李華，彭音，陳芳，張琴，儲(chǔ)士潤(rùn),2

白及［Bletilla striata（Thunb.）Rchb.f.，B.striata］屬蘭科植物，其假鱗莖是一種常用的中藥材，具有抗菌、止血、生肌等功效［1-2］。二氫菲類化合物（Dihydrophenanthropyrans）是目前研究的從白及塊莖中分離得到的含量較多的藥用成分［3］。俞杭蘇等［4］和劉珈羽等［5］的研究表明，白及主要提取物對(duì)革蘭陽性菌的抑菌活性明顯比對(duì)革蘭陰性菌的強(qiáng)。近年來也有研究發(fā)現(xiàn)，從白及塊莖中分離的二氫菲類化合物對(duì)白假絲酵母菌等真菌也有抑制作用，而且白及化合物的抗菌活性與其結(jié)構(gòu)有關(guān)，對(duì)甲氧基化合物的抗菌作用減弱而對(duì)羥基芐化合物的抗菌活性增強(qiáng)［6］。但他們均未對(duì)白及二氫菲類化合物對(duì)臨床常見病原菌的抗菌性開展系統(tǒng)研究。

2017年全國(guó)細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)報(bào)告給出了2017年主要臨床分離菌種分布的前20位，其中大腸埃希菌、克雷伯菌屬、不動(dòng)桿菌屬、金葡菌、銅綠假單胞菌位于前五的位置，而且白假絲酵母菌也是臨床最常見的致病真菌。因此，對(duì)于這6種臨床常見病原菌的研究，以及開發(fā)針對(duì)這些病原菌的臨床新型抗生素的研究，具有重要意義。近年來，由于廣譜抗生素的不合理使用，包括醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)及工業(yè)中抗生素的濫用使得臨床常見致病菌獲得性耐藥［7-9］，加上基因遷移促進(jìn)細(xì)菌群體的耐藥性傳播而導(dǎo)致的細(xì)菌耐藥迅速蔓延［10］以及人們對(duì)耐藥菌檢測(cè)不力，導(dǎo)致多重耐藥菌快速增加［11］。目前，對(duì)多重耐藥菌和逆轉(zhuǎn)細(xì)菌多重耐藥性的研究已成為亟待解決的重要課題。

在前期研究中，本課題組已成功建立白及的植物組培快繁技術(shù)體系、愈傷組織誘導(dǎo)、原生質(zhì)體誘導(dǎo)和培養(yǎng)基礎(chǔ)體系和細(xì)胞懸浮技術(shù)體系。本研究擬從優(yōu)良江油產(chǎn)白及品系的愈傷組織、懸浮培養(yǎng)細(xì)胞和三年生塊莖共3種材料中進(jìn)行二氫菲類化合物成分的分離提取，進(jìn)一步開展3種材料中二氫菲類成分對(duì)金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌和白假絲酵母菌6種臨床菌株的抑菌作用研究，試闡釋白及二氫菲類化合物對(duì)臨床常見致病菌的藥理作用特征，為其臨床應(yīng)用奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，也為江油白及的藥用產(chǎn)品開發(fā)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

本研究的臨床菌株，金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus，S.aureus）、銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa，P.aeruginosa）、大腸埃希菌（Escherichia coli，E.coli）、肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumonia，K.pneumonia）、鮑曼不動(dòng)桿菌（Acinetobacter baumannii，A.baumannii）、白假絲酵母菌（Candida albicans，C.albicans），均是在江油市第二人民醫(yī)院重癥監(jiān)護(hù)室臨床病人的痰標(biāo)本中分離出來的臨床菌株，實(shí)驗(yàn)時(shí)間從2017年5月至2018年5月。實(shí)驗(yàn)用標(biāo)準(zhǔn)菌株：金黃色葡萄球菌（ATCC29213）、銅綠假單胞菌（ATCC27853）、大腸埃希氏菌（ATCC35218）、肺炎克雷伯菌（ATCC700603）、鮑曼不動(dòng)桿菌（ATCC19606）、白假絲酵母菌（ATCC90028）由四川省臨床檢驗(yàn)中心提供。實(shí)驗(yàn)用抗生素藥敏紙片頭孢呋辛（Cefuroxim，CXM，30 ug/L）、頭孢曲松（Ceftriaxone，CTR，30 ug/L）、美羅培南（Meropenem，MEM，10 ug/L）、伏立康唑（Voriconazole，VOR，1 ug/L）、伊曲康唑（Itraconazole，IRC，10 ug/L），這5種抗生素為本院臨床常用抗生素。實(shí)驗(yàn)用平板培養(yǎng)基為L(zhǎng)-B培養(yǎng)基。白及蒴果和三年生塊莖采集于江油市義新鄉(xiāng)茅庵村中藥材種植地。

1.1 白及實(shí)驗(yàn)材料的制備 取成熟未開裂的白及蒴果，利用白及組培快繁技術(shù)體系，誘導(dǎo)出白及原球莖，取一部分原球莖放入細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)體系，培養(yǎng)出懸浮培養(yǎng)細(xì)胞組織；另一部分原球莖繼續(xù)誘導(dǎo)成愈傷組織，取懸浮培養(yǎng)細(xì)胞和愈傷組織備用。將以上細(xì)胞組織和采集的三年生白及塊莖鮮品稱重，放入60℃鼓風(fēng)干燥箱中烘干至恒重。然后，分別取適量干品研磨，過60目篩，得白及懸浮培養(yǎng)細(xì)胞干粉、愈傷組織干粉和塊莖干粉備用。最后，將上述各白及干粉中的二氫菲類化合物參照靳冉等的方法進(jìn)行分離和測(cè)定，實(shí)驗(yàn)用二氫菲類標(biāo)準(zhǔn)品為2.7-二羥基-4-甲氧基-9.10-二氫菲。

1.2 二氫菲類化合物的抗菌性鑒定和抗菌濃度篩選 按CLSI2017推薦的瓊脂稀釋法測(cè)定實(shí)驗(yàn)臨床6種菌株和標(biāo)準(zhǔn)菌株的MIC值，取不同白及材料中分離獲取的二氫菲類化合物按倍比稀釋法制備瓊脂平板，使終濃度分別在0.1～10.0 mg/mL之間［5］形成11個(gè)不同的濃度梯度，菌株生長(zhǎng)受到抑制時(shí)的濃度為最低抑菌濃度（MIC值）。試驗(yàn)設(shè)三次重復(fù)，取平均值。

1.3 藥敏驗(yàn)證實(shí)驗(yàn) 將復(fù)蘇的菌株配置成濃度為0.5麥?zhǔn)蠁挝坏木鷳乙?，用無菌棉簽將其均勻涂布于M-H瓊脂培養(yǎng)基上。然后在L-B平板上分別貼上頭孢呋辛，頭孢曲松，美羅培南，伏立康唑，伊曲康唑的藥敏紙片，各紙片中心相距＞24 mm，紙片距平板內(nèi)緣＞15 mm，貼上后輕輕按壓紙片表面且不可移動(dòng)藥敏紙片。接著將平板置于35℃恒溫箱中培養(yǎng)，取出觀察，在24 h時(shí)用游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌圈的直徑。試驗(yàn)設(shè)三次重復(fù)，每次測(cè)量三次，取平均值。

將上述較易獲得的白及塊莖二氫菲類化合物干粉用超純水溶解，倒入M-H瓊脂培養(yǎng)基中使二氫菲類化合物的濃度為MIC值，并混勻制成含藥平板。接著采用連續(xù)劃線接種法，將已配置好的0.5麥?zhǔn)蠁挝坏木鷳乙和坎加诩尤肷鲜雠囵B(yǎng)基中。然后在培養(yǎng)細(xì)菌的每個(gè)平板上分別貼上頭孢呋辛，頭孢曲松，美羅培南3種抗生素藥敏紙片；在培養(yǎng)真菌的每個(gè)平板上分別貼上伏立康唑，伊曲康唑2種抗生素藥敏紙片。最后將其置于35℃恒溫箱中培養(yǎng)，取出觀察，在24 h時(shí)用游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌圈的直徑。試驗(yàn)設(shè)三次重復(fù)，每次測(cè)量三次，取平均值。實(shí)驗(yàn)對(duì)比以上兩次實(shí)驗(yàn)抑菌圈直徑的變化，判斷白及二氫菲類化合物是否具有逆轉(zhuǎn)臨床菌株耐藥性等作用。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以±s表示，多組均數(shù)比較采用單因素方差分析，計(jì)算P值，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三種材料白及二氫菲類化合物含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)稱取3種白及材料的干粉各100 g，采用高效液相色譜純化檢測(cè)后的二氫菲類化合物含量和9，10-二氫菲含量如表1所示。通過表1可以看出，每100 g白及干粉中，二氫菲類化合物含量和9，10-二氫菲含量從高到低的順序依次為：白及懸浮細(xì)胞組織＞白及塊莖＞白及愈傷組織，其中二氫菲類化合物和9，10-二氫菲含量最大的均是白及懸浮細(xì)胞組織，分別為401μg和58μg，同時(shí)3種白及材料中二氫菲類化合物含量均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而9，10-二氫菲含量只有愈傷組織與其他材料差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 100 g白及組織中二氫菲類化合物和9，10-二氫菲含量的檢測(cè)結(jié)果/（μg，±s）

表1 100 g白及組織中二氫菲類化合物和9，10-二氫菲含量的檢測(cè)結(jié)果/（μg，±s）

注：愈傷組織Dihs含量與懸浮細(xì)胞比較，t＝0.002，P＝0.000。9，10-Dih含量與懸浮細(xì)胞比較，t＝0.012，P＝0.001。塊莖Dihs含量與懸浮細(xì)胞比較，t＝0.004，P＝0.002。9，10-Dih含量與懸浮細(xì)胞比較，t＝0.636，P＝0.078

9，10-Dih含量58±7 29±4 51±6白及材料懸浮細(xì)胞愈傷組織塊莖Dihs含量401±14 329±11 353±13

2.2 白及二氫菲類化合物對(duì)6種菌株的最低抑菌濃度 用含不同白及材料提取的二氫菲類化合物的LB液體培養(yǎng)基培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)用6種菌，菌株菌落的數(shù)目、大小隨著二氫菲類化合物濃度的增加而減小，當(dāng)二氫菲類化合物濃度達(dá)到臨界值時(shí)，由于二氫菲類化合物對(duì)菌株的抑制作用太大而導(dǎo)致菌株不能生長(zhǎng)甚至死亡。當(dāng)二氫菲類化合物濃度達(dá)到抑菌濃度臨界值時(shí)，菌株大部分生長(zhǎng)受到抑制而只有少數(shù)能夠維持基礎(chǔ)生長(zhǎng)，因此培養(yǎng)皿中只有稀疏的少量菌落出現(xiàn)。白及二氫菲類化合物的最低抑菌濃度平均值如表2所示，菌落生長(zhǎng)情況如圖1所示。

表2 三種白及組織的二氫菲類化合物對(duì)6種菌株的最低抑菌濃度（MIC）

當(dāng)懸浮細(xì)胞二氫菲類化合物濃度為0.58 mg/mL時(shí)，培養(yǎng)金黃色葡萄球菌菌株的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)出稀疏的單菌落，甚至再培養(yǎng)基上無菌落生長(zhǎng)，因此懸浮細(xì)胞二氫菲類化合物對(duì)金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度平均值為0.58 mg/mL。同理，懸浮細(xì)胞二氫菲類化合物對(duì)銅綠假單胞菌、大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、白假絲酵母菌，最低抑菌濃度平均值依此為1.65 mg/mL、1.23 mg/mL、1.39 mg/mL、1.73 mg/mL、3.10 mg/mL。通過表2還可以看出，不同種材料的二氫菲類化合物對(duì)菌株的MIC平均值最小值和最大值也不盡相同，例如金黃色葡萄球菌MIC最小值為懸浮細(xì)胞是0.58 mg/mL、最大值為塊莖二氫菲類化合物是0.62 mg/mL，而白假絲酵母菌MIC平均值最小值為愈傷組織是3.07 mg/mL、最大值為懸浮細(xì)胞二氫菲類化合物是3.10 mg/mL，同時(shí)，同種白及材料的二氫菲類化合物對(duì)不同種菌株的最低抑菌濃度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而3種白及材料的二氫菲類化合物對(duì)每種菌株的最低抑菌濃度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

通過表2還可以看出，白及二氫菲類化合物對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC值最小，即對(duì)金黃色葡萄球菌抑菌作用最強(qiáng)，而對(duì)白假絲酵母菌的MIC值最大，即對(duì)白假絲酵母菌抑菌作用最弱。同時(shí)，二氫菲類化合物對(duì)銅綠假單胞菌等臨床常見的革蘭陰性桿菌均具有一定的抑制作用，其中對(duì)大腸埃希氏菌的抑菌作用最強(qiáng)（圖1）。

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果還可以看出，二氫菲類化合物對(duì)臨床菌株的抑制作用較強(qiáng)，而對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株抑制作用較弱。

表3 二氫菲類化合物作用前6種菌株對(duì)抗生素敏感性結(jié)果分析/（mm，±s）

表3 二氫菲類化合物作用前6種菌株對(duì)抗生素敏感性結(jié)果分析/（mm，±s）

注：表中“—”表示未檢測(cè)此項(xiàng)數(shù)據(jù)

菌株 藥敏圈直徑VOR IRC金黃色葡萄球菌ATCC29213銅綠假單胞菌ATCC27853大腸埃希氏菌ATCC35218肺炎克雷伯菌ATCC700603鮑曼不動(dòng)桿菌ATCC19606白假絲酵母菌ATCC90028 CXM 33.6±2.0 34.1±2.5— —21.3±0.1 25.7±0.7 16.8±6.2 23.2±1.3 15.6±0.2 19.5±2.1 CTR 32.0±1.6 32.0±2.5 19.2±0.8 26.6±0.8 31.7±2.1 37.9±1.1 28.0±2.0 32.0±2.1 16.0±0.4 22.5±1.0 MEM 19.2±0.1 32.8±0.8 12.1±0.4 20.3±0.8 28.9±1.0 25.3±0.2 25.0±0.8 25.8±0.8 18.4±0.6 20.5±2.5————17.8±0.4 18.9±0.2— —— ———14.7±0.5 16.1±0.4

表4 二氫菲類化合物作用后6種菌株對(duì)抗生素敏感性結(jié)果分析/（mm，±s）

表4 二氫菲類化合物作用后6種菌株對(duì)抗生素敏感性結(jié)果分析/（mm，±s）

注：表中“—”表示未檢測(cè)此項(xiàng)數(shù)據(jù)

菌株 藥敏圈直徑IRC CTR 34.4±1.1 36.4±0.1 20.8±2.3 27.2±0.6 34.3±1.1 39.2±1.4 28.1±1.9 33.1±1.1 16.6±1.1 27.6±1.6 CXM 34.7±0.7 35.7±0.6 MEM 20.6±0.1 36.1±3.2 16.3±4.1 19.3±0.8 28.3±0.2 25.3±0.2 30.5±1.1 27.7±0.8 18.3±0.7 18.0±1.1 VOR金黃色葡萄球菌ATCC29213銅綠假單胞菌ATCC27853大腸埃希氏菌ATCC35218肺炎克雷伯菌ATCC700603鮑曼不動(dòng)桿菌ATCC19606白假絲酵母菌ATCC90028— —25.6±1.6 27.6±1.4 22.6±2.0 24.9±0.6 17.1±0.7 23.1±1.4————21.3±0.7 19.4±0.1— —— —— —19.1±0.8 18.2±0.1

2.3 菌株藥物敏感性實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析 白及塊莖的二氫菲類化合物對(duì)菌株作用前后，6種菌株對(duì)抗生素藥物的敏感性變化情況如表3和表4所示。從兩個(gè)表中可以看出，二氫菲類化合物作用金黃色葡萄球菌后使其頭孢呋辛、頭孢曲松、美羅培南的抑菌圈直徑分別從33.6 mm、32.0 mm、19.2 mm增加到34.7 mm、34.4 mm、20.6 mm，肺炎克雷伯菌、白假絲酵母菌和金黃色葡萄球菌表現(xiàn)相似，其中對(duì)白假絲酵母菌作用最為顯著，抑菌圈直徑平均增加了4.4±0.3 mm；而當(dāng)二氫菲類化合物作用于大腸埃希氏菌、鮑曼不動(dòng)桿菌的美羅培南后，其抑菌圈直徑分別從28.9 mm、18.4 mm降低到28.3 mm、18.3 mm。

在本研究中，我們可以推測(cè)二氫菲類化合物可以增強(qiáng)金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌對(duì)頭孢呋辛，頭孢曲松，美羅培南3種抗生素的敏感性，也可以增強(qiáng)白假絲酵母菌對(duì)伏立康唑，伊曲康唑的敏感性，但影響白假絲酵母菌對(duì)抗生素敏感性的增強(qiáng)作用沒有對(duì)金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等細(xì)菌的作用強(qiáng)。同時(shí)，對(duì)作用于大腸埃希氏菌、鮑曼不動(dòng)桿菌的抗生素美羅培南，二氫菲類化合物表現(xiàn)出的是降低了細(xì)菌對(duì)美羅培南敏感性的作用。還可以發(fā)現(xiàn)白及二氫菲類化合物可以使一些抗生素對(duì)金黃色葡萄球菌（2A）、銅綠假單胞菌（2B）、大腸埃希氏菌（2C）、肺炎克雷伯菌（2D）的抑菌圈由耐藥狀態(tài)變?yōu)槊舾谢蛑薪闋顟B(tài)。見圖2。

綜上所述，二氫菲類化合物有增強(qiáng)臨床常見病原菌對(duì)抗生素敏感性的作用，但是對(duì)某些抗生素，二氫菲類化合物也有降低常見病原菌對(duì)抗生素的敏感性的作用，同時(shí)也具有逆轉(zhuǎn)常見病原菌耐藥性的作用。

3 討論

在白及二氫菲類化合物含量測(cè)定的實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)二氫菲類化合物含量和9，10-二氫菲含量最高的均是白及懸浮細(xì)胞組織，而且實(shí)驗(yàn)中從白及懸浮細(xì)胞組織材料中提取出的二氫菲類化合物對(duì)臨床常見病原菌的作用與其他材料無差異。實(shí)驗(yàn)用白及懸浮細(xì)胞組織是通過前期構(gòu)建的植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)體系的培養(yǎng)，經(jīng)過分離、提純得到的細(xì)胞組織，具有分散性好、細(xì)胞形態(tài)均一、生長(zhǎng)迅速、重復(fù)性好、易于控制等特點(diǎn)［12-13］。因此，白及懸浮細(xì)胞組織可用于白及藥理作用成分的大規(guī)模工廠化生產(chǎn)及作為轉(zhuǎn)變白及藥用活性成分生產(chǎn)方式的物質(zhì)基礎(chǔ)，也可作為胚性材料用于植物遺傳育種和植物生長(zhǎng)發(fā)育等研究［14］。因此，將白及懸浮細(xì)胞組織作為白及植株的替代品，從中獲得藥用活性成分含量高的實(shí)驗(yàn)研究性材料和應(yīng)用于醫(yī)藥領(lǐng)域的藥源性材料，具有重大應(yīng)用價(jià)值和廣闊的市場(chǎng)前景，同時(shí)對(duì)于白及的資源保護(hù)、開發(fā)利用及可持續(xù)發(fā)展有著重要的促進(jìn)意義。

在白及二氫菲類化合物抑菌作用的研究中，發(fā)現(xiàn)二氫菲類化合物具有較強(qiáng)的抑制臨床常見病原菌生長(zhǎng)的作用，并且二氫菲類化合物對(duì)革蘭陽性菌的抑菌活性比對(duì)革蘭陰性菌的強(qiáng)，對(duì)真菌的抑制作用較弱，這與俞杭蘇等［4］、劉珈羽等［5］的研究結(jié)果類似。但在本研究中，實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)具體的研究了江油地區(qū)白及3種材料中二氫菲類有關(guān)成分對(duì)臨床常見病原菌金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、白假絲酵母菌的抑菌特點(diǎn)和MIC值，這為江油地區(qū)白及藥用活性成分的臨床應(yīng)用研究提供了數(shù)據(jù)支撐和理論依據(jù)。同時(shí)，我們還發(fā)現(xiàn)江油地區(qū)白及二氫菲類化合物對(duì)金黃色葡萄球菌、鮑曼不動(dòng)桿菌的抑制作用比對(duì)銅綠假單胞菌、大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯菌、白假絲酵母菌的抑制作用強(qiáng)，而且還發(fā)現(xiàn)白及二氫菲類化合物對(duì)臨床菌株的抑制作用較強(qiáng)，而對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株抑制作用較弱（表2，圖1），這與前人的研究結(jié)果有不同的地方，這可能與中草藥白及種質(zhì)、有效成分提取方法、菌種及病原菌的臨床菌株耐藥性等因素有關(guān)［15-16］。

本研究還發(fā)現(xiàn)，白及二氫菲類化合物具有增強(qiáng)某些抗生素對(duì)臨床病原菌的作用，同時(shí)也具有逆轉(zhuǎn)常見病原菌對(duì)某些抗生素耐藥性的作用。近年來，臨床病原菌的多重耐藥問題，已經(jīng)成為現(xiàn)在微生物專業(yè)研究的熱點(diǎn)問題［17-19］。二氫菲類化合物是白及天然活性成分，具有綠色、安全、高效、毒副作用小等優(yōu)點(diǎn)［20］，同時(shí)本研究證實(shí)了白及二氫菲類化合物具有逆轉(zhuǎn)金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯菌等病原菌耐藥性的作用，這無疑為解決臨床病原菌多重耐藥的問題提供了新的解決問題的思路。但是白及二氫菲類化合物是否具有逆轉(zhuǎn)細(xì)菌多重耐藥性以及其逆轉(zhuǎn)多重耐藥性機(jī)制和抑制細(xì)菌生長(zhǎng)機(jī)制，還有待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)探索。

本實(shí)驗(yàn)通過白及二氫菲類化合物同病原菌共培養(yǎng)來驗(yàn)證二氫菲類化合物的抑菌作用，實(shí)驗(yàn)中二氫菲類化合物需經(jīng)過高溫高壓滅菌的過程，這可能導(dǎo)致其藥理活性的改變，加之實(shí)驗(yàn)中采用的提取方法會(huì)導(dǎo)致白及有效成分提取不充分，一定程度上會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。但由于本實(shí)驗(yàn)重復(fù)次數(shù)較多，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)龐大，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，排除95%CI之外的數(shù)據(jù)，因此，實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。本研究結(jié)果為具有抑菌作用中草藥應(yīng)用于臨床病原菌研究以及中草藥有效成分作為新型抗生素原材料的研究奠定了理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

（本文圖1，2見插圖4-4）

圖1 含白及二氫菲類化合物的LB液體培養(yǎng)基培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)用6種菌株的平板圖：1A為金黃色葡萄球菌，1B為銅綠假單胞菌，1C為大腸埃希菌，1D為肺炎克雷伯菌，1E為鮑曼不動(dòng)桿菌，1F為白假絲酵母菌

圖2 白及二氫菲類化合物對(duì)金黃色葡萄球菌（2A）、銅綠假單胞菌（2B）、大腸埃希菌（2C）、肺炎克雷伯菌（2D）逆轉(zhuǎn)耐藥性對(duì)比圖