魏綺琪　張穎

摘要：卵巢癌是女性常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，病死率較高。MicroRNA （miRNA）是一類廣泛存在于真核生物中的非編碼RNA（ncRNA），其通過(guò)靶向結(jié)合蛋白編碼基因的3'UTR序列，參與基因表達(dá)調(diào)控。miR-200家族包括miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-141和miR-429，與卵巢癌發(fā)展、轉(zhuǎn)移、耐藥及預(yù)后密切相關(guān)，其中研究證實(shí)miR-200c是多種腫瘤的潛在轉(zhuǎn)移相關(guān)因子，在卵巢癌中的作用也受到廣泛關(guān)注。本文從miRNA的形成、生物學(xué)功能、miR-200c在卵巢癌中的表達(dá)、對(duì)卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移的影響及其對(duì)卵巢癌化療的影響作一綜述。

關(guān)鍵詞：卵巢癌;miRNA;miR-200c;侵襲轉(zhuǎn)移;化療耐藥

中圖分類號(hào)：R730? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.03.016

文章編號(hào)：1006-1959（2020）03-0053-03

Study on the Relationship Between miR-200c and Ovarian Cancer

WEI Qi-qi1，2，ZHANG Ying1

（1.Guangdong Medical University，Zhanjiang 524000，Guangdong，China;

2.Department of Obstetrics and Gynecology，the Affiliated Hospital of Guangdong Medical University，Zhanjiang 524000，

Guangdong，China）

Abstract：Ovarian cancer is one of the common malignant tumors in women， with a higher mortality rate. MicroRNA （miRNA） is a type of non-coding RNA （ncRNA） widely found in eukaryotes. It is involved in gene expression regulation by targeting the 3'UTR sequence of a gene encoded by a binding protein. The miR-200 family includes miR-200a， miR-200b， miR-200c， miR-141， and miR-429， which are closely related to the development， metastasis， drug resistance， and prognosis of ovarian cancer. Studies have confirmed that miR-200c is a tumor The role of potential metastasis-related factors in ovarian cancer has also received widespread attention. This article reviews the formation of miRNA， its biological functions， the expression of miR-200c in ovarian cancer， its effect on ovarian cancer invasion and metastasis， and its effect on ovarian cancer chemotherapy.

Key words：Ovarian cancer;miRNA;miR-200c;Invasive metastasis;Chemoresistance

卵巢癌（ovarian cancer）是女性中第5大常見(jiàn)癌癥，在女性生殖系統(tǒng)腫瘤中發(fā)病率次于子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌，但其病死率極高[1，2]。根據(jù)國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟分期方法，卵巢癌早期患者（Ⅰ～Ⅱ期）的5年生存率可高至80%，而晚期（Ⅲ～Ⅳ期）患者僅為20%[3]。缺乏典型癥狀，難以早期診斷是其死亡率高、生存率低的主要原因[4]。MicroRNA （miRNA）是一類非編碼單鏈小分子RNA，可以參與基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控，從而影響腫瘤的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移等惡性生物學(xué)行為[5]，最早在線蟲(chóng)中被發(fā)現(xiàn)[6]，大量的研究表明，miRNA的失調(diào)與許多人類疾病相關(guān)，其中包括惡性腫瘤。miR-200是miRNA研究較深入的一個(gè)部分，包括miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-141和miR-429，miR-200家族不僅對(duì)腫瘤的增殖、侵襲有重要影響，同時(shí)還在腫瘤細(xì)胞對(duì)化療的敏感性的作用靶點(diǎn)中有重要影響[7]。有研究發(fā)現(xiàn)[8]，miR-200c在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中具有促癌或抑癌基因作用，且與卵巢癌密切相關(guān)。本文從miRNA的形成及生物學(xué)功能、miR-200c在卵巢中的表達(dá)、對(duì)卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移及卵巢癌化療的影響進(jìn)行綜述，旨在為卵巢癌的診斷與治療提供參考。

1 miRNA的形成

miRNA是一類內(nèi)源性的、長(zhǎng)度約20～24個(gè)核苷酸的非編碼單鏈小分子RNA[5]。miRNA存在3種形式，最原始的狀態(tài)是pri-miRNA，長(zhǎng)度大約為300～1000個(gè)堿基;pri-miRNA經(jīng)過(guò)Dicer酶酶切后，形成pre-miRNA即miRNA前體，長(zhǎng)度大約為70～90個(gè)堿基;pre-miRNA再經(jīng)過(guò)一次Dicer酶酶切后，最終形成長(zhǎng)度為20～24個(gè)堿基的成熟miRNA。miRAN在基因位置及序列上呈現(xiàn)出高度的保守性，這種高度的保守性與其生物學(xué)功能有著密切的關(guān)系。

2 miRNA的生物學(xué)功能

miRNA可以通過(guò)堿基序列互補(bǔ)的方式結(jié)合到靶mRNAs的3'非翻譯區(qū)（3'UTR），形成RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物，誘導(dǎo)靶mRNA的降解和翻譯抑制。其與miRNAs的結(jié)合既可以一對(duì)多，也可以多對(duì)一。據(jù)預(yù)測(cè)，miRNA約調(diào)節(jié)著人類1/3的基因。決定靶miRNA最終是降解還是翻譯抑制取決于miRNA與靶miRNA轉(zhuǎn)錄體序列互補(bǔ)的程度這兩種方式，第一種是與靶mRNA轉(zhuǎn)錄體序列完全互補(bǔ)結(jié)合，這種結(jié)合方式可以導(dǎo)致靶mRNA的降解;第二種是與靶mRNA的特定轉(zhuǎn)錄體序列結(jié)合，這種方式則可以導(dǎo)致靶mRNA的翻譯抑制[9]。腫瘤中過(guò)表達(dá)的miRNA可能通過(guò)下調(diào)抑制腫瘤發(fā)生的靶miRNA以促進(jìn)腫瘤發(fā)生，而腫瘤中下調(diào)或缺失的miRNA通常會(huì)導(dǎo)致癌基因過(guò)度表達(dá)[10]。

3 miR-200c與卵巢癌的關(guān)系

3.1 miR-200c在卵巢癌中的表達(dá)? 目前研究發(fā)現(xiàn)，miR-200c在多數(shù)惡性腫瘤中呈低表達(dá)，如乳腺癌[11]、肝癌[12]、鼻咽癌[13]等，但在卵巢組織中，miR-200c的表達(dá)水平及其意義尚有爭(zhēng)議。Cao Q等[14]研究表明，與正常卵巢上皮組織相比，miR-200c在卵巢癌組織中的表達(dá)有所增加，并提示miR-200c的過(guò)表達(dá)與卵巢癌的進(jìn)展和預(yù)后密切相關(guān)。Pendlebury A等[15]研究采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，在卵巢癌組織和卵巢癌患者血清標(biāo)本中miR-200c的表達(dá)有增加趨勢(shì)，其結(jié)果認(rèn)為miR-200c具有作為卵巢癌血液生物標(biāo)志物的潛力。張寶璽等[16]研究發(fā)現(xiàn)，miR-200c在卵巢癌組織中表達(dá)顯著上調(diào)，并且在卵巢癌疾病發(fā)展過(guò)程中呈現(xiàn)出動(dòng)態(tài)變化，與卵巢癌組織病理及患者的預(yù)后有關(guān)。Meng X等[17]研究發(fā)現(xiàn)，miR-200c在上皮性卵巢癌中表達(dá)升高，并與腫瘤標(biāo)志物CA125水平呈現(xiàn)出正相關(guān)的關(guān)系，表明miR-200c可能為卵巢癌的診斷提供有價(jià)值的參考。施君等[18]研究發(fā)現(xiàn)，miR-200c在Ⅲc期卵巢漿液性囊腺癌中的表達(dá)水平顯著高于卵巢漿液性囊腺瘤組織，即miR-200c在惡性卵巢癌中的表達(dá)高于良性卵巢腫瘤。但也有研究發(fā)現(xiàn)[19]，高臨床分期和發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移的上皮性卵巢癌患者血清miR-200c水平低于低臨床分期和患非淋巴轉(zhuǎn)移患者。通過(guò)目前大多數(shù)研究發(fā)現(xiàn)，在卵巢癌發(fā)生進(jìn)展中，miR-200c的表達(dá)主要是上調(diào)的，且呈動(dòng)態(tài)變化，這可能與卵巢上皮細(xì)胞具有遷移的特點(diǎn)有關(guān)，即卵巢癌早期，卵巢癌細(xì)胞發(fā)生上皮化，轉(zhuǎn)變?yōu)椴灰走w移的卵巢癌細(xì)胞，miR-200c表達(dá)上調(diào);當(dāng)卵巢癌發(fā)展到晚期，上皮發(fā)生間充質(zhì)轉(zhuǎn)化，此時(shí)miR-200c表達(dá)呈低水平。

3.2 miR-200c對(duì)卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移的影響? 上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-to-mesenchymal transition，EMT）是指上皮細(xì)胞通過(guò)某些特定程序轉(zhuǎn)變?yōu)殚g質(zhì)表型細(xì)胞，主要特點(diǎn)為E-鈣黏蛋白等細(xì)胞黏附分子表達(dá)的減少、波形蛋白（vimentin）為主的細(xì)胞骨架增加，這種生物學(xué)過(guò)程可以使惡性腫瘤獲得較強(qiáng)的侵襲及轉(zhuǎn)移能力。E-鈣黏蛋白（E-cadherin，E-cad）的低表達(dá)降低了細(xì)胞間的緊密聯(lián)系，導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生間質(zhì)化，促進(jìn)惡性腫瘤的進(jìn)展。Sulaiman SA等[20]研究發(fā)現(xiàn)，miR-200c具有調(diào)節(jié)細(xì)胞的EMT功能，與卵巢癌的侵襲、轉(zhuǎn)移有關(guān)。吳海湉等[21]研究發(fā)現(xiàn)，過(guò)表達(dá)miR-200c能夠顯著抑制卵巢癌細(xì)胞株OVCAR3的增殖、侵襲和遷移能力，其認(rèn)為在卵巢癌的疾病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移能力的提高可能與miR-200c的表達(dá)下降有關(guān)。Chen D等[22]研究發(fā)現(xiàn)，CD117+CD44+卵巢癌干細(xì)胞中的miR-200c表達(dá)下調(diào)，過(guò)表達(dá)miR-200c后，細(xì)胞的侵襲和遷移能力顯著降低，且體外動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果也表明，上調(diào)miR-200c的表達(dá)能夠抑制CD117+CD44+卵巢癌干細(xì)胞移植瘤的生長(zhǎng)和肺轉(zhuǎn)移。目前，miR-200家族存在兩個(gè)可以與E-cad結(jié)合的靶點(diǎn)，鋅指轉(zhuǎn)錄因子ZEB1和ZEB2，ZEB1/ZEB2與E-cad結(jié)合，均可以抑制E-cad表達(dá)。魯艷明等[23]研究發(fā)現(xiàn)，上調(diào)miR-200c能抑制ES-2細(xì)胞的侵襲，促進(jìn)E-cad和ZEB2的蛋白表達(dá)，抑制波形蛋白的表達(dá)。Cochrane DR等[24]研究認(rèn)為，miR-200c低表達(dá)會(huì)使ZEB1表達(dá)異常，從而抑制E-cad;而提升miR-200c濃度可還原E-cad，顯著減少遷移和侵襲。惡性腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移涉及細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix，ECM）的破壞，Sun N等[25]研究表明，miR-200c的過(guò)表達(dá)降低了基質(zhì)金屬蛋白酶3（matrix metalloproteinase 3，MMP3）的表達(dá)和蛋白質(zhì)水平，而MMP3則是促進(jìn)ECM分解的蛋白酶，這也間接表明miR-200c抑制卵巢癌的轉(zhuǎn)移?？傊?，miR-200c發(fā)揮抑制卵巢癌生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移的作用，即miR-200c對(duì)卵巢癌患者起保護(hù)作用，但miR-200c在卵巢癌患者中表達(dá)上調(diào)的具體機(jī)制還需要進(jìn)一步研究。

3.3 miR-200c對(duì)卵巢癌化療的影響? 目前，晚期卵巢癌的化療藥物主要為鉑類+紫衫醇，80%～90%的卵巢癌患者對(duì)其敏感，但在治療過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，最終會(huì)因?qū)@些化療藥物產(chǎn)生耐藥性而導(dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā)，但其具體的耐藥機(jī)制尚不明確。Ⅲ類β-微管蛋白（TUBB3）是主要存在于神經(jīng)元細(xì)胞中的微管成分，TUBB3的表達(dá)是許多實(shí)體瘤中對(duì)微管結(jié)合化療藥物產(chǎn)生耐藥性的普遍機(jī)制，Prislei S等[26]研究表明，miR-200c可受到HuR的調(diào)控而表達(dá)上調(diào)，再使下游靶基因TUBB3表達(dá)下調(diào)，從而增強(qiáng)Hey細(xì)胞和HeC50細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性。陳志銘等[27]研究表明，過(guò)表達(dá)miR-200c可以降低卵巢癌細(xì)胞株A2780細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥性。劉杰等[28]研究發(fā)現(xiàn)，高濃度的miR-200c可以增強(qiáng)卵巢癌對(duì)紫衫類化療藥物的敏感性。Gao N等[29]研究發(fā)現(xiàn)，中藥梓醇可以使OVCAR-3卵巢癌細(xì)胞中的miR-200c表達(dá)上調(diào)，導(dǎo)致細(xì)胞中的MMP-2表達(dá)下調(diào)，從而抑制細(xì)胞增殖并加速細(xì)胞凋亡，抗miR-200c可促進(jìn)OVCAR-3細(xì)胞中MMP-2的表達(dá)，且抗miR-200c可顯著降低梓醇對(duì)OVCAR-3細(xì)胞增殖和凋亡的影響。

4總結(jié)

卵巢癌的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，隨著對(duì)卵巢癌發(fā)病機(jī)制和miR-200家族的深入認(rèn)識(shí)，許多與卵巢癌發(fā)展及轉(zhuǎn)移、耐藥的miRNA被發(fā)現(xiàn)和深入研究，其中miR-200c在卵巢癌中的作用值得肯定。miR-200c可以抑制卵巢癌的發(fā)展及侵襲，同時(shí)增強(qiáng)卵巢癌細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性，降低耐藥性，但其對(duì)卵巢癌的調(diào)節(jié)功能較為復(fù)雜，受多種因素影響，其表達(dá)水平的不一致性及其與作用的矛盾有待進(jìn)一步研究。而miR-200c應(yīng)用于卵巢癌的診斷與治療中仍需要進(jìn)一步探索。

參考文獻(xiàn)：

[1]Siegel RL，Miller KD，Jemal A.Cancer Statistics，2017[J].CA，2017（67）：7-30.

[2]Zuberi M，Mir R，Das J，et al.Expression of serum miR-200a，miR-200b and miR-200c as candidate biomarkers in epithelial ovarian cancer and their association with clinicopathological features[J].Clin Transl Oncol，2015，17（10）：840.

[3]Pignata S，Pisano C，Di Maio M，et al.Medical treatment of resistant or recurrent epithelial ovarian cancer[J].Ann Oncol，2006，17（7）：i49-i50.

[4]Rooth C.Ovarian cancer：risk factors，treatment and management[J].British Journal of Nursing，2013，22（Sup17）：S23-S30.

[5]蔣少云，薛棟，鄧嘉胤.小分子RNA在干細(xì)胞成骨及成軟骨分化中的作用[J].口腔醫(yī)學(xué)研究，2015，31（8）：845-847.

[6]Lee RC，F(xiàn)einbaum RL，Ambros V.The C.elegans heterochronic gene lin-4 encodes small RNAs with antisense complementarity to lin-14[J].Cell，1993，75（5）：843-854.

[7]Gregory PA，Bracken CP，Bert AG，et al.MicroRNAs as regulators of epithelial-mesenchymal transition[J].Cell Cycle，2008，7（20）：3112-3118.

[8]Senfter D，Madlener S，Krupitza G，et al.The microRNA-200 family：still much to discover[J].Biomolecular Concepts，2016，7（5-6）：311-319.

[9]Tay Y，Zhang J，Thomson AM，et al.MicroRNAs to Nanog，Oct4 and Sox2 coding regions modulate embryonic stem cell differentiation[J].Nature，2009，458（7237）：538.

[10]Wu H，Wang Q，Zhong H，et al.Differentially expressed microRNAs in exosomes of patients with breast cancer revealed by next generation sequencing[J].Oncol Rep，2019.

[11]Si L，Jiang F，Li Y，et al.Induction of the mesenchymal to epithelial transition by demethylation-activated microRNA-200c is involved in the anti-migrationinvasion effects of arsenic trioxide on human breast cancer cells[J].Mol Carcinog，2015，54（9）：859-869.

[12]Zhu SH，He XC，Wang L.Correlation analysis of miR-200b，miR-200c，and miR-141 with liver metastases in colorectal cancer patients[J].Eur Rev Med Pharmacol Sci，2017，21（10）：2357-2363.

[13]Shen YA，Lin CH，Chi WH，et al.Resveratrol Impedes the Stemness，Epithelial-Mesenchymal Transition，and Metabolic Reprogramming of Cancer Stem Cells in Nasopharyngeal Carcinoma through? p53 Activation[J].Evid Based Complement Alternat Med，2013（2013）：590393.

[14]Cao Q，Lu K，Dai S，et al.Clinicopathological and prognostic implications of the miR-200 family in patients with epithelial ovarian cancer[J].Int J Clin Exp Patho，2014，7（5）：2392.

[15]Pendlebury A，Hannan NJ，Binder N，et al.The circulating microRNA-200 family in whole blood are potential biomarkers for high-grade serous epithelial ovarian cancer[J].Biomed Rep，2017，6（3）：319-322.

[16]張寶璽，刁海丹，李江寧.lncRNA MALAT1和miR-200c在卵巢癌中的表達(dá)關(guān)系及臨床意義[J].河北醫(yī)藥，2019，41（4）：489-493.

[17]Meng X，Müller V，Milde-Langosch K，et al.Diagnostic and prognostic relevance of circulating exosomal miR-373，miR-200a，miR-200b and miR-200c in patients with epithelial ovarian cancer[J].Oncotarget，2016，7（13）：16923.

[18]施君，葉婧，周舟，等.miRNA-200c在IIIc期卵巢漿液性囊腺癌中的表達(dá)及其參與癌轉(zhuǎn)移中的作用[J].現(xiàn)代免疫學(xué)，2016，36（1）：36-41.

[19]陳志銘，任爽，紀(jì)妹.miRNA-200c在上皮性卵巢患者血清中的表達(dá)及其與臨床特征關(guān)系的研究[J].醫(yī)藥論壇雜志，2017，38（5）：35-37.

[20]Sulaiman SA，Ab Mutalib N，Jamal R.miR-200c Regulation of Metastases in Ovarian Cancer：Potential Role in Epithelial and Mesenchymal Transition[J].Front Pharmacol，2016（7）：271.

[21]吳海湉，張?jiān)?，林其德，?miR-200c過(guò)表達(dá)對(duì)OVCAR-3卵巢癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響[J].國(guó)際婦產(chǎn)科學(xué)雜志，2014，41（5）：509-512.

[22]Chen D，Zhang Y，Wang J，et al.MicroRNA-200c overexpression inhibits tumorigenicity and metastasis of CD117+CD44+ovarian cancer stem cells by regulating epithelial-mesenchymal transition[J].J Ovarian Res，2013，6（1）：50.

[23]魯艷明，銀鐸，王寧，等.miRNA-200c對(duì)卵巢癌細(xì)胞侵襲能力影響觀察[J].中華腫瘤防治雜志，2014，21（10）：732-735.

[24]Cochrane DR，Spoelstra NS，Howe EN，et al.MicroRNA-200c mitigates invasiveness and restores sensitivity to microtubule-targeting chemotherapeutic agents[J].Mol Cancer Ther，2009，8（5）：1055-1066.

[25]Sun N，Zhang Q，Xu C，et al.Molecular regulation of ovarian cancer cell invasion[J].Tumour Biol，2014，35（11）：11359-11366.

[26]Prislei S，Martinelli E，Mariani M，et al.MiR-200c and HuR in ovarian cancer[J].BMC Cancer，2013，13（1）：72.

[27]陳志銘，任爽，紀(jì)妹.miRNA-200c對(duì)卵巢癌A2780/DDP細(xì)胞順鉑耐藥性的影響[J].醫(yī)藥論壇雜志，2017，38（7）：44-46.

[28]劉杰，余芙蓉，董巍檑，等.miR-200c調(diào)控人類卵巢癌對(duì)紫杉醇敏感性的影響研究[J].臨床合理用藥雜志，2019，12（23）：136-137.

[29]Gao N，Tian J，Shang Y，et al.Catalpol Suppresses Proliferation and Facilitates Apoptosis of OVCAR-3 Ovarian Cancer Cells through Upregulating MicroRNA-200 and Downregulating MMP-2 Expression[J].Int J Mol Sci，2014，15（11）：19394-19405.

收稿日期：2019-10-30;修回日期：2019-11-07

編輯/杜帆