張時雨，張?zhí)K芳，劉 福，馬深成，賈春燕，申衛(wèi)星，張 真，孔祥波＊

(1. 中國林業(yè)科學(xué)研究院森林生態(tài)環(huán)境與保護(hù)研究所，國家林業(yè)和草原局森林保護(hù)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100091；2. 山東省泰安市泰山風(fēng)景名勝區(qū)管理委員會，山東 泰安 271000)

雙條杉天牛（Semanotus bifasciatus Motschulsky）是東亞特有的鞘翅目害蟲，廣泛分布于中國東北、華北、西北和華東等地區(qū)以及朝鮮、韓國和日本等國家。主要危害側(cè)柏（Platycladus orientalis （L.)Franco）、檜柏（Sabina chinensis (L.) Ant. ）和羅漢 松 （ Podocarpus macrophyllus （ Thunb.） D.Don）等樹種，尤其對我國北方地區(qū)的側(cè)柏林構(gòu)成重大威脅[1]。雙條杉天牛成蟲傾向于在衰弱樹或新伐倒木樹皮翹裂縫深處產(chǎn)卵，幼蟲可在韌皮部和木質(zhì)部蛀成不規(guī)則坑道，切斷和破壞寄主的輸導(dǎo)組織，影響?zhàn)B分的運(yùn)輸最終導(dǎo)致寄主死亡[2]。由于幼蟲在樹皮下隱蔽危害，化學(xué)藥劑防控困難，目前主要的防治手段是餌木誘殺，雖有效果但耗時耗力、不可持續(xù)。

昆蟲表皮碳?xì)浠衔锸抢ハx表皮蠟質(zhì)層中的主要成分，大多為碳數(shù)在20～50、直鏈或支鏈、飽和或不飽和的烴類化合物[3]。表皮碳?xì)浠衔镌诶ハx生存中扮演著重要的角色，能夠起到防止水分散失，避免機(jī)械擦傷，隔離微生物和化學(xué)物質(zhì)的屏障作用[4-5]，同時也能作為昆蟲化學(xué)分類特征[6-7]。此外，其也能介導(dǎo)物種和性別識別，是雌雄交配信號傳遞的基礎(chǔ)[8-10]，在昆蟲生殖行為中扮演重要的角色。昆蟲體壁碳?xì)浠衔锏慕M成受到多種因素的影響，包括性別、齡期、性成熟度以及社會性昆蟲的多態(tài)性[11]。Sano等[12]發(fā)現(xiàn)鋪道蟻（Tetramorium caespitum L.）體壁碳?xì)浠衔镏蠧15～C31之間的單甲基支鏈烷烴含量為45%～56%、正烷烴含量為16%～40%、烷烯烴含量為10%～20%，相對豐度具有特異性的甲基支鏈烷烴和烷烯烴在識別同種種群和防止非同巢穴蟻群侵入方面具有信號識別作用。Balbuena等[13]發(fā)現(xiàn)無刺蜂（Tetragonisca angustula Latreille）負(fù)責(zé)守衛(wèi)的工蜂體壁碳?xì)浠衔镏械募谆ф溚闊N的相對豐度比巢內(nèi)工蜂及負(fù)責(zé)覓食的工蜂高很多，行為試驗(yàn)說明體壁碳?xì)浠衔镌诜N姓識別方面具有重要作用。我們在室內(nèi)進(jìn)行雙條杉天牛交配行為試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)只有在雄蟲觸角接觸到雌蟲鞘翅體壁后，才能立即發(fā)生交尾行為，這說明體壁碳?xì)浠衔锟勺鳛榻佑|性識別信息素在雌雄成蟲交配過程中發(fā)揮重要作用。本研究對雙條杉天牛老熟幼蟲、剛羽化的成蟲和揚(yáng)飛期成蟲體壁碳?xì)浠衔镞M(jìn)行分析，探討體壁碳?xì)浠衔锍煞衷诓煌猿墒於鹊南x期中的變化規(guī)律，為進(jìn)一步研究其在生殖行為中的功能奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 雙條杉天牛的采集

2017年3月上旬在山東省泰安市泰山靈巖寺林區(qū)（36°21′46.95″N，116°58′32.29″E）側(cè)柏餌木堆中采集雙條杉天牛成蟲，此時達(dá)到性成熟的成蟲被餌木誘集并交配繁殖。雌蟲和雄蟲分別單獨(dú)裝入4 mL離心管中，帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行體壁碳?xì)浠衔锾崛　Ｍ瑫r將雙條杉天牛已經(jīng)在其中產(chǎn)卵的餌木截成50 cm左右的木段運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，置于養(yǎng)蟲籠內(nèi)于10月中旬劈開餌木收集老熟幼蟲，12月上旬劈開餌木收集羽化不久的成蟲進(jìn)行體壁碳?xì)浠衔锏奶崛　?/p>

1.2 化學(xué)試劑

十一甲基二十五烷烴（11Me-C25，CAS：5689-71-1）、十一甲基二十六烷烴（11Me-C26，CAS：68547-06-8）和十一甲基二十七烷烴（11Me-C27，CAS：15689-68-6）（純度≥ 98%）標(biāo)準(zhǔn)品均購自Chemtech MD 公司（8035 Paphos，Cyprus）。C8～C40混合碳標(biāo)及單一碳標(biāo)C22和C29（純度≥99%）均購自美國AccuStandard公司（New Haven，Connecticut，USA）。

1.3 表皮碳?xì)浠衔锏奶崛?/h3>

1.3.1 固相微萃取法（SPME） 使用Supelco70-μm Carbowax/divinylbenzene（CAR/DVB）纖維頭（573360U，Yellow-Green，Supelco Inc.，Bellefonte，PA）提取3月份林間揚(yáng)飛期采集的雌成蟲（n=5）、雄成蟲（n=5），餌木木質(zhì)部剛羽化的雌成蟲（n=4）、雄成蟲（n=4頭）及餌木木質(zhì)部中的老熟幼蟲（n=4）體壁碳?xì)浠衔锍煞帧Ｓ描囎訆A住試蟲，用纖維頭單向輕緩地摩擦試蟲鞘翅表面30次，每兩次摩擦之間均旋轉(zhuǎn)纖維頭。取樣結(jié)束后立即將纖維頭進(jìn)GC-MS進(jìn)行體壁碳?xì)浠衔锍煞址治觥?/p>

1.3.2 溶劑浸提法 使用移液槍取1 mL分析純正己烷淋洗雙條杉天牛揚(yáng)飛期雌成蟲（n=5）和雄成蟲（n=5）及木質(zhì)部中剛羽化的雌成蟲（n=6）和雄成蟲（n=5）體壁，每頭成蟲淋洗6次（共計6 mL淋洗液），提取成蟲體壁碳?xì)浠衔铩Ｓ? mL色譜純正己烷浸泡雙條杉天牛幼蟲（n=8）3 min，提取幼蟲體壁碳?xì)浠衔锍煞?。成蟲體壁淋洗液及幼蟲浸提液在微弱的氮?dú)饬飨聺饪s至2 mL，放入-20℃冰箱中保存以備GC-MS分析。

1.4 GC-MS分析

固相微萃取法和溶劑提取法提取的樣品以及標(biāo)準(zhǔn)品均在Finnigan Trace DSQ氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀上分析。氣相色譜分析條件：進(jìn)樣口和傳輸線溫度均為220 ℃，氦氣為載氣（流速1.0 mL·min-1），HP-5MS 毛細(xì)管色譜柱（30 m×0.25 mm i.d. × 0.25 μm膜厚，J&W Scientific，F(xiàn)olsom，CA，USA）。色譜升溫程序：60 ℃保持1 min，10 ℃·min-1升溫至300 ℃，保持10 min。質(zhì)譜分析條件為：在燈絲電流70 eV的電子轟擊源（EI）模式下，離子源溫度為220℃。全掃描質(zhì)量范圍是41～560 amu，以獲取總離子流色譜圖（TIC）進(jìn)行定性定量分析。固相微萃取CAR/DVB纖維頭插入進(jìn)樣口，在無分流模式下熱解析1 min，然后開始運(yùn)行色譜程序。

體壁碳?xì)浠衔锏亩ㄐ澡b定是通過與標(biāo)準(zhǔn)品比較色譜保留時間、特征碎片離子及豐度比以及使用Kováts保留指數(shù)和NIST11譜庫進(jìn)行輔助鑒定。體壁碳?xì)浠衔锔魃V峰定量方法是與加入的已知含量的C22峰面積進(jìn)行比較，確定各成分的絕對含量。

1.5 統(tǒng)計分析

C8～C40混合碳標(biāo)進(jìn)行GC-MS分析，記錄各烷烴的保留時間，根據(jù)下面公式對分析樣品的Kováts保留指數(shù)值進(jìn)行計算[14]。

“N”和“n”表示分析樣品色譜峰前后正烷烴色譜峰具有的碳原子數(shù)量，“tR（N）”和“tR（n）”表示分析樣品前后正烷烴標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰的保留時間，“tR（unknown）”表示待鑒定樣品色譜峰保留時間。

SPME分析獲得的百分含量數(shù)據(jù)經(jīng)過arcsin√p轉(zhuǎn)化后進(jìn)行單因素方差分析（ANOVA），采用LSD法對處理間平均數(shù)進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)（α=0.05和α=0.01，SPSS Statistics17.0）。絕對含量數(shù)據(jù)進(jìn)行非參數(shù)檢驗(yàn)（Nonparametric tests），對同一成分在不同蟲期含量數(shù)據(jù)采用Kruskal-Walls檢驗(yàn)分析，組間差異顯著的成分再進(jìn)一步進(jìn)行兩兩比較（α=0.05 和 α=0.01，SPSS Statistics17.0）。

2 結(jié)果與分析

2.1 SPME提取的雙條杉天牛3個蟲期體壁碳?xì)浠衔锓治?/h3>

固相微萃取法提取雙條杉天牛3個蟲期體壁碳?xì)浠衔锓治鼋Y(jié)果表明，體壁碳?xì)浠衔锍煞种饕烧闊N、烷烯烴和甲基支鏈烷烴構(gòu)成（圖1，表1）。幼蟲體壁碳?xì)浠衔镏衝-C27、n-C25和角鯊烯（squalene）含量較高，三者占總碳?xì)浠衔锖康?1.75%；其次為3Me-C25和n-C29，含量占25.90%。在個別幼蟲體壁碳?xì)浠衔镏袡z測出n-C15和n-C16成分，在全部幼蟲體壁中未檢測出11Me-C25、11Me-C26、11Me-C27和 3Me-C27成分。剛羽化的成蟲體壁碳?xì)浠衔镏衝-C25和n-C27含量較高，未檢測到3Me-C27、n-C31和角鯊烯成分，雄成蟲比雌成蟲多n-C15、n-C16和n-C19，其他成分雌雄一致且3Me-C25、11Me-C27和n-C28在雌雄體壁碳?xì)浠衔镏胁町愶@著。揚(yáng)飛期雌雄成蟲體壁碳?xì)浠衔锍煞忠恢?，n-C25含量最高，其次是 n-C26和 3Me-C25。另外，11Me-C25、3Me-C25、11Me-C26、11,15diMe-C27和n-C285種成分在雌雄成蟲體壁中的相對百分含量差異顯著。27

圖 1 固相微萃取提取雙條杉天牛老熟幼蟲體壁碳?xì)浠衔锏目傠x子流色譜圖Fig. 1 Total ion chromatogram of the cuticular hydrocarbonssampled by SPME from mature larvae of Semanotus bifasciatus

碳?xì)浠衔锍煞謓-C23、n-C24和3Me-C27僅在揚(yáng)飛期雌雄成蟲體壁中檢測到，且在雌雄兩性成蟲中相對含量差異不顯著。n-C25在3個蟲期體壁中相對百分含量均最高，相互間差異不顯著。n-C26在揚(yáng)飛期雌雄成蟲體壁中的含量極顯著高于幼蟲和剛羽化的雌雄兩性成蟲（F=33.77，P=0.001）。n-C在3個蟲期體壁碳?xì)浠衔镏邢鄬Π俜趾砍氏陆第厔?，且揚(yáng)飛期雌雄成蟲相對百分含量極顯著低于幼蟲和剛羽化的雌雄成蟲（F=9.66，P=0.001）。n-C28在3個蟲期中相對百分含量均較低，剛羽化的雌成蟲體壁中的含量顯著高于其他蟲期（F=12.78，P=0.02）。n-C29在幼蟲體壁中的含量極顯著高于剛羽化的雌雄成蟲體壁中的含量（F=42.49，P=0.01），但是在揚(yáng)飛期雌雄成蟲中未檢測到該成分。n-C31僅在幼蟲體壁碳?xì)浠衔镏袡z測到。

表 1 雙條杉天牛不同蟲期固相微萃取法提取的體壁碳?xì)浠衔锏腉C-MS分析結(jié)果Table 1 Cuticular hydrocarbons analyzed by SPME-GC-MS from different developmental stages of Semanotus bifasciatus

體壁碳?xì)浠衔镏?1Me-C25的含量隨蟲體的發(fā)育呈現(xiàn)增長，在揚(yáng)飛期雌雄兩性中占比極顯著高于剛羽化的雌雄兩性（F=57.32，P=0.001），且在揚(yáng)飛期雄性成蟲體壁中的占比極顯著高于雌性（F=12.86，P=0.016）。11Me-C26在揚(yáng)飛期雄成蟲體壁碳?xì)浠衔镏械恼急雀哌_(dá)11.95%，而在其他蟲期中該成分的占比僅在1.5%～3.0%之間，極顯著高于其他蟲期體壁碳?xì)浠衔镏械恼急龋‵=56.65，P=0.001）。11Me-C27在揚(yáng)飛期雌雄兩性成蟲及剛羽化的雌蟲體壁碳?xì)浠衔镏兴急壤嘟也町惒伙@著，但是顯著高于剛羽化的雄成蟲（F=6.69，P=0.009）。3Me-C25在雌成蟲體壁碳?xì)浠衔镏姓急蕊@著高于雄成蟲（F=5.90，P=0.045）。3Me-C27在揚(yáng)飛期雌雄兩性成蟲體壁碳?xì)浠衔镏姓急炔町惒伙@著。11,15diMe-C27在幼蟲與揚(yáng)飛期雄成蟲之間占比差異不顯著（P＞0.05），在剛羽化的雌雄成蟲及揚(yáng)飛期的雌成蟲之間差異也不顯著。該成分在揚(yáng)飛期雌雄成蟲體壁碳?xì)浠衔锵鄬块g差異顯著（F=12.78，P=0.023）。

2.2 溶劑浸提法提取的3個蟲期體壁碳?xì)浠衔锓治?/h3>

幼蟲體壁碳?xì)浠衔镏衝-C31（1.44 ng）是成蟲所不具有的，這與SPME分析結(jié)果一致；但是沒有檢測到角鯊烯，這與SPME分析結(jié)果相反。在幼蟲體壁碳?xì)浠衔镏形礄z測到C15～C24的正烷烴及11Me-C26、11Me-C27和3Me-C27的甲基支鏈烷烴。剛羽化的雌雄成蟲體壁碳?xì)浠衔锍煞只疽恢?，且雌雄間含量差異不顯著；n-C15和n-C16僅在剛羽化的雄成蟲體壁中存在，而n-C18在剛羽化的雌雄成蟲體壁中均檢測到。在揚(yáng)飛期性成熟的雌雄成蟲體壁碳?xì)浠衔锍煞忠恢?，但?1Me-C26（χ2=4.50，P=0.034）、11Me-C27（χ2=6.00，P=0.034）、11,15diMe-C27（χ2=5.06，P=0.023）和3Me-C27（χ2=4.50，P=0.034）在雌性成蟲體壁中的含量均顯著高于雄性成蟲體壁中的含量；n-C23、11Me-C26和3Me-C27在幼蟲和剛羽化的雌雄成蟲體壁中未檢測到，在揚(yáng)飛期雌雄成蟲體壁碳?xì)浠衔镏泻拷橛?～13 ng之間。其他成分含量雌雄個體間雖然沒有統(tǒng)計差異（例如，3Me-C25，χ2=3.76，P=0.053），但是雌性個體體壁碳?xì)浠衔锖烤哂谛坌詡€體（n-C23和n-C24除外）（表2）。

表 2 雙條杉天牛不同蟲期溶劑浸提法提取的體壁碳?xì)浠衔颎C-MS分析結(jié)果Table 2 Cuticular hydrocarbons analyzed by hexane extract-GC-MS from different developmental stages of Semanotus bifasciatus

n-C24在雌雄成蟲間差異不顯著（χ2=6.60，P=0.086），但是剛羽化的雌雄成蟲體壁中的含量均低于揚(yáng)飛期雌雄成蟲體壁中的含量。n-C25在幼蟲體壁中含量顯著低于剛羽化的雌蟲（χ2=8.817，P=0.003）、揚(yáng)飛期雌蟲（χ2=6.00，P=0.014）和揚(yáng)飛期雄蟲（χ2=4.50，P=0.034）體壁中的含量；相反n-C27在幼蟲體壁中含量顯著高于剛羽化的雌蟲（χ2=9.60，P=0.002）、雄蟲（χ2=7.39，P=0.007）；以及揚(yáng)飛期的雌蟲（χ2=8.595，P=0.003）和雄蟲（χ2=6.00，P=0.014）體壁中的含量。n-C26在幼蟲和剛羽化的雌雄成蟲體壁中含量差異不顯著，均在2～3 ng之間，而在揚(yáng)飛期雌雄兩性成蟲體壁中該成分的含量顯著增高（χ2=6.00，P=0.014），達(dá)到30～60 ng。n-C28在3個蟲期的體壁碳?xì)浠衔镏芯粰z測到，含量在1.5～6.5 ng之間，且各蟲期間差異不顯著。n-C29在揚(yáng)飛期成蟲體壁中未被發(fā)現(xiàn)，在幼蟲體壁中的含量顯著高于剛羽化的雌雄兩性成蟲（χ2=2.40，P=0.012）。

11Me-C25在揚(yáng)飛期雌雄兩性成蟲體壁碳?xì)浠衔镏械暮匡@著高于剛羽化的雌雄成蟲及幼蟲。3Me-C25在3個蟲期體壁碳?xì)浠衔镏泻坎町愶@著（幼蟲期：剛羽化成蟲期，χ2=9.60，P=0.002；剛羽化成蟲：揚(yáng)飛期成蟲，χ2=7.50，P=0.006），且含量隨著天牛的發(fā)育明顯增多，由幼蟲期的5.79 ng增長到揚(yáng)飛期雌性成蟲中的67.27 ng。11Me-C27在揚(yáng)飛期雌性成蟲體壁中的含量顯著高于剛羽化的雌雄兩性成蟲和揚(yáng)飛期雄性成蟲體壁中的含量（χ2=6.00，P=0.014），且隨著雌雄成蟲的發(fā)育呈現(xiàn)增長趨勢。11,15diMe-C27在幼蟲、未成熟兩性成蟲和成熟雄性體壁中的含量差異不顯著，但在揚(yáng)飛期雌性成蟲體壁中的含量顯著增高（χ2=7.53，P=0.006）。3Me-C27在揚(yáng)飛期雌成蟲體壁中的含量顯著高于雄成蟲體壁中的含量（χ2=4.50，P=0.034）。

3 討論

昆蟲體壁碳?xì)浠衔锛染哂斜Ｗo(hù)昆蟲的物理功能，又具有種內(nèi)化學(xué)信息交流和種間物種識別等生物學(xué)功能，其種類組成及含量可隨著發(fā)育階段的變化而變化。例如，點(diǎn)蜂緣蝽（Riptortus pedestris Fabricius）不同發(fā)育階段體壁碳?xì)浠衔镏饕煞钟?7%～63%的正烷烴構(gòu)成，其次是單甲基支鏈烷烴和二甲基支鏈烷烴。若蟲期主要碳?xì)浠衔锍煞质莕-C29；剛羽化的成蟲主要成分是n-C27，也含有很多甲基支鏈烷烴；成蟲期主要成分是n-C31、n-C27、13,17diMe-C33和 15,19diMe-C33[15]。天?？评ハx雌雄生殖交流的化學(xué)信號多為體壁碳?xì)浠衔镏械募谆ф溚闊N或者烯烴以及少數(shù)正烷烴。例如，厚墊黃帶蜂天牛（Megacyllene caryae Gahan）的接觸性信息素成分是Z9-C29[16]，而南美硬木鋸天牛（Mallodon dasystomus Say）的接觸性信息素成分是2Me-C26和2Me-C28[17]，這2種天牛雌雄體壁碳?xì)浠衔锍煞旨昂烤泻艽蟛町?。作為介?dǎo)雌雄識別的化學(xué)信號通常是由多種碳?xì)浠衔锝M成，有的起主導(dǎo)作用，有的起增效作用。例如，黑腹尼虎天牛（Neoclytus acuminatus acuminatus Fabricius）雌成蟲具有6種甲基支鏈的烷烴是雄成蟲所不具有的，其中7Me-C27、7Me-C25和9Me-C27占其體壁碳?xì)浠衔锟偭康?0%左右，7Me-C27單獨(dú)使用就能激起雄成蟲的交尾行為，而與7Me-C25和9Me-C27共同使用具有與雌成蟲相同的生物活性[18]。

本研究明確了雙條杉天牛老熟幼蟲、剛羽化的成蟲及揚(yáng)飛期成蟲3個發(fā)育階段蟲體體壁碳?xì)浠衔锏慕M成及變化規(guī)律。不同蟲期雙條杉天牛體壁碳?xì)浠衔锍煞种饕–15～C31之間的正烷烴、5種單甲基支鏈烷烴和1種二甲基支鏈烷烴。揚(yáng)飛期成蟲雌雄體壁成分沒有質(zhì)的差異，但是4種甲基支鏈烷烴在雌蟲體壁中含量顯著高于雄蟲。剛羽化的雌雄成蟲體壁碳?xì)浠衔锍煞譀]有質(zhì)和量的差異。n-C23、n-C24、n-C25、11Me-C25、3Me-C25、n-C26、11Me-C26和3Me-C27在雙條杉天牛體壁中的含量隨著蟲齡的增加而顯著增高，而n-C15、n-C16、n-C29和n-C31正烷烴含量減少直至消失，體壁碳?xì)浠衔锓N類及含量隨著發(fā)育時間的變化而變化可能與不同蟲態(tài)代謝差異有關(guān)[19]，同時這幾種物質(zhì)的變化也可能與雙條杉天牛發(fā)育成熟后物種信息識別和種群繁衍等生物功能相關(guān)。雙條杉天牛幼蟲和揚(yáng)飛期成蟲體壁碳?xì)浠衔锉容^分析發(fā)現(xiàn)，幼蟲體壁碳?xì)浠衔镏胁缓?1Me-C26、11Me-C27和3Me-C27；幼蟲不具有交配行為，這3種成分的缺失可能意味著其在成蟲生殖行為中扮演著重要的生物學(xué)功能。11Me-C26、11Me-C27和3Me-C27這3種成分的絕對含量在揚(yáng)飛期雌雄兩性成蟲中差異顯著，可能暗示著雄成蟲是根據(jù)這3種成分量的差異來鑒別異性從而順利完成交配行為。另外，11Me-C25、3Me-C25和11,15diMe-C27在雌雄兩性成蟲體壁碳?xì)浠衔镏械恼急炔町愶@著，也不排除其參與雌雄兩性配偶識別。一種或多種組分在一定比例下可能作為雙條杉天牛的接觸性識別信息素或增效劑介導(dǎo)性識別，在將來的研究中需要對雙條杉天牛的接觸性信息素的存在與否進(jìn)行驗(yàn)證，并對接觸性信息素的具體比例開展進(jìn)一步研究。

昆蟲體壁碳?xì)浠衔锛瓤梢宰鳛榉N間物種鑒別的重要特征，又可以探討不同地理種群之間的差異，甚至在親代養(yǎng)育中也發(fā)揮重要作用。隨著昆蟲發(fā)育階段的不同，體壁碳?xì)浠衔锾幵趧討B(tài)變化的過程中。部分成分隨著蟲體發(fā)育含量顯著上升，但是占比不變或者下降，部分成分在同時期雌雄兩性間含量和占比差異顯著；特別是幼蟲和成蟲相比體壁碳?xì)浠衔锍煞旨昂看嬖诤艽蟛町悺３上x期體壁碳?xì)浠衔锓€(wěn)定，作為種類鑒別特征更具有代表性，而幼蟲期體壁碳?xì)浠衔锊贿m合作為種類鑒定的特有特征。在物種鑒別方面，盡管黑山大小蠹（Dendroctonus ponderosae Hopkings）和光背大小蠹（D. jeffreyi Hopkins）體壁碳?xì)浠衔锘疽恢?，但?,7-二甲基烷烴能夠很好的區(qū)分這兩個近緣種。瘤額大小蠹（D. frontalis Zim.），其特征體壁碳?xì)浠衔锸?,X-二甲基二十九烷烴，而西松大小蠹（D. brevicomis LeConte）的特征體壁碳?xì)浠衔锸荂31～C35的正烷烴。寄主和地理差異沒有從本質(zhì)上改變瘤額大小蠹體壁碳?xì)浠衔锏牟町悾掖菩巯x體壁碳?xì)浠衔镆矝]有質(zhì)和量的差異[6]。臺灣乳白蟻（Coptotermes formosanus Shiraki）4個地理種群工蟻和兵蟻體壁碳?xì)浠衔餂]有質(zhì)的差異，但是工蟻7種碳?xì)浠衔锖坎町?、兵?種碳?xì)浠衔锖坎町惸軌騾^(qū)分不同地理種群，而種群內(nèi)部不同個體間這幾種成分含量差異很小[20]。雙條杉天牛體壁碳?xì)浠衔锸欠翊嬖诓煌乩矸N群間的差異，以及與其他天牛種類之間特征體壁碳?xì)浠衔锏漠愅?，我們將在今后的工作中開展進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

本研究通過氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀對3個蟲期的雙條杉天牛體壁碳?xì)浠衔镞M(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)不同蟲期的雙條杉天牛的體壁碳?xì)浠衔锎嬖陲@著差異。幼蟲體壁碳?xì)浠衔镏饕訡15～C31正烷烴為主，甲基支鏈烷烴種類和含量較少。隨著蟲齡的增長和成蟲羽化后時間的推移，體壁碳?xì)浠衔镏屑谆ф溚闊N的含量顯著增加，而正烷烴在體壁碳?xì)浠衔镏械恼急瘸氏陆第厔荨＿@對雙條杉天牛種間、種內(nèi)化學(xué)信號識別機(jī)制研究奠定基礎(chǔ)。