiàn)將報告報道如下。

材料與方法

1 標本來源 選取2018年3～7月來深圳龍華區(qū)人民醫(yī)院門診就診的感染發(fā)燒患者156例，年齡12～57歲，平均28±21.03歲，其中男89例，女67例。所有研究對象均知情并簽定知情同意書，且經(jīng)同醫(yī)院倫理委員會同意批準。

2 儀器與試劑強生VITROS5600全自動干片生化免疫分析儀、hs-CRP試劑盒及校準品由美國強生公司提供；貝克曼AU5800全自動生化分析儀、hs-CRP試劑盒及校準品由美國Bankman公司提供；BC-5390全自動血球儀-超敏C反應蛋白一體機、hs-CRP試劑盒及校準品均由深圳邁瑞公司提供。

3 方法

3.1 標本采集：所有研究對象均采集靜脈血2管，一管2 mL加入EDTA-K2抗凝管內(nèi)，充分混勻；另一管3～5 mL于一次性無抗凝劑的干燥管內(nèi)，及時送檢。

3.2 標本處理：無抗凝劑靜脈血室內(nèi)靜置30 min后于3 500 r/min離心機離心5 min，分離血清及時進行檢測，不能及時檢測的標本置于2℃～8℃冰箱內(nèi)保存并盡快檢測；全血標本充分混勻后及時進行檢測，2 h內(nèi)必須完成檢測。

3.3 hs-CRP檢測：檢測前對VITROS5600、AU5800及5390分析儀進行保養(yǎng)、定標及校正，然后進行各儀器配套的室內(nèi)質(zhì)控物進行檢測，待結(jié)果在控后再進行研究標本檢測，確保檢測結(jié)果的準確性。VITROS5600和AU5800生化分析儀器檢測患者血清中hs-CRP濃度，BC-5390血球-超敏C反應蛋白一體機檢測全血中hs-CRP濃度，所有操作均嚴格按儀器、試劑盒說明書及科室SOP文件進行。

4 統(tǒng)計學處理 采用GraphPad Prism 5及EXCEL對所有數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析及作圖，計量資料采用平均值±標準差（ ±s）表示，組間比較采用t檢驗，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

結(jié) 果

1 三種不同儀器檢測hs-CRP濃度比較 156例患者血清中hs-CRP濃度參考儀器檢測結(jié)果為93.64±79.74 mg/L，邁瑞B(yǎng)C-5390全自動血球-超敏C反應蛋白一體機檢測的結(jié)果為87.98±76.57 mg/L，兩者差異無統(tǒng)計學意義（t=0.912 4，P＞0.05），而VITROS5600干片生化免疫分析儀檢測的結(jié)果為182.38±158.79 mg/L，明顯高于參考儀器，差異有統(tǒng)計學意義（t=6.805 6，P＜0.05）。

2 三種不同儀器檢測hs-CRP濃度相關(guān)性 3種儀器檢測hs-CRP濃度之間均呈正向相關(guān)性，5390血球-超敏C反應蛋白一體機與AU5800生化分析儀檢測hs-CRP結(jié)果之間相關(guān)系數(shù)（r2）為0.968 536；VITROS5600干片生化免疫分析儀與AU5800之間相關(guān)系數(shù)（r2）為0.952 974，結(jié)果見圖1、2。

圖1 BC5390和AU5800檢測hs-CRP結(jié)果相關(guān)性

圖2 VITROS5600和AU5800檢測hs-CRP結(jié)果相關(guān)性

討 論

C反應蛋白（C-reactive protein，CRP）是由白細胞介素-6（IL-6）誘導肝臟合成的急性時相反應蛋白[2]，各種急性和慢性感染、組織損傷、惡性腫瘤、手術(shù)創(chuàng)傷等均可導致CRP水平迅速升高，4～6 h開始升高，36～50 h達到峰值，病變好轉(zhuǎn)時又迅速降至正常[3]，且不受年齡、血型、體溫、貧血、妊娠等因素的影響，是可靠和靈敏的炎性反應急性期反應指標[4，5]，且術(shù)后CRP檢測有助于感染、深靜脈血栓及彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）等并發(fā)癥的監(jiān)測[6，7]。hs-CRP 超敏C反應蛋白是臨床實驗室采用超敏感檢測技術(shù)，能準確檢測低濃度C反應蛋白，提高了試驗的靈敏度和準確度，是診斷低水平炎癥狀態(tài)的靈敏指標[8，9]，血清hs-CRP水平與動脈粥樣硬化及急性腦梗死（ACI） 的發(fā)生、嚴重程度及預后密切相關(guān)[10，11]。因此，及時、快速為臨床提供準確的hs-CRP結(jié)果，對臨床疾病的診斷、療效的判斷及并發(fā)癥的發(fā)生監(jiān)控具有十分重要的意義。

目前，實驗室檢測CRP的方法很多，如酶聯(lián)免疫分析、放射免疫分析、免疫比濁法（速率散射比濁法和免疫透射比濁法）、免疫層析法及免疫速率法[12-14]，檢測儀器從單機到多用機，儀器和試劑盒的檢測靈敏度也越來越高，速度也越來越快，為臨床快速地提供了準確的hs-CRP結(jié)果。但不同儀器、試劑及方法學原理不同及檢測系統(tǒng)的差異，相同項目經(jīng)不同儀器實際檢測的結(jié)果存在明顯差異[15-20]，給治療帶來一定困難。本研究結(jié)果顯示，貝克曼AU5800全自動生化分析儀檢測的hs-CRP結(jié)果稍高于邁瑞B(yǎng)C-5390全自動血球-超敏C反應蛋白一體機，但差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），兩者結(jié)果具有良好的一致性，這可能與這兩種不同儀器檢測hs-CRP都采用免疫比濁法有關(guān)，兩者之間的細微差異可能與這兩種不同儀器的性能上存在一定差異有關(guān)。而強生VITROS5600干片生化免疫分析儀檢測hs-CRP結(jié)果明顯高于AU5800和BC-5390分析儀，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），這可能與VITROS5600分析儀采用免疫速率法檢測hs-CRP，檢測方法學原理不同于另外2種儀器等有關(guān)。但3種不同儀器所檢測hs-CRP結(jié)果之間具有良好的正相關(guān)（r=0.953 0～0.968 5），這也說明了不同方法學所導致檢驗結(jié)果不一致性，屬于系統(tǒng)性誤差，可以通過調(diào)節(jié)相關(guān)系數(shù)來加以校正，達到不同儀器檢測相同項目結(jié)果的一致性。

綜上所述，不同儀器、試劑及方法學檢測相同項目時會影響結(jié)果的一致性，但結(jié)果之間相關(guān)性很好，可通過調(diào)節(jié)系數(shù)達到結(jié)果的一致性。確保實驗室檢測結(jié)果一致性最理想的方法是同一實驗室最好采購相同的儀器和試劑，否則要對不同儀器、試劑及方法學對檢測結(jié)果一致性的影響進行評估，并加以校正。